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峨边彝族自治县人民医院标本采集作业指导书第1页共98页前言检验报告是临床医师诊治疾病，判断预后，评估健康状况的重要依据。检验数据的价值首先体现在它的准确性上，只有准确的检验结果才能正确指导临床诊疗。而检验结果的准确与否，除了受检验过程中（检验中）各种因素的影响外，还受到检验前许多因素的影响，如采集标本前病人的状态，标本采集是否规范，标本的存贮和运输是否合理等。另一方面，检验数据的价值还体现在检验报告的正确应用上，正确地解读检验结果是正确应用检验报告的前提。临床医师拿到检验报告后，首先要对检验数据做全面的分析，排除各种干扰因素，才能做出正确判断。本手册的目的就是加强检验前和检验后两个环节的质量控制，保证检验结果的质量，使检验报告正确发挥指导临床诊断治疗的作用。对检验前环节，本手册提供了病人准备，标本的采集、保存及运输等方面的规范。对检验后环节，为帮助临床医师正确解读检验报告，本手册提供了正常参考值，医学决定水平，临床意义，及各种药物对检验结果的干扰等内容。因时间仓促，资料缺乏，加之水平有限，本手册的内容肯定存在许多缺陷。欢迎广大同行及时指正，以便修订。检验科2014年1月1日峨边彝族自治县人民医院标本采集作业指导书第2页共98页第一章检验前病人准备和标本采集病人准备和标本采集是检验质量保证的重要环节之一。由于病人受到各种内、外界因素的影响，检验结果可产生或大或小的误差。所以，检验前病人须作适当准备，减少随机分析误差。一、病人准备病人准备除了特殊检验有专门规定外，一般要求病人处于安静状态，生活饮食处于日常状态，目前已公认过度空腹、饮食、饮酒、吸烟及姿势体位等可影响某些检验结果，现分述如下：1.运动：肌肉活动的影响可分短暂性的和持续性的两类，短暂性影响为血浆脂肪酸含量，可因运动而暂时减少，而后渐渐增加而恢复。丙氨酸可因运动暂时增加达180%，而乳酸则可增加至300%。受到持续性影响主要是一些与肌肉有关的酶，如肌酸激酶、醛缩酶、乳酸脱氢酶等，据称一场60分钟的手球训练赛后11小时，肌酸激酶活性仍比赛前增加达125%，长期坚持体育锻炼还会提高性激素水平，因此采血前宜安静，不宜活动量过大。2.食物：多数试验要求在采血前禁食12h，因为饮食中的不同成分可直接影响实验结果。(1)餐后血液中ALT、GLU、BNU、Na等均可升高，但空腹达24h以上，可出现低血糖，血中TG、游离甘油及脂肪酸可增高。(2)高脂餐后2～4h采血，多数人ALP含量增高，主要来自肠源性同工酶，且与血型有密切关系，O型或B型兼为Le+分泌型者增高更为明显。(3)高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加，但不影响肌酐含量。(4)高比例不饱和脂肪酸食物，可减低胆固醇含量；香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。(5)含咖啡因饮料，可使血浆游离脂肪酸增加，并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。(6)食物如含有动物血液，可引起粪隐血假阳性。故在做相应检验时，应对食物有一定的控制。3.过度空腹：一般血液生化检验要求病人晚餐后禁食，至次日晨采血，空腹约12~14h。但过度空腹，若达24h以上，某些检验项目会有异常结果。例如血清胆红素可因空腹48h而增加240%；血糖可因空腹过长而减少为低血糖；血脂可因空腹过度导致：甘油三酯、甘油、游离脂肪酸增加，而胆固醇无明显改变。故空腹并非越长越好，近年国外有人主张胆固醇单项检验，不必空腹抽血。4.饮酒：饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、己醛、乙酸盐增加。长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高，平均红细胞体积增加，谷氨酰转肽酶（GGT）亦较不饮酒的人为高，甚至可以将这项作为嗜酒者的筛选检查。5.吸烟：瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%，而不吸烟者含量在1%以下。此外儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为多；血液学方面亦有变化，白细胞数增加，嗜酸粒细胞减少，中性粒细胞及单核细胞增多，血红蛋白偏高，平均红细胞体积偏高。Dalferes认为吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。6.药物：药物对检验的影响非常复杂，15000多种药物对检验有干扰作用。众所周知，抗结核药、抗生素、抗白血病制剂、磺胺类药物，对肝功能有大小不一的影响，甚至几片常用药物可以引起严重的药物反应，故在采样检查之前，暂停各种药物是为上策，如不可停用，则应了解可能对检验结果产生的影响。7.体位：体位影响血液循环，由于血浆和组织间液因体位不同而平衡改变，则细胞成分和大分子物质的改变较为明显，例如由卧位改为站位，血浆白蛋白可因此而浓度增大，总蛋白、酶、钙、胆红素、胆固醇及甘油三酯等亦因站位而浓度增加；血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数亦于站位时增加。8.其他：病人准备还应考虑病人的生物钟规律，因此复查以在大体相同的时间采样为好。采血时止血带结扎过久，也是一种误差因素，如以结扎1min的样品结果为基数，则结扎3min，可使血浆总蛋白增加5%，胆固醇增加5%，峨边彝族自治县人民医院标本采集作业指导书第3页共98页铁增加6%，胆红素增加8%。血气和PH值测定的血液以动脉血为原则，且不可漏气。细菌培养的样品要采用无菌技术，防止污染。二、标本采集标本采集是直接关系检验结果的基本功，如果标本采集不当，即使最好的仪器设备，最好的检验技术，也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误。现将各种标本采集要点分述如下：1.血液标本：分普通管、抗凝管两大类；抗凝管又根据抗凝剂不同分为草酸钾管、草酸钠管、枸橼酸钠管、乙二胺四乙酸二钾盐或二钠盐（EDTA-K2或EDTA-Na2）管、肝素管等。（1）草酸钾：与钙离子结合成草酸钙，使血液抗凝，常用量为1~2g/L血液。（2）草酸钾氟化钠混合抗凝剂：专供葡萄糖测定用，氟化钠1g，草酸钾3g混合，混合每4mg可使血液1ml抗凝。（3）枸橼酸钠：用于血沉及血凝检查。血沉（魏氏法）用109mmol/L(32g/L)枸橼酸钠0.4ml，与血液1.6ml混和；血凝多用38g/L，亦可用32g/L,以抗凝剂与血液1：9混和。（4）肝素：是一种粘多糖体，可抑制凝血酶原转化为凝血酶，使纤维蛋白原不能转化为纤维蛋白，以15+/-2.5IU抗凝1ml血。可用于生化和血液学检验标本，但不可用于筛选弥散性血管内凝血的血浆鱼精蛋白副凝试验（3P）和凝血酶试验。因肝素可与鱼精蛋白作用，发生沉淀使3P出现假阳性以及肝素的抗凝血酶作用出现严重干扰。（5）乙二胺四乙酸（EDTA）：能与钙离子络合而抗凝，通常血常规中用其钾盐EDTA-K2,或EDTA-K3。2.尿液标本：根据采集时间可分为晨尿、随意尿、空腹尿，计时尿（2h3h12h24h等），午后尿、餐后尿等。晨尿为住院病人留尿的主要方法，早晨起床后采集第1次排尿，可用于常规检验。随时尿不受时间的约束，多为门诊病人的留尿方法。空腹尿为进餐后4h左右排尿，收集下1次的尿液供检验，主要用于了解葡萄糖代谢情况。计时尿不论几小时，均应于计时开始进排空尿液，然后于规定时间内排尿，计时尿多用于肾功能和有形成成分排出率的评估，亦用计算淀粉酶或肌酐的排出率。24h尿多用于化学组分的测定，亦用于泌尿道抗酸杆菌的检查。尿液原则上不用防腐剂为好，如需12h或24h尿，首选以冷藏为妥，次为根据检验申请加用合适的防腐剂。3.粪便标本：采集后及时送检，如作原虫阿米巴检查应保持一定温度，且立即送检，立即检查。如检查虫体或绦虫头节，应全部粪便送检，如检查蛲虫则不必送送验粪样，而应于晨起排便前用棉拭擦肛门周围，可得虫卵。粪便标本不应污染容器外表，且不太满，30g容器装5~10g为妥。，如大便上有粘液或是血液，应采集此处标本，以提高阳性率，30min内送检，放置过久易导致细胞的破坏，特别是阿米巴等原虫。4.脑脊液、浆膜腔液、关节液：均由临床医师穿刺采样，检验科应提供专用的各种试管或容器，相互配合并及时检验。5.骨髓：采集由临床医师穿刺，检验科协助作骨髓涂片。6.胃及十二指肠液：一般均在门诊室或病房采集后送检，收样时应核对标本。胃液分基础胃酸分泌（BAO）、最大胃酸分泌（MAO）等；十二指肠液分甲、乙、丙管，甲管来自总胆管为橙黄色，乙管来自胆囊为黄绿色，丙管来自胆道为柠檬色，细菌培养应从乙管取样接种培养。7.痰液标本：采早晨第1口痰，多用于细胞学及微生物学检查。采样前应先反复漱口，经深呼吸数次后用力咳痰，不可吐入唾液。微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前，如已用药，则应选血药浓度最低时采样。8.阴道分泌物：由妇产科医师采样后送检，如成批送检应在37℃加温数分钟后检查，否则影响滴虫动力，容易漏检。9.精液和前列腺液：采集精液应在3~5天内勿排精，且于排精后30min内保温送达检验科，容器以广口小玻璃瓶峨边彝族自治县人民医院标本采集作业指导书第4页共98页为好，不可贮于避孕套或塑料瓶内。收到标本后应及时检查。前列腺液由医师作前列腺按摩术取样，收到标本后应立即检查。10.其他标本：根据具体检验项目而定。总之，各种检验标本的采集合适与否，直接关系检验质量，应予重视。（一）、临检标本采集要求1、血常规标本采集方法a)采血前，仔细核对血常规试管上的标签与化验单上的姓名、床号、住院号是否相符。b)检查血常规试管底部是否有抗凝剂。c)静脉血一般用肘静脉也可选用颈静脉或股静脉，采血处应避免有皮肤红肿、溃疡等现象。d)取1ml血，缓缓注入血常规试管中，或加血至标记线处，盖上盖子立即颠倒混匀不少于5次，避免剧烈振荡，以免产生气泡。一小时内送检。e)禁止在输液侧肢体采血或在输液后立即于该侧采血。f)实行一人、一针、一管、一带、一垫，防止交叉感染。g)若要进行比较性测定，应尽量在同一时间采血，不同时间的细胞数可能有较大的变化。h)由于血小板极易凝集，采血者应首先采集常规血，其次为出凝血、血沉，最后才是生化免疫。2、出凝血、血沉标本采集方法a)采血前仔细核对试管上的标签与化验单上的姓名、床号、住院号是否相符。b)检查试管底部是否有抗凝剂。c)尽量空腹采血，采血要顺利。d)缓缓向出凝血、血沉管中加血至刻度处，务必要准确，立即加盖，颠倒充分混匀5~6次。及时送检。3、其他常规血液项目标本采集方法a)血中微丝蚴：在夜间10时至凌晨2时之间，取末梢血2～3滴于干净玻片上，制成厚涂片，立即送检。b)红斑狼疮细胞（LE）：请到门诊处抽血。c)疟原虫：最好在全身开始寒战初期，将血滴涂成薄涂片，立即送检。d)肺炎支原体、衣原体抗体：采血约2ml置洁净玻璃管内，2小时内送检。4、尿液标本采集方法a)尿常规：取晨起第一次小便中段尿，或第二次小便中段尿约20ｍl置洁净器皿内，30min内送检。如急诊可取随机尿。b)尿淀粉酶（UAMY）：晨尿或随机尿约10ml，30min内送检。c)尿本周蛋白（Bence-Jones）：取晨尿20ml，30min内送检。d)乳糜试验：随机尿20ml，30min内送检。e)妊娠试验（尿hCG）：晨尿中段或随机尿中段约10ml，立即送检。f)尿三杯试验：采集标本时应连续排尿，中间不应有间断，各杯不少于10ml，立即送检。（二）、微生物标本采集要求正确的采取、处理与运送用于细菌培养的标本是临床细菌检验成功的关键，必须予以充分重视。1、血液培养标本的采集临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的患者，需做血液细菌培养以明确病原。及时、准确地从患者峨边彝族自治县人民医院标本采集作业指导书第5页共98页血液中分离出病原菌，才能正确实施有效的抗菌治疗，从而有助于治愈率的提高和医疗费用的降低。（1）采血时机：在患者发热期间越早越好，最好在抗菌治疗前，或在发冷、发热时，或发热前半小时为宜。（对已用药而不能中止的病人，也应在下次用药之前）。（2）采血的次数及间隔：根据研究，仅抽血培养1次分离率约占80%，培养2次的分离率约占90%，而培养3次的分离率约占99%。仅抽血培养1次，除了分离率低（其实因菌血症常会暂时消失）外，且将很难评估病原菌是污染还是与感染有关。如果抽血培养2次或3次，则能够得到肯定。在急性发热性疾病如脑膜炎、细菌性肺炎等需要马上做抗菌治疗或急性骨髓炎、化脓性关节炎等要急性手术的患者，应立即从两臂分别抽取2份标本，对感染性心内