PCR-程序文件

在控临床基因扩增检验实验室程序文件文件编号：WH5Y-5-PCR-201～218B版编制：审核：批准：生效日期：2011年9月20日武汉市医院检验科目录序号主题内容文件编号页码1各区域日常工作程序WH5Y-5-PCR-20122温度、湿度监控和记录程序WH5Y-5-PCR-20243清洁消毒程序WH5Y-5-PCR-20354生物安全及防护程序WH5Y-5-PCR-20465废弃物处理程序WH5Y-5-PCR-20576人员培训程序WH5Y-5-PCR-20687数据保护程序WH5Y-5-PCR-20798试剂和实验用品购买、验收和储存程序WH5Y-5-PCR-208109样本管理程序WH5Y-5-PCR-2091210样本采集运送程序WH5Y-5-PCR-2101311样本接收程序WH5Y-5-PCR-2111412样本的保存和安全处置程序WH5Y-5-PCR-2121513纸型记录和电子记录控制程序WH5Y-5-PCR-2131614报告单管理程序WH5Y-5-PCR-2141715保密和保护所有权程序WH5Y-5-PCR-2151816室内质量控制程序WH5Y-5-PCR-2161917室间质量评价程序WH5Y-5-PCR-2172218抱怨处理程序WH5Y-5-PCR-21823修订页日期文件标题文件编号页码修改者审阅者批准者武汉市？？医院检验科临床基因扩增实验室程序文件文件编号：WH5Y-5-PCR-201版本/修订号：B/0主题内容各区域日常工作程序受控状态：在控第1页共38页编制∕日期？？∕2011.9.12审核∕日期？？∕2011.9.18批准∕日期？？∕2011.9.20各区域日常工作程序1目的实验室各区域的各项工作有序进行、在控。2范围临床基因扩增检验实验室的各工作区域。3职责3.1责任人当班工作人员。3.2完成时间每一工作日。4工作流程本临床基因扩增实验室分为①试剂准备区；②样本处理区；③扩增分析区。4.1每周一下午准备本周使用的灭菌离心管和吸头、清洁消毒药品、手套、鞋套、工作帽和口罩等一次性消耗品,分装好放至各工作室。每工作日离开工作区域前进行实验台面的移动紫外线消毒，时间为60min。4.2样本收集4.2.1在样本接受处按WH5Y-5-PCR-212《样本保存和安全处置程序》清理门诊、病房样本，接收临时送到实验室的样本；不合格样本退回。注：此过程不可以打开样本盖；4.2.2将样本编号离心,按顺序登记在WH5Y-5-PCR-412《样本接收、拒收与报告单放送记录》中，并做好唯一性标识，然后将样本信息按序输入LIS系统中；4.2.3将清理好的样本转到免疫室冰箱冷藏室中，2～8℃存放时间不超过3天；4.2.4工作日取出标本，进行检测。4.3试剂准备4.3.1进入本室时穿白色工作服,戴帽子和手套，穿鞋套；4.3.2按当天工作量准备所需试剂；4.3.3收拾实验台面，并在作相应记录；4.3.4将试剂送至样本处理区门外台面上，脱掉手套、帽子、工作服和鞋套。4.4样本处理4.4.1进入本室时穿蓝色工作服,戴帽子和手套，穿鞋套；4.4.2将样本按序排放并核对；4.4.3对不同的样本类型及申请项目按相应的样本处理作业指导书进行处理；4.4.4实验过程中随时对物表进行清洁。有泄露发生时应立即对实验室进行清洁消毒,并记录；4.4.5加完质控品、对照品及待测模板后,瞬时离心放入冰箱,收拾实验台面,清洁、消毒，并作相应记录；4.4.6将反应管送至样本处理区门外台面上，脱掉手套、帽子、工作服和鞋套。4.5产物扩增分析4.5.1进入本室时更换红色工作服,戴帽子和手套，穿鞋套；4.5.2依次打开电脑显示屏、主机开关，DA7600扩增仪开关；打开软件，机器预热15～20min；武汉市？？医院检验科临床基因扩增实验室程序文件文件编号：WH5Y-5-PCR-201版本/修订号：A/0主题内容各区域日常工作程序受控状态：在控第4页共25页编制∕日期？？∕2011.9.12审核∕日期？？∕2011.9.18批准∕日期？？∕2011.9.204.5.3关闭软件，将反应管按预定位置放入反应槽内相应位置；4.5.4按DA7600作业指导书进行编程、运行；4.5.5检测结束时先将数据存盘,再进行分析后传入LIS系统；4.5.6收拾台面，并作相关记录；4.5.6脱掉本室工作服,脱掉手套、帽子、工作服和鞋套；4.6签发报告单4.6.1评价样本及质控数据,制作质控图表，并分析质控数据；4.6.2若出现不符合检测工作数据,则要查找原因,及时与临床联系,或进一步证实。对难以判断需复查的结果，登记清楚并简要写明原因；4.6.3核对检验结果，审核检验报告单；4.6.4收拾实验台面，并作相应记录。5.引用表格和文件5.1WH5Y-5-PCR-426《工作日志》武汉市？？医院检验科临床基因扩增实验室程序文件文件编号：WH5Y-5-PCR-202版本/修订号：A/0主题内容温度、湿度监控和记录程序受控状态：在控第5页共25页编制∕日期？？∕2011.9.12审核∕日期？？∕2011.9.18批准∕日期？？∕2011.9.20温度、湿度监控和记录程序1目的为确保样本、试剂始终处于指定环境，实验过程及仪器运行处在合适的环境条件，必须对实验室温度、湿度；冰箱、温箱的温度加以维持、监控，并作详细记录。2范围监控温度或湿度的实验室、各温控设备。3职责3．1责任人当班工作人员。3．2完成时间实验室温度、湿度，温控设备温度，每工作日进入该区域工作时记录1次，冰箱温度每天记录1次，干热恒温器每次试验前10分钟记录1次。3．3目标湿度、所有检测温度都在控制范围内。4工作流程4．1监控实验室温度、湿度：实验室温度应在15℃～30℃之间；湿度应在45％～80％（但30℃以上应低于70％）。温湿度计垂直挂在无阳光直射的地方；4.1.1读取温度、湿度，并记录在WH5Y-5-PCR-405《实验室温度、湿度监控记录》中；4.1.2如超出范围，此次记录用红色笔标记，并作相应处理；1小时后复查一次，如仍超出，暂停所有实验，报告上级采取相应纠正措施；4.2监控冰箱温度：冰箱冷冻室温度在15℃～－20℃、冷藏室温度在2℃～8℃等依具体贮存物品而定。4.2.1确认温度计水平放置于冰箱中,否则应放置1小时后补测一次温度；4.2.2读取即刻温度，并记录在WH5Y-5-PCR-406《控温设备温度监控记录》中；4.2.3如超出范围，此次记录用红色笔标记，并作相应处理，1小时后复查一次，如仍超出，将冰箱中物品移至另一合格冰箱中，填写WH5Y-5-PCR-411《设备故障报修申请及维修记录表》申请维修并报告上级。5引用表格和文件5.1WH5Y-5-PCR-405《实验室温度、湿度监控记录》5.2WH5Y-5-PCR-406《控温设备温度监控记录》5.3WH5Y-5-PCR-411《设备故障报修申请及维修记录表》武汉市？？医院检验科临床基因扩增实验室程序文件文件编号：WH5Y-5-PCR-203版本/修订号：A/0主题内容清洁消毒程序受控状态：在控第6页共25页编制∕日期？？∕2011.9.12审核∕日期？？∕2011.9.18批准∕日期？？∕2011.9.20清洁消毒程序1目的确保临床基因扩增检验实验室各个工作区始终保持无核酸污染和其它生物污染，保持实验室清洁。2范围临床基因扩增检验实验室各个工作区。3职责3.1责任人临床基因扩增检验实验室当班工作人员、保洁工人。3.2时间工作结束时、实验材料出现外溅时立即进行。3.3目标临床基因扩增检验实验室各个工作区始终保持无核酸污染和其它生物污染。4工作流程4.1当班工作人员完成如下清洁工作4.1.1工作区工作结束后必须立即对该区进行清洁消毒。带上乳胶手套，先用有效氯浓度为1500mg/L～2500mg/L的消毒液擦拭实验台面，再用75%酒精消毒液擦拭台面，再将移动紫外灯车的紫外灯调至实验台面上60cm，打开紫外灯定时照射至少30分钟；4.1.2任何时候发生实验材料（原始血液样本、血清／血浆样本、提取中的样本与试剂的混合液等）的泄漏时立即带上乳胶手套，拿吸水纸吸干泄漏液体，将吸水后的纸按WH5Y-5-PCR-205《临床基因扩增检验实验室废弃物处理程序》处理；污染的地方用有效氯浓度为1500mg/L～2500mg/L的消毒液浸泡45分钟以上，并盖上纸片避免挥发，确保使传染物完全灭活，再用消毒液擦拭；将移动紫外灯车的紫外灯调至污染面上60cm，打开紫外灯进行照射至少30分钟。在WH5Y-5-PCR-404《临床基因扩增检验实验室实验材料泄漏处理记录》中作相应记录。4.2按①试剂准备区；②样本处理区③扩增分析区的顺序使用各工作区专用的工作服、工作帽、工作鞋、一次性手套及清洁工具清洁地面。4.3有关实验器材周一消毒；工作服周四消毒洗涤；4.4保洁工人每月例行清洁玻璃窗、墙面时应按4.2项进行。5引用表格和文件5.1WH5Y-5-PCR-205《临床基因扩增检验实验室废弃物处理程序》5.2WH5Y-5-PCR-404《临床基因扩增检验实验室实验材料泄漏处理记录》武汉市？？医院检验科临床基因扩增实验室程序文件文件编号：WH5Y-5-PCR-204版本/修订号：A/0主题内容生物安全及防护程序受控状态：在控第7页共25页编制∕日期？？∕2011.9.12审核∕日期？？∕2011.9.18批准∕日期？？∕2011.9.20生物安全及防护程序1目的确保临床基因扩增检验实验室及工作人员的安全。2范围临床基因扩增检验实验室所有活动。3职责3.1责任人所有进入临床基因扩增检验实验室的人员。4工作流程4.1工作人员在任何时候应以安全和负责的方式开展工作。非本室工作人员或未经实验室主任同意者，限制或禁止进入实验室；实验室入口处贴生物危险标志；4.2进入各实验室前，必须穿专用实验服、鞋套。试剂准备区着白色实验服、样本制备区着蓝色实验服、扩增分析区着红色实验服；4.3操作过程中，应戴上手套；可能会出现危险物溅出时，应戴口罩和实验帽等；4.4只能用机械装置移液，严禁用嘴吸移液管。4.5防止实验室样品或试剂发生雾化或外溢污染。所有的操作过程应尽量细心，避免产生和溅出气溶胶。至少一天一次或在液体溅出时，都应进行台面消毒；4.6所有污染物或重复使用的材料在丢弃或重复使用前必须按WH5Y-5-PCR-205《临床基因扩增检验实验室废弃物处理程序》进行处理；4.7工作中发生内容物外溢或泄漏时，应对环境表面按WH5Y-5-PCR-203《临床基因扩增检验实验室清洁消毒程序》进行消毒处理。所有突发事件或事故应立刻向上级报告,并按“应急预案”采取有效措施，防止再次发生类似事件；4.8离开实验室时,所有实验人员要脱去专用实验服、手套、鞋套。必须洗手；下班时应确认关好水、电、门、窗；4.9所有生物污染废弃物在丢弃前，均应在室内使用可行的消毒方法进行预处理。转移时应置于耐用、防漏容器内，与密封普通废弃物一道运出实验室由医院集中进行处理；4.10当建立并进行PCR反应时，人员和物流应遵循单向走动的原则：实验室工作人员按单一方向流动，即按“试剂准备区”—→“样本制备区”—→“扩增分析区”的方向单一流动，严格禁止反向进入各实验区。即使是维护或服务人员，如果在一天内进入多区，也必须遵照此流动规则；4.11各实验区的工作用品和清洁用具标明区域，不得混用；4.12禁止在工作区域进行饮食、吸烟等非工作活动；工作区域冰箱内严禁存放非工作物品。5引用表格和文件5.1WH5Y-5-PCR-205《临床基因扩增检验实验室废弃物处理程序》5.2WH5Y-5-PCR-203《临床基因扩增检验实验室清洁消毒程序》武汉市？？医院检验科临床基因扩增实验室程序文件文件编号：WH5Y-5-PCR-205版本/修订号：A/0主题内容废弃物处理程序受控状态：在控第8页共25页编制∕日期？？∕2011.9.12审核∕日期？？∕2011.9.18批准∕日期？？∕2011.9.20废弃物处理程序1.1目的确保临床基因扩增检验实验室的医疗废弃物对环境不产生污染。