组织脱细胞试剂及方法对比

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组织脱细胞应用的试剂及方法试剂/方法作用方式对ECM的影响化学方法酸碱溶解细胞质成分、破碎核酸、使蛋白质变性可能破坏胶原、GAG及生长因子高低渗破裂细胞、打断DNA与蛋白质之间的相互作用能够有效地裂解细胞,但是不能够有效的去除细胞残骸非离子去污剂TritonX-100打破DNA-蛋白质之间的相互作用,破裂脂-脂及脂-蛋白之间的相互作用作用效果依据组织不同而不同,对较薄的组织脱细胞更有效,部分破坏ECM超微结构并部分的去除GAG,效果较SDS差离子去污剂SDS溶解细胞和核膜,使蛋白变性有效地去除致密组织中的细胞核残留及细胞质蛋白,去除GAG和生长因子,破坏胶原脱氧胆酸盐根据组织的厚度不同效果不同,对ECM超微结构的部分破坏及部分的去除GAGTritonX-200能够较好的去除较薄组织中的细胞,但对ECM超微结构的破坏比其他去污剂更严重两性离子去污剂CHAPS兼具离子去污剂及非离子去污剂的特性较好的去除较薄组织中的细胞,伴随轻微的超微结构的破坏SB-10,SB-16较好的去除较薄组织中的细胞,伴随轻微的超微结构的破坏其他溶剂醇类通过脱水作用使细胞溶解,溶解并去除脂肪有效去除致密组织中的细胞,灭活致热源,使包括胶原在内的蛋白发生交联和沉淀丙酮通过脱水作用使细胞溶解,溶解并去除脂肪有效去除致密组织中的细胞,灭活致热源,使包括胶原在内的蛋白发生交联和沉淀TBP与金属形成稳定的复合物,打断蛋白-蛋白之间的相互作用根据组织不同效果不同,损失致密组织中的胶原,但对机械性能的影响轻微生物学方法-酶法核酸酶催化核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸链的水解难于将其从组织中去除,可能引起免疫反应胰酶将C端多肽降解成精氨过长时间的胰酶作用会破坏ECM酸和赖氨酸的超微结构,去除ECM的组分如胶原、层粘连蛋白、纤连蛋白、弹力蛋白和GAG,对GAG的去除作用较去污剂缓慢中性蛋白酶降解特定的肽,主要是纤维连接蛋白和IV型胶原长时间作用会破坏ECM的超微结构,去除ECM的组分如纤维连接蛋白和IV型胶原螯合物EDTA,EGTA结合金属离子,因此破坏细胞对ECM的黏附一般与酶共用(如胰酶)也可与其他试剂连用,单独作用效果不明显物理学及其他方法温度(冻融)细胞内形成冰晶导致细胞破裂冰晶形成能够使EMC发生断裂压力压力能破裂细胞,主要用于松软的组织压力能够破裂ECM电穿孔脉冲电刺激能够裂解细胞膜能够破裂ECM灌注法使化学试剂作用充分,有利于细胞的去除压力结合灌注可使ECM发生断裂组织梯度压力使化学试剂作用充分,有利于细胞的去除可使ECM发生断裂超临界流体压力可使细胞破裂,超临界流体使化学试剂作用充分,有利于细胞的去除可使ECM发生断裂搅拌能够裂解细胞,但更多的用于使化学试剂作用充分,有利于细胞的去除搅拌或超声处理可使ECM发生断裂

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