石河子大学生命科学学院植物代谢与生理实验实验一、小液流法测定植物组织水势专业、年级:生物科学2013级3班完成日期:2015年3月28日石河子大学生命科学学院植物代谢与生理实验实验一小液流法测定植物组织水势摘要植物组织的水势测定是植物生理学的基本实验之一。用小液流法测定植物组织的水势,设备简单,方法简便,在中学及一般基层单位都可以做到。但实验结果因受众多因素的影响,往往差距较大,重现性不理想。本文对影响实验结果的诸因素试作分析,并求找出解决的办法。关键词植物组织;小液滴;移动方向;溶液浓度;引言1实验目的了解植物体内不同组织和细胞之间、植物与环境之间水分的移动与植物组织水势的关系;掌握小液流法测定植物组织水势的基本方法。2实验原理植物组织的水分状况可用水势来表示。植物体细胞之间、组织之间以及植物体与环境之间的水分移动方向都由水势差决定。将植物组织放在已知水势的一系列溶液中,如果植物的水势小于溶液的渗透势(溶质势),则组织吸水而使溶液浓度变大;反之,则植物细胞内水分外流而使溶液浓度变小;若植物组织的水势与溶液的渗透势相等,则二者水分保持动态平衡,所以外部溶液浓度不变,而溶液的渗透势即等于所测植物的水势。组织的吸水或失水会使溶液的浓度、密度、电导率以及组织本身的体积与质量发生变化。根据这些参数的变化情况可确定与植物组织等水势的溶液。可以利用溶液的浓度不同其比重也不同的原理来测定试验前后溶液的浓度的变化,然后根据公式计算出溶液的水势,即为植物组织的水势。溶液水势的计石河子大学生命科学学院植物代谢与生理实验算:Ψw=ψs=-icRT(MPa)式中:Ψw——溶液的水势(MPa);R——气体常数(0.0083L·MPa·mol-1·K-1);T——热力学温度(单位为K,K=273+t);i——为溶液的等渗系数(蔗糖为1);c——等渗溶液的摩尔浓度(mol/L)。3材料与方法3.1实验材料试管、毛细滴管、移液管、剪刀、镊子、甲烯蓝、菠菜叶片3.2实验步骤3.2.1首先配制一系列不同浓度的蔗糖溶液(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8mol/L)各10ml注入8支试管中,各管都加上塞子,并编号。按编号顺序在试管架上排成一列,作为对照组。表1中母液为1mol·L-1的蔗糖溶液。表1配制蔗糖标准液试管号12345678M(mol/L)0.10.20.30.40.50.60.70.8母液(ml)12345678蒸馏水987654322.另取8支试管,编好号,按顺序放在试管架上,作为试验组。然后由对照组的各试管中分别取溶液4ml移入相同编号的试验组试管中,再将各试管都加上塞子。3.用剪刀将菠菜叶剪成约0.5cm2大小相等的小块60—80片。向试验组的每一试管中各加相等数目(约10片)的叶片小块,塞好塞子,放置30分钟,在这段时间内摇动数次,到时间后,用大头针沾取少许甲烯蓝粉末加入每一试管中,并振荡,此时溶液呈蓝色。4.用毛细滴管从试验组的各试管中依次吸取着色的液体少许,然后伸入对照组的相同编号试管的液体的中部,缓慢从毛细滴管尖端横向放出一滴蓝色试验溶液,并观察小液滴移动的方向。如果有色液滴向上移动,说明溶液从细胞液中石河子大学生命科学学院植物代谢与生理实验吸出水分而被冲淡,比重比原来小了;如果有色液向下移动,则说明细胞从溶液中吸了水,溶液变浓,比重变大;如果液滴不动,则说明试验溶液的密度等于对照溶液,即植物组织的水势等于溶液的渗透势。记录液滴不动的试管中蔗糖溶液的浓度。重复测定一次。按RTiCw计算水势。式中w为细胞水势。4结果与分析4.1试管号12345678溶液浓度(mol/L)0.10.20.30.40.50.60.70.8液滴移动的方向↓↓↓↓↓↑↑植物组织细胞吸水吸水吸水吸水平衡吸水失水失水Ψw与ψπ的比较Ψw<ψπΨw<ψπΨw<ψπΨw<ψπΨw=ψπΨw<ψπΨw>ψπΨw>ψπ第6号试管的结果出现差错与理论不符,在经过多次的重做后依然不理想Ψw=ψs=-icRT(MPa)计算得Ψw=-1.2367(MPa)4.2在切割菠菜叶片的时候应该做到大小、部位尽量一致,并且在投放数量的时候应该保持一致,切完后应该立刻迅速的放入试管中以防止水分的散失。4.3在放入甲烯蓝的时候应该放入少许的量,否则会使得溶液的浓度过高而使得颜色过深,以免影响溶液的比重。4.4当用毛细滴管滴加试验组的溶液时不宜过多,且在对照组中滴加时应缓慢,防止过急挤压冲力影响液滴移动。4.5观察液滴移动状况最好放在一个白色的背景下进行。5讨论5.1小液流法测定植物组织水势有何优缺点?石河子大学生命科学学院植物代谢与生理实验设备简单,方法简便,在一般的条件下都可以做到。但实验结果因受众多因素的影响,往往差距较大,重现性不理想。5.2用小液流法测定植物组织水势时,为什么应强调所用试管、毛吸管应保持干燥,打取小圆片并投入试管中时动作应迅速,加入甲烯蓝不能太多?若不干燥则会使得溶液的水势降低;投入试管中应迅速是为了防止叶片水分的蒸发,避免试验组的水势降低;甲烯蓝过多会影响溶液的比重,最终会影响实验结果。5.3如果小液滴在各对照溶液中全部上升(或下降),说明什么问题?应如何改进实验设置?若全部上升则说明溶液的浓度取得过大,应该将浓度降低;全部下降则说明浓度过小,应该降低浓度。参考文献:[1]韦善君,农钧琇,马廷娟,邹慧敏,沈光涛,戴景峰.小液流法测定植物组织水势[J].植物生理学报,2014,12:1899-1902.[2]石雪芹,朱晔荣,赵念席,沈广爽.“小液流法”测定植物组织水势实验教学[J].实验室科学,2014,01:42-43+46.[3]廖建良.“小液流法”测定植物组织水势初探[J].惠州大学学报(自然科学版),1996,04:98-99.