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实验室生物安全临床实验室的主要危害一、化学危害易燃、腐蚀、有毒、有害等化学药品二、物理危害核辐射、激光、紫外线、电磁场、噪声临床实验室的主要危害三、生物危害1.细菌：肠道致病菌、结核分枝杆菌等2.病毒：HBV、HCV、HIV等3.真菌4.寄生虫：弓形虫、疟原虫、利什曼原虫临床实验室病原体的来源1.动物：实验动物等2.病人标本：血液等3.微生物的培养物4.基因工程菌实验室病原体污染的对象1.空气：实验操作产生含病原体的气溶胶2.水：实验过程中产生病原体污染的废水3.人体：人是实验室最易受到污染的对象4.物体表面：仪器、台面、地面、墙壁等实验室获得性感染的途径一、直接接种：锐利物刺伤、动物抓咬伤二、经口传播：“手-口”等三、粘膜接触：飞溅、手接触、化妆等四、节肢动物媒介：昆虫叮咬五、空气传播：吸入含病原体的气溶胶实验室获得性感染的途径气溶胶－实验室的隐形杀手定义：悬浮于气体介质中粒径介于0.001～100μm的固态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系实验室获得性感染的途径实验室中产生气溶胶的实验操作1.吸液操作2.注射器操作3.接种环（针）操作4.离心、混匀、振荡5.镜检涂片时，液丝断裂6.传染性材料的开盖及倾倒实验室生物安全防护在实验室环境下，处理和保存感染性物质的过程中采用一系列的防护措施1.一级防护：采用规范的微生物技术和适当的安全设备，以保护实验室工作人员及室内环境免受感染性物质污染实验室生物安全防护2.二级防护：合理的实验室建筑设计和严格规范的操作流程，以保护实验室外环境不受感染性物质污染实验室生物安全管理要素p1891.实验室建筑设计2.实验室安全设备3.实验室个人防护用品4.实验室工作流程及操作规程5.消毒及废弃物处理实验室生物安全管理的要素6.实验室安全管理制度7.实验人员安全培训及考核8.完整的工作记录临床实验室的设计p1901.实验室设计与其安全防护级别相适应2.实验室安全防护级别与其可能受到的生物危害程度相互对应3.生物危害程度主要取决于病原微生物的种类及其浓度与活性实验室的设计一、实验室生物危害程度评估p1901.WHO和我国卫生部《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》据病原微生物的相对危害程度分：危险度1～4级2.我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》据危害程度将病原微生物分为4类危害程度与上述的危险度顺序相反病原微生物危害度分类一、第一类病原微生物p1901.引起人或动物非常严重疾病，及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物2.天花病毒、新疆出血热病毒、埃博拉病毒、马尔堡病毒、猴痘病毒等病毒病原微生物危害度分类二、第二类病原微生物1.引起人或动物严重疾病，较易直接或间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物2.口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、HIV、乙型脑炎病毒、狂犬病毒、SARS冠状病毒、prion（朊病毒）等3.炭疽芽孢杆菌、结核分枝杆菌、霍乱弧菌、鼠疫耶尔森菌等病原微生物危害度分类三、第三类病原微生物1.引起人或动物疾病，但一般情况下对人、动物或环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并具备有效防治措施的微生物2.肝炎病毒、HPV、肠道V、流行性感冒V、麻疹V、流行性腮腺炎V等3.衣原体、放线菌及临床常见病原细菌病原微生物危害度分类四、第四类病原微生物通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物第一、二类称为高致病性病原微生物实验室的设计二、实验室生物安全防护级别1.生物安全实验室（BSL）在研究传染性疾病或进行微生物操作时，能够避免生物有害因子（微生物及其毒素）意外伤害的实验室2.生物安全实验室分为四级实验室分级处理对象BSL-1对人体和环境危害较低、不会引起健康成人疾病的微生物BSL-2对人体和环境有中等危害或具有潜在危险的微生物BSL-3主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致命疾病的致病微生物及其毒素。通常有预防治疗措施BSL-4对人体有高度危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明的致病微生物及其毒素。尚无有效预防治疗措施二、实验室生物安全防护级别3.高致病性病原微生物实验活动应在三级、四级实验室中进行p1904.临床诊断、检测检验工作在二级实验室中进行三、实验室建筑设计要求p191～192实验室的设计实验室安全设备和用品一、实验室安全设备1.生物安全柜2.有净化装置的通风系统3.消毒灭菌设备：高压灭菌器和紫外灯超净台不是实验室安全设备实验室空气实验室安全设备和用品二、个人防护1.物理性防护：对呼吸道和眼睛的防护。防护服(实验服、隔离衣、连体衣)、防护帽、口罩、面罩、手套、护目镜等2.免疫接种：预防性。疫苗或抗血清接种实验室安全设备和用品三、生物安全柜p193实验室安全设备和用品三、生物安全柜1.Ⅰ级生物安全柜（BSC）负压柜保护操作人员和环境不受污染，适用于生物安全水平中对样品无保护要求的实验室实验室安全设备和用品三、生物安全柜2.Ⅱ生物安全柜（BSC）层流负压柜可以安全地保护样品、人员和环境Ⅱ级生物安全柜分为A型（A1、A2）和B型（B1、B2）三、生物安全柜可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出的操作、处理高浓度或大容量感染性材料的操作，均应在生物安全柜或其它物理抑制设备内进行，并使用个人防护用品实验室安全设备和用品实验室安全设备和用品四、个人防护设备BSL－1实验室设施BSL-2实验室实验室安全操作规范一、实验室安全管理制度成立安全管理机构二、实验室安全操作规程三、实验室人员安全培训四、良好的个人行为习惯感染性废弃物及其处理一、实验室废弃物p202实验室将要丢弃的所有物品1.化学废弃物2.感染性废弃物3.放射性废弃物感染性废弃物及其处理二、感染性废物1.携带病原微生物，具有引发感染性疾病传播危险的医疗废物2.废弃的标本、被标本污染的物品和容器、病原微生物的培养物及实验废弃物、使用后的一次用品等感染性废弃物及其处理二、感染性废物3.操作感染性废物或任何有潜在危害的废物时，穿戴手套和防护服感染性废弃物及其处理三、感染性废物的安全处理首要原则：实验室内清除污染1.化学消毒2.高压消毒感染性废弃物及其处理三、感染性废物的安全处理1.严格区分感染性和非感染性废物2.感染性废物都必须进行密闭包装固体感染性废物：用红色或桔黄色聚乙烯或聚丙烯包装袋感染性废弃物及其处理三、感染性废物的安全处理2.感染性废物都必须进行密闭包装有液体的感染性废物：无泄漏的容器3.标签和标志装感染性废物的容器，贴“生物危害”标志和“感染性物品”标签感染性废弃物及其处理三、感染性废物的安全处理4.处理方法物理灭菌：高压蒸汽、干热、气体化学消毒：化学消毒液处理液体废物和固体表面（表面无孔和无吸附作用）感染性废弃物及其处理三、感染性废物的安全处理5.临床实验室各种感染性废物的处理方法5.1液体感染废物收集在防漏、未破损的容器内，经高浓度化学消毒剂作用感染性废弃物及其处理三、感染性废物的安全处理5.临床实验室各种感染性废物的处理方法5.2标本、细菌培养物，特别是来自分枝杆菌、真菌和病毒实验室物品：置坚固而密闭的容器里，在实验室内高压蒸汽灭菌感染性废弃物及其处理三、感染性废物的安全处理5.实验室各种感染性废物的处理方法5.3感染动物尸体或鸡胚：置坚固而密闭的容器里，在实验室内高压蒸汽灭菌5.4高毒力微生物污染的物品：必须经高压蒸汽灭菌感染性废弃物及其处理三、感染性废物的安全处理5.实验室各种感染性废物的处理方法5.5污染的锐利物针头、注射器、剪刀、刀、毛细管、破损的玻璃器皿等能刺破皮肤的物品不得进行折弯、折断、回盖等感染性废弃物及其处理三、感染性废物的安全处理5.5污染的锐利物不要用手去改变针具的外型、破坏其与附属物的联接，不与其他废物混和丢弃置于有消毒液的不能穿透的容器内，经高压蒸汽灭菌后丢弃或处理后保存实验室安全的一般要求1.实验工作区禁止吸烟：火种、传染微生物和接触毒物2.实验工作区不得有“手－口”接触可能的物质：食物、饮料等3.实验工作区冰箱禁止存放食物实验室安全的一般要求4.化妆品：实验工作区内禁止进行化妆，但允许实验人员使用护手霜5.眼睛和面部的防护：处理可通过皮肤和粘膜感染的物质，或有可能发生溅溢时，戴护目镜、面罩实验室安全的一般要求6.实验室内禁止进行戴、取、洗隐形眼镜的行为7.实验室的危险区内，不要戴隐形眼镜，除非同时使用护目镜或面罩实验室安全的一般要求8.服装：所有人员在实验区内必须穿着遮盖前身的长袖隔离服或长袖长身的工作服9.鞋：工作区内应穿舒适、防滑、并能保护整个足部的鞋。最好穿由皮革或其他防渗漏合成材料制作的鞋实验室安全的一般要求10.头发和饰物长发盘在脑后，最好戴发套或帽子不得佩戴有可能被卷入机器或可垂入传染性物质的饰物11.胡须：留有胡须的男性应遵守上项的规定实验室安全的一般要求12.洗手在脱下手套后、离开实验室前、接触患者前后、打电话前以及在进食或吸烟前都应该洗手接触血液、体液或其他污染物后，应立即洗手实验室安全的一般要求13.移液：禁止用口移液，应使用助吸器具14.工作环境“清洁”区、“半清洁”区和“污染”区冰箱、冷冻柜、水浴箱和离心机等设备应定期清洗和消毒，在发生严重污染后应立即进行清洗和消毒垃圾处理：及时实验室安全的一般要求14.工作环境实验工作区不得存放个人物品实验工作区内的废弃物存量不要太大实验室出口和通道必须保持畅通无阻实验室内禁止铺地毯实验室可开启的窗户应安纱窗实验室安全的一般要求15.离心机离心时应控制气溶胶的产生在最低水平离心机只有在盖好盖板后，才能启动使用有盖离心管无盖离心管需在停机30min后才能开盖实验室安全的一般要求16.实验室中的设备间应保持一定空间，以便于清洁17.实验室中应有专门放置生物废弃物容器的台或架18.安全标识19.安全问题向上报告制度一级生物安全柜气流形式房间空气污染空气HEPA过滤空气Ⅱ型BSC气流形式A70%BB130%B2室内室内管道排到室外0三级生物安全柜气流形式房间空气污染空气HEPA过滤空气Smokeflow