地西泮的质量研究

华中科技大学硕士学位论文地西泮的质量研究姓名：江莹申请学位级别：硕士专业：药物分析学指导教师：江明;姜红2010-11-09华中科技大学硕士学位论文1地西泮的质量研究研究生：江莹导师：江明（讲师）姜红（教授）中文摘要本课题系统地对地西泮及制剂的质量控制方法进行了研究。建立了地西泮有关物质分析方法；确证了其中三个有关物质的结构；研究了影响其固体制剂和液体制剂质量的主要控制项目。为地西泮及其制剂质量标准的提高、不同生产企业产品的质量评价以及该品种的生产过程控制提供了基础和依据。课题分为三部分：一、原料的主要质量控制方法及杂质对照品研究。建立了地西泮有关物质的RP-HPLC分析方法；采用LC-MS联用技术和定向合成技术，对所含的主要杂质进行了研究，得到了地西泮3个杂质并确证了其结构；测定了其对于地西泮的响应因子并标化了杂质对照品。本研究为该品种的系统质量研究及评价奠定了基础。二、固体制剂溶出特性研究。建立了新的溶出度测定方法。采用4个不同pH的溶出介质，考察不同厂家的地西泮片的溶出特性，采用f2因子法对其溶出行为进行评价。结果显示国内不同厂家样品的溶出行为差别较小，但发现中国药典原溶出度测定方法不能反映溶出特性的差异。本研究为中国药典溶出度检查方法的修订以及该固体制剂的溶出特性评价提供了依据。三、液体制剂中防腐剂研究。建立了地西泮注射液中防腐剂苯甲醇的定量方法并对处方的合理性进行了探讨。本研究为将液体制剂中非活性成分的控制纳入质量标准的必要性提供了依据。【关键词】地西泮；有关物质；响应因子；溶出度；苯甲醇；RP-HPLC；LC-MS华中科技大学硕士学位论文2StudiesOnQualityForDiazepamCandidate:JiangYingSupervisor:JiangMingJiangHongAbstractThepapersystematicallystudiedonqualityforDiazepamanditspreparations.Themethodforthetestofrelatedsubstancesindiazepamwasdevelopedandvalidated.Structuresofthreerelatedsubstancesweredetermined.Thispaperalsodidaseriesofworkinthekeylinkofqualitycontrolofthesolidandliquidpreparations.ThewholeworkprovidedreferenceforthereinforcementoftheNationalDrugStandard,aswellasforthequality-evaluationandthequality-controlintheprocessingofdiazepam.Thepaperconsistedofthreeparts:First,studyonthemainmethodsforqualitycontrolofAPI(ActivePharmaceuticalIngredient),aswellasthereferencesubstancesoftheimpurities.EstablishedanRP-HPLCmethodfortheanalysisofrelatedsubstancesindiazepam.Thevalidationresultshowedthatthismethodwasconvenient,sensitive,andhadagoodspecificity.Subsequently,weanalyzedthecrudeproductsanddecomposablecompoundsofdiazepambyLC-MS,determinedthreerelatedsubstances,preparedthembyrationalsynthesisanddeterminedtheirmolecularstructuresbyUV,IR,MS,NMR.Then,thepuritiesoftheserelatedsubstanceswerecalculatedandtheresponsefactorswerealsodeterminedfortheselectionofthequantativemethodsoftheserelatedsubstances.Second,studyonthedissolutionpropertyofdiazepamtablets.Developedanew华中科技大学硕士学位论文3methodfordissolutiontest,carriedoutthetestsinfourmediumswithdifferentpHvalues,andevaluatedthedissolutionpropertiesofthetabletsproducedbydifferentfactoriesbyf2factor.Theresultsindicatedthatasmallvariationexistedinthedissolutionpropertiesofthesetablets,butalsoshowedthatthemethodinCh.pcouldnotreflectthedissolutiondifferences.Thestudyprovidedsuggestionandreferenceforthedissolutionmethodrevisionandevaluationforthedissolutionofsolidpreparations.Third,studyonpreservativeinliquidpreparation.Setupandvalidatedthedeterminationmethodforbenzylalcohol,whichactedaspreservativeindiazepaminjection.Discussedtherationalityandscientificalnessoftheprescription.ThestudyprovidedreferenceforthenecessitytoincorporatethecontrolofinactivecomponentsofliquidpreparationsintotheNationalDrugStandard.【KeyWords】Diazepam,RelatedSubstance,ResponseFactor,Dissolution,BenzylAlcohol,RP-HPLC,LC-MS独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在_____年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日华中科技大学硕士学位论文4前言地西泮又名安定，是于上个世纪六十年代上市的一种苯二氮卓类药物，于七十年代用于临床，属于国家管制的二类精神药品。苯二氮卓类药物在治疗剂量具有镇静、催眠、抗焦虑，以及抗惊厥、抗震颤和中枢性肌肉松弛作用，临床上常用于治疗失眠、焦虑、癫痫等；但过量服用可能会导致严重的不良反应，如共济失调、昏迷、呼吸抑制等；长期服用会产生耐受性，依赖性及成瘾性[1]。随着社会生活步伐的加快和工作压力的增加，睡眠障碍和焦虑问题日益增多，本类药物临床需求量及滥用现象也呈上升趋势。为了保证患者服药的安全性，有效性，在质量检测这个环节上，应建立完善的药品标准，从各方面实现严格的监控。目前国内外对于地西泮及其他苯二氮卓类的药物研究，主要在苯二氮卓相关受体[2]-[4]和药理作用[5]-[7]等方面，而对其质量控制，尤其是有关物质分析方面的的研究文献很少。本课题分为三部分：1.地西泮有关物质分析及杂质对照品研究药品中的有关物质泛指在药品的生产和（或）贮存过程中产生的工艺杂质或降解产物[8]。有关物质的分析应考虑合成生产过程中的中间体、副反应产物，以及贮存过程中的降解等因素，多采用色谱法分析，如TLC，HPLC，GC，CE，随着分析技术的发展，色谱-质谱联用也越来越多的应用于该项检查，在定量同时还可获得结构信息。目前我国药品标准多采用不加校正因子的主成分自身对照法，控制有关物质的总量和（或）昀大单个有关物质量，大都未明确其结构，这种分析方法缺乏针对性，不能有效的控制，也不能对药品的生产过程提供指导。为提高人民用药的安全性和有效性，对于有关物质分析，应根据有关物质的结构，性质等，有针对性的建立灵敏可靠的分析方法和合理的限度，达到有效的控制，同时对科学的生华中科技大学硕士学位论文5产和贮存也具有指导意义。本部分首先建立了地西泮有关物质分析的RP-HPLC方法，以LC-MS分析地西泮粗品原料，获得了相关杂质的一级、二级质谱，结合地西泮生产工艺和强制破坏试验，确定了三种杂质结构。通过定向合成技术获得了杂质单体并进行了结构确证。昀后对杂质单体进行了标化，并测定了三个杂质相对于地西泮的响应因子值。本研究为该品种的系统质量研究及评价奠定了基础。2.地西泮片溶出特性评价。溶出度系指药物从片剂、胶囊剂或颗粒剂等固体制剂在规定条件下溶出的速率和程度[8]。它是模拟人体吸收环境的体外试验，能较为直观的反映药物在体内的溶出性能。对于口服固体制剂，溶出度作为一种简单价廉的方法，在一定条件下与制剂的生物利用度有一定的相关性[9][10]，故溶出度试验已作为一种控制药品内在质量的重要指标，广泛应用于药品的研发、生产和监督检验中[11]。我国自1985年开始，正式在中国药典中收载该检查法。但目前我国溶出度质量[8]标准的拟定，仍存在不足，如溶出介质的选择不合理，介质中含有大量的有机溶剂；转速设置不合理，搅动速度过快，等等。强烈的溶出条件似乎更倾向于为了让产品合格而建立，并不能模拟人体环境，偏离了溶出度检查法建立的初衷，且导致实验结果大都可达到合格，不能准确的区分制剂质量的优劣，更不能通过溶出度的控制，达到促进生产厂家不断完善药品生产工艺，提高药品生产水平的目的。故，开展溶出度评价工作是必要的，有利于我国口服制剂整体工艺水品提高。评价溶出度的方法有很多种，可分为非模型依赖法和模型依赖法，前者包括有f2因子法、多变异法、方差分析和协方差分析等；后者包括Weibull模型、Logistic模型、Higuchi模型等[12]-[14]。其中f2因子法自1999年被美国FDA采用以来，被越来越多的应用，目前为FDA推荐的评价溶出度的首选方法。该方法由Moore和Flanner昀先提出[15]，其计算方法为：2f=}100*])(11lg{[505.021−=∑−+ntTtRtn华中科技大学硕士学位论文6其中Rt和Tt为各取样点参比和供试制剂的平均溶出率，n为取样点个数。当50≦f2≦100时，则供试制剂的溶出曲线与参比制剂相似。f2因子法能综合考虑溶出行为间的差异，且计算方便，通过简单的数字便可对溶出曲线进行比较[16][17]。本部分参照日本橙皮书的思路，考察四个厂家在pH1.2、pH4.0、pH6.8和水中的溶出情况，绘制溶出曲线，以f2因子法对溶出行为进行评价。结果显示国内不同厂