尿沉渣分析参数的临床意义及影响因素尿沉渣分析仪原理•尿沉渣分析仪是使用流式细胞和电阻抗原理。当一个尿液标本被稀释液稀释并以染色后,靠液压作用通过鞘液流动池。当反应样品从样品喷嘴出口进入鞘液流动室时,它被一种无粒子颗粒的鞘液包围,然后,每个细胞以单个纵列的形式通过池的中心轴线,在这里每个尿液细胞被氩激光束来照射。每个细胞有不同程度荧光强度,从染色尿液细胞发出的荧光主要反映细胞的是定量特性(如细胞膜、核膜、线粒体和核酸)、散射光强度(如前向角散射光)完成比例反映细胞大小,电阻的大小主要与细胞体积成比例。仪器正是将这种荧光、散射光和电阻抗的信号一起综合分析,得出细胞的形态、细胞横切面积、染色片段的长度、细胞容积等信息。使每个尿液标本产生出直方图和散射图,然后仪器通过分析每个细胞信号波形的特性来进行分类。UF对临床有哪些有用价值•目标样本筛选,就是按照一定筛选条件,将需要的目标样本快速选出,对有问题的样本再仔细镜检。筛选的目的是为了提高效率,减少无效操作。根据NCCLS的规定尿样品必须在2小时内检测完毕。如果不进行筛选,检验科承担不了巨大样本量的规范的镜检工作,这样不仅尿样放置时间过长而变质导致结果不准确,而且报告不及时也将影响病人和临床;如果强行承担大样本量的镜检,将出现人为原因的检验质量下降,人为误差加大,结果的可信性下降。所以我们讲质量优先,兼顾效率。给临床提供定量数值。UF是否可以代替尿液干化学检测•不可以。建议进行两者交叉检验,观察结果。同时也应该结合显微镜及临床诊断。尿干化学法是通过化学方法提供尿液检查的信息。但干扰因素很多。如红细胞检查中采取隐血的检查其原理是利用RBC中Hgb具有过氧化物酶的活性,使色原氧化而产生颜色变化。但尿中出现的氧化污染物、易热酶、微生物产生的过氧化物会引起它的假阳性。对白细胞的检查采取酯酶反应的原理,但淋巴细胞内不含酯酶所以无法被检出。利用亚硝酸反应的原理来检测细菌,但部分细菌不含有亚硝酸盐还原酶如假单孢类细菌就无法被检出等。当红细胞全溶解时、尿液蛋白、酮体、尿胆红素等只能靠干化学检出。所以沉渣的检测不能完全代替化学检测,尿液的一体化检测应该受到重视。临床意义尿液检验质量控制•1.取尿时间住院患者尿常规最好留取清晨第一次尿,顾可梁教授提出也可在上午7:00~8:00留取尿液作为第二次晨尿。门诊或急诊患者可随时留取,但在标本容器上必须注明留取时间。•2.容器装备使用一次性有盖尿标本容器,改变目前敞开无盖尿杯。•3.取尿指导(见表)标本类型应用范围随机尿常规筛查晨尿常规筛查、妊娠试验、直立性蛋白尿餐后2小时尿糖尿病监测、葡萄糖试验葡萄糖耐量试验与血液标本一起做尿糖耐量24h尿化学成份定量导尿细菌培养中段清洁尿常规筛查、细菌培养穿刺尿细菌培养、细胞学检查三杯试验标本尿道炎、前列腺炎、膀胱炎尿液标本保存•(1)尿液标本留取后应及时送检,以免细菌繁殖及有形成分破坏。凡留取超过2h、示注明留尿时间及尿量不够的标本应拒收。检验科收到合格的尿标本后应签收,在送检单位上注明收到时间,并应及时检查。尿液标本保存•(2)由于尿液中化学成分和细胞成分的不稳定性,为保证分析结果的可靠性,尿液分析建议在收集标本2h内进行,一般不推荐使用化学防腐剂。如延误检验,应将标本置冰箱保存,适宜于一些化学成分的检测(胆红素和尿胆原除外),但会沉淀无晶形尿酸盐和磷酸盐,使显微镜视野模糊,如果同时做培养,在运送及处理过程中应保存于冷藏条件下,如作多项分析应将充分混匀的尿分作几份,按用途作不同处理。作为防腐措施冰箱保存的时间长短要根据各个尿检测项目,作为防腐措施的冷藏时间没有统一的规定,但多数参考书推荐以6h为宜。尿液标本保存•(3)部分需留取24h尿标本进行检测的项目,需在尿标本中加适量防腐剂,但应根据不同检查目的而选用不同类型的防腐剂(大多使用400g/L的甲醛溶液,每升尿液加入5ml,应注意甲醛过量时可与尿素产生沉淀物,干扰显微镜检查),在使用防腐剂时必须慎重选择,因某些防腐剂会干扰酶的测试。尿液标本保存不当或放置过久对试带法和镜检结果均有影响。尿液标本保存标本检测•尿液标本收集后必须在2h内(冷藏标本必须在6h内)完成检测。对于尿液检测时间的问题,有人研究将1000份尿样,置25℃下1h仅1份浑浊,2h有2份浑浊,3h时有997份变浑浊,故提出尿样应以2h内检测完毕为宜。尿液能否在2h内检查完毕,是尿常规检查质量的关键,尤其住院患者要做到尿液收集、运送并在2h内测定完毕,存在很多客观困难,但一切事在人为,要做好住院患者及护士的宣传工作,使他们了解遵照医嘱留取尿标本、及在留尿容器上记下实际留尿时间的重要性,同时必须在2h内送到检验科,凡无特殊注明而超过2h的尿标本及尿量不够者应拒收。尿干化学分析的影响因素•1.尿液放置时间如酮体,新鲜尿液内以乙酰乙酸为主,随放置时间越长,乙酰乙酸越少,而丙酮和β-羟丁酸越多;又如,红细胞、白细胞的破坏,葡萄糖、蛋白成分的分解等,均可能造成同一份标本在不同时间出现不同结果的现象。(如图)尿样保存不当或放置过久对结果影响尿干化学分析的影响因素•2.维生素C的干扰在应用维生素C后,可造成干化学法测定尿液红细胞、葡萄糖、胆红素、亚硝酸盐等的假阴性,班氏尿糖定性试验假阳性。所以有专家认为:在大剂量口服或静脉滳注维生素C后,原则上在5h内不要留取尿液标本进行检验。必须检验时,要静脉滴注剂量、开始滴注时间和留取尿样时间,以便检验人员及时采用适当措施以避免影响实验结果。尿干化学分析的影响因素•3.青霉素的影响大剂量应用青霉素后,可造成尿蛋白检测干化学法假阴性;磺柳酸法假阳性,其机制未明,但此现象应引起相关人员重视。•4.尿液PH的影响干化学法进行尿比重和尿蛋白的测定都基于模块上PH的变化(如下图)尿液PH对比重的干化学法测定产生影响,这可能是尿PH增高时,尿液中的氢氧离子中和掉一部分由Na+离子解离产生的酸性基团,而使比重结果偏低,因此,当尿PH7,尿比重应增加0.005作为补偿;而当尿液PH3.0时,可引起干化学法尿蛋白测定假阳性,尿PH9.0时,可引起干化学法尿蛋白测定假阴性。不论是生理、病理,还是药物引起的尿液的PH过高或过低均会引起尿蛋白和比重的检验误差。实际上,试带法尿PH检测有两个含义,一是临床资料,提示体内酸碱平衡变化,二是质控资料,提示尿比重和尿蛋白的测定结果是否受PH的干拢。尿沉渣的影响因素•一、红细胞检测的影响因素从机外因素和机内因素来分析:②机外因素。尿样本放置时间过长,结晶增加,细菌繁殖,导致RBC假性升高;酵母样细胞,如白色念珠球菌等增多,导致RBC假性升高。溶血,样本污染,灰尘,酒精等进入。药物,尤其是尿中有含有荧光染料类的药物的影响,而检验人员和医生都不知道。②机内因素。试剂长时间过期变质,管道污染等。红细胞检测的筛选设置问题,NegativeLmits,ReviewLimit设定值过低。尿沉渣的影响因素二、管型、白细胞的影响因素随着时间的延长,尿中细菌增多,粘液丝增多,白细胞碎片增加凝集并被作为管型计数。所以使用UF要强调新鲜原尿(有时当细菌和粘液丝在同一时间通过时被作为假管型Path.CAST计数在内。),白细胞放置时间过长容易破碎尿沉渣的影响因素•三、对细菌检测的影响因素UF对一个尿液标本的检查需要23秒。在开始的2秒内进行高敏感度(FSC)的细菌计数检测。也就是在这个时间段中得到的颗粒计数作为细菌的结果报告。必须指出的是由于UF是从颗粒大小,染色性上进行判断,所以尿中类似细菌的细小颗粒(如红细胞碎片等小颗粒)UF都会把它们计入细菌数中;再是①尿液污染②标本放置时间过长,细菌繁殖③异常颗粒(如灰尘)④仪器故障。因此UF的细菌结果对临床能起到一定的提示作用,但也要综合其他因素考虑,但可以明确的是它的结果增高提示尿培养细菌的阳性率高,结果低提示尿培养细菌的阴性率高。仪器对细菌结果的提示基于三个参数:细菌数、细菌大小、白细胞数。尿沉渣报告中英文对照