恩度科室演讲幻灯

抗血管生成治疗及恩度先声药业抗肿瘤药事业部市场部2006年Folkman,J.Tumorangiogenesis:therapeuticimplication.N.Engl.J.Med.1971.285：1182-1186.肿瘤血管生成理论JudahFolkman教授肿瘤血管生成理论之父波士顿儿童医院医疗中心外科研究室主任美国国家艺术和科学院以及国家科学院(NAS)院士“抗血管生成疗法”示意图细胞癌变小肿瘤肿瘤生长分泌生长因子诱发新生血管新生血管向肿瘤供养癌细胞通过血管扩散肿瘤休眠血管阻断新生血管血管血管2003年度世界十大科技突破——引自美国《科学》杂志血管生成的双向调节机制ActivatorInhibitor目前的研究表明，机体对血管生成调控遵循双向调节的普遍规律。血管生成是受血管生成促进因子和血管生成抑制因子共同调节的。AngiostatinEndostatinThrombospondin-1VEGFbFGFPDGF内源性促／抗血管生成因子StimulatorsInhibitorsVEGFbFGFPIGFPDGFTGF-a/bTNF-aIL-8HGFAngiogeninIL-3ProliferinLeptinG-CSFInterferonsa/bAngiostatinEndostatinVasostatinCanstatinTumstatinPlateletfactor-4Thrombospodin-1IL-1216kDprolactinfragmentIL-18IP-1053kDantithrombinIII抗血管生成治疗的策略通过抑制促进因子的表达或者外援性补充抑制因子等方法改变血管生成促进因子和抑制因子之间的相对平衡，来阻断血管生成。–直接针对各种血管生长因子抗体或药物。–针对生长因子受体的药物，阻断细胞内的信号传导通路。–针对血管内皮细胞的药物，抑制内皮细胞的增值和迁移。–基质金属蛋白酶抑制剂，阻止基底膜以及细胞外基质的降解。–其他，比如抗粘附分子抗体抗整合素avb3等抗血管生成治疗目前已经成为肿瘤治疗中最引人瞩目的热点领域之一。经过近30年的探索，近年来已经有几十种新生血管抑制剂药物进入I、II、III期临床研究，其中最引人注目的便是目前发现的最广谱的血管生成抑制剂Endostatin(ES)。肿瘤血管生成理论内皮抑素Endostatin的发现O’reillyMS,etal.Cell1997;88:277-285.内皮抑素Endostatin的发现内皮抑素ES最初是从鼠的成血管细胞瘤株培养液中分离提纯得到的一种在动物体内天然存在的蛋白。内皮抑素ES是由细胞外基质成分胶原ⅩⅧ的羧基末端水解而来，含有184个氨基酸，分子量为20KD。试验研究发现内皮抑素ES具有强烈抑制血管生成的作用。O’reillyMS,etal.Cell1997;88:277-285.内皮抑素Endostatin的抑瘤试验内皮抑素Endostatin的抑瘤试验O’reillyMS,etal.Cell1997;88:277-285.BoehmT,etal.Nature1997;390:404-407.内皮抑素的作用机理(一)Endostatin能作用于VEGF的受体KDR/Flk-1，阻止VEGF与内皮细胞结合，直接阻断VEGF的作用。KimYM,etal.JBC,2002,277(31):27872-27879.干扰血管生成因子的作用：与bFGF竞争结合，干扰其信号传导通路。下调VEGFmRNA和蛋白表达，直接阻断VEGF受体的信号转导，从而抑制VEGF介导的内皮细胞迁移和血管生成。内皮抑素的作用机理(一)HajitouA,etal.FASEBJ.2002,16(13):1802-1804.UrbichC,etal.FASEBJ.2002,16(7):706-708.基质金属蛋白酶MMP-2在血管生成中发挥重要作用，Endostatin能结合MMP-2的催化活性区，阻断其作用。LeeSJ,etal.FEBSletters,2002:147-152.内皮抑素的作用机理(二)Endostatin能结合于Tropomyosin,破坏微丝的完整性，抑制内皮细胞的迁移，诱导其凋亡，发挥抗肿瘤作用。MacDonaldNJ,etal.JBC,2001,276(27):25190-25196内皮抑素的作用机理(三)Endostatin能抑制Wnt信号通路，促进b-catenin的降解，抑制内皮细胞移动，导致内皮细胞停滞在G1期，减少内皮细胞在S期的比例引起细胞周期停滞。HanaiJI,etal.JCB,2002,158(3):529-539.内皮抑素的作用机理(四)对内皮细胞凋亡的影响：ES的促内皮细胞凋亡作用可能与诱导酪氨酸激酶活性,抑制bcl-2、bcl-xl和bad表达有关,而没有改变bax、p53、cdc-5A、p38MAPK的基因表达。ES还能破坏微丝的完整性抑制内皮细胞的运动,诱导内皮细胞凋亡,最终抑制肿瘤的生长内皮抑素的作用机理(五)ShichiriM,etal.FASEBJ,2001,15(6):1044-1053.DixeliusJ,etal.Blood,2000,95(11):3403-3411.FolkmanJ.ExperimentalCellResearch,2005.内皮抑素的作用机理(六)Endostatin能下调体内的促血管生成因子，上调体内的血管生成抑制因子，通过改变血管生成调节因子的平衡关系，发挥抗血管生成作用。内皮抑素的作用机理(六)FolkmanJ.ExperimentalCellResearch,2005.Endostatininhibits65differenttumortypesandmodifies12%ofthehumangenometodownregulatepathologicalangiogenesiswithoutside-effects.(抑制65种肿瘤生长，影响占人类基因组12％的与血管生成相关的基因发挥抗血管生成作用)Inhumans,endostatinhasvirtuallynotoxicityandhasrevealednoresistanceevenwhenithasbeenadministeredtopatientseverydayforupto3.5yearswithoutinterruption.(国外有患者连续应用endostatin超过3.5年)Endostatin,therefore,representsamodelofabroadspectrumangiogenesisinhibitorthatinthefuturecouldbeaplatformanti-canceragentforcoadministrationwithothertherapies.内皮抑素的作用机理(六)FolkmanJ.ExperimentalCellResearch,2005.Endostatin缺失的小鼠体内肿瘤生长速度加快2-3倍；而Endostatin表达水平高1.6倍的小鼠体内肿瘤生长速度相对于正常小鼠减慢3倍。SundM,etal.PNAS,2005,102(8):2934-2939.内皮抑素的基因敲除试验内皮抑素与DownsyndromeDownSyndrome(DS)又叫21三体综合症，患者具有3条21号染色体，最主要的特点是智力障碍。Endostatin的基因位于21号染色体上，因此，DS患者血中Endostatin水平较正常升高1/3。一个有趣的现象是这类患者中的实体瘤发病率明显较正常人低。ZorickT,etal.EuropeanJournalofHumanGenetics,2001,9:811-814.国家一类生物新药恩度TM(ENDOSTAR)产品一般信息通用名：重组人血管内皮抑制素注射液注册商标：恩度TMEndostarTM英文名：RecombinantHumanEndostatinInjection类别：生物制品一类新药规格：15mg/3ml/支(2.4×105u/支)代号：YH-16恩度TM样品恩度TM(Endostar)恩度TM不是单纯的Endostatin，是在ES母体上创造性的添加了9个氨基酸的新型Endostatin，不仅使ES稳定性提高，半衰期延长，而且生物活性增加。恩度TM是纯度大于99.9%高纯生物制剂。恩度TM是人源化蛋白，不会诱导自身抗体产生。恩度TM的蛋白非常稳定，可以室温放置一年仍然保持活性，而国外的同类产品需要-80℃冷冻保存。包含体电镜照片高效表达的蛋白在大肠杆菌内形成大量无活性包含体。超过99%的Endostatin不能复性Endostatin复性是一个世界性难题复性结构不规则、无生物活性特定三维结构、有生物活性什么是蛋白质复性？恩度与Endostatin的比较项目Endostatin恩度生产厂家美国EntreMed公司先声麦得津公司氨基酸数目184个193个表达体系酵母大肠杆菌抑瘤活性较强作用Endostatin的两倍以上纯度低高（99%）产量低高生产成本高昂较低生产周期长短临床研究终止于II期临床研究批准上市恩度TM与国外同类产品的质量比较YH-16样品（中国）高压液相色谱法：纯度比较恩度TM的纯度远高于国外Endostatin样品，这也是恩度的剂量只有国外十分之一左右的原因。EntreMed公司样品(美国)恩度的活性分析—鸡胚血管生成抑制试验对照组恩度组恩度的活性分析—体外迁移试验对照组恩度组863计划重大科技专项资助恩度TM临床试验研究中国医学科学院肿瘤医院内科孙燕院士恩度TM国内临床试验2001年7月－2002年3月恩度TMI期临床试验2002年3月－2003年3月恩度TMII期临床试验2003年4月－2004年7月恩度TMIII期临床试验药代动力学正常人t1/2为10±小时，全身清除率为2.8L/h/m2。正常小鼠静脉给药后肾、肺和肝中的浓度高于血浆，肌肉、脂肪和脑浓度最低。主要经肾排泄。荷瘤小鼠静脉注射本品后全身分布与正常小鼠相近，肿瘤组织中分布不高。中国医学科学院肿瘤医院辽宁省肿瘤医院广西医科大学肿瘤医院浙江省肿瘤医院天津医科大学肿瘤医院北京胸部肿瘤医院四川大学华西医院中山大学肿瘤医院天津第二中心医院福建省肿瘤医院第三军医大学新桥医院第三军医大学西南医院安徽省肿瘤医院福建医学大学协和医院军事医学科学院附属医院西安交通大学第一医院第四军医大学西京医院上海长征医院河南省肿瘤医院河北省肿瘤医院福建医科大学第一附属医院山东大学齐鲁医院山东省肿瘤医院天津市胸科医院Ⅲ期临床试验参加医院（24家）SunY,WangJW,LiuYetal,ResultsofphaseIIItrialofrh-endostatin(YH-16)inadvancednon-smalllungcancer(NSCLC)patients.ProcASCO2005;23:7138a王金万、孙燕、刘永煜,等.重组人血管内皮抑素联合NP方案治疗晚期NSCLC随机、双盲、对照、多中心III期临床研究。中国肺癌杂志,2005，8：283－290Ⅲ期临床试验发表论文研究目的：主要目的：RR、CBR、TTP、生存期次要目的：QOL、临床症状缓解率、药物的安全性研究设计：随机、双盲、安慰剂平行对照、多中心临床试验质控措施：设立独立疗效评价委员会高频度、高质量的临床监查III期临床试验Ⅲ期临床试验设计NSCLC初治或复治493例PS0-2Ⅲ／Ⅳ期NVB25mg/m2NVB25mg/m2YH-167.5mg/m2+NS250mlIVgttd1d2,3,4d5d1-14d21随机分组NVB25mg/m2CDDP30mg/m2NVB25mg/m2d21d1d2,3,4d5安慰剂(NS3.5ml)+NS250mlIVgtt全国24个中心。随机、双盲、安慰剂平行对照