2020/6/29医学微生物学第五章细菌感染的检查方法与防治原则第一节细菌感染的诊断包括;细菌学诊断——检测病原菌及其抗原,产物或核酸血清学诊断——检测患者血清中特异性抗体2020/6/29医学微生物学一、病原菌检测早期采集应在使用抗菌药物前采集标本,否则注明药物种类。无菌采集尽量避免杂菌污染。根据不同疾病以及疾病不同时期采取不同标本。标本必须尽快送检,或冷藏送检。标本做好标记,详细填写化验单,保证各环节的准确无误。标本采集与送检原则2020/6/29医学微生物学致病菌的检验程序标本直接涂片染色镜检分离培养与鉴定病原菌抗原检测其它检测涂片镜检菌落特征生化反应药敏试验血清学反应免疫荧光酶联免疫测定免疫印迹细菌核酸(PCR)基因芯片动物试验2020/6/29医学微生物学HoodandchamberforanaerobiccultureBlueindicateoxygen2020/6/29医学微生物学Microscopyandstains•Simpleandlesssensitive(bacteriaNo.105/ml)Grampositive(Staphylococcus)Gramnegative(E.coli)AcidfaststainMycobacteriumtuberculosis,From:CDC2020/6/29医学微生物学血平板上的金黄色葡萄球菌菌落(黄色)及表皮葡萄球菌菌落(白色)2020/6/29医学微生物学•梅毒螺旋体Treponemapallidum(pathogenofsyphilis)•直接荧光抗体检测Directfluorescentantibodytest(FromMorseSetal:AtlasofsexuallytransmitteddiseasesandAIDS,StLouis,2003,Mosby.)2020/6/29医学微生物学二血清学诊断用已知的细菌或其特异性抗原检测患者血清或其它体液中特异抗体和其效价的动态变化,可作为某些感染性疾病的辅助诊断。一般采取病人的血清进行试验,故称为血清学诊断(serologicaldiagnosis)。血清学诊断最好取患者急性期和恢复期双份血清标本,当后者的抗体效价比前者升高大于等于4倍时方有意义。恢复期Convalescentphase急性期Acutephase2020/6/29医学微生物学直接凝集试验TheFabportionsoftheantibodieslinkmicroorganismtogethercausingagglutinationontheslideFrom:Dr.GaryE.Kaiser常用方法:直接凝集试验、乳胶凝集试验、ELISA。2020/6/29医学微生物学biosystemdevelopment.com2020/6/29医学微生物学AmicroarrayisasetofshortExpressedSequenceTags(ESTs)madefromacDNAlibraryofasetofknowngeneloci.TheESTsarespottedontoacover-slip-sizedglassplate.mRNAarepreparedfromthetissueofacontrolorganismandanexperimentaltreatment.ComplementaryDNA(cDNA)arepreparedandlabelledwithtwodifferentfluorescentdyes.Theexperimentalandcontrollibrariesarehybridizedtothemicroarray.Dual-channellaserexcitationexcitesthecorrespondingdye,whichfluorescesproportionaltothedegreeofhybridizationthathasoccurred.Relativegeneexpressionismeasuredastheratioofthetwofluorescences:“up-regulation”relativetothecontrolwillbevisualizedasared“pseudo-colour,”“down-regulation”showsasgreen,andconstitutiveexpressionasaneutralblack.Intensityofcolorisproportionaltotheexpressiondifferential.DNAchip基因芯片2020/6/29医学微生物学死疫苗活疫苗第二节细菌感染的特异性预防一、人工主动免疫(artificialactiveimmunization):将疫苗(vaccine)或类毒素接种于人体,刺激机体免疫系统,使机体主动产生获得性免疫力的一种防治微生物感染的措施,主要用于特异性预防。2020/6/29医学微生物学活疫苗死疫苗制品特点减毒或无毒的疫苗死菌,有免疫原性接种次数1次2-3次免疫类型细胞和体液免疫体液免疫免疫效果好,长(1-5年)差,短(1年)毒力回升可能不可能安全性对免疫缺陷者有危险安全性高保存不易易2020/6/29医学微生物学抗毒素丙种球蛋白抗菌血清二、人工被动免疫人工被动免疫(artificialpasstiveimmunization):注射含有特异性抗体的免疫血清、纯化免疫球蛋白抗体,或细胞因子等免疫制剂,使机体立即获得特异性免疫的过程。但这些免疫物质不是病人自己产生的,故维持时间短。主要用于紧急预防或治疗。2020/6/29医学微生物学两种人工免疫的比较区别要点人工主动免疫人工被动免疫免疫物质抗原抗体或细胞因子等接种次数1-3次1次免疫出现时间慢(注射后2-4W)快(注射后立刻出现)免疫维持时间长(数月~数年)短(2-3W)用途多用于预防多用于治疗或应急预防2020/6/29医学微生物学Futurevaccines•Syntheticpeptidesthatcorrespondtoantigenicdeterminantsonaviralprotein.•Ediblevaccines.transgenicplantssynthesizingantigensfrompathogenicviruses.From: