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实验观察根尖分生组织细胞的有丝分裂1.植物分生组织细胞的特点：有丝分裂较为旺盛。在高等植物体内，有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。2.细胞分裂具有独立性：某一时刻，同一组织的不同细胞，可处于细胞周期的不同分裂时期；在高倍镜下，根据染色体的形态和数量，识别有丝分裂的不同时期。3.染色体的特性：染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液)着色。1.实验材料：(1)选材部位具有持续分裂能力，如根尖、芽尖。(2)选择染色体数目较少的生物，便于染色体的计数。(3)选择分裂期占细胞周期时间比例大的细胞，易观察到分裂期细胞。2.试剂的成分及作用：试剂成分作用解离液质量分数为15%的盐酸+体积分数为95%的酒精，以1∶1的比例混合使组织中的细胞相互分离漂洗液清水洗去组织中的解离液，防止解离过度，影响染色染色液质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)使染色体着色3.显微镜的使用：(1)先用低倍显微镜找到分生区的细胞，分生区细胞呈正方形，排列紧密。(2)再用高倍显微镜找到中期的细胞，因为中期细胞中染色体的形态更为清晰和固定，然后再找前期、后期、末期的细胞。1.洋葱根尖培养：实验前3～4d，待根长到5cm2.装片制作：(1)取材：取根尖2～3mm。(2)解离。①解离液：质量分数为15%的_____和体积分数为95%的_____混合(1∶1)。②目的：使组织中的细胞相互_______。③时间：_________。④程度：根尖酥软。盐酸酒精分离开3～5min(3)漂洗。①漂洗液：_____。②目的：洗去_______，便于染色。③时间：约10min。(4)染色。①染液：质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的___________或___________。②目的：使_______着色。③时间：3～5min。清水解离液龙胆紫溶液醋酸洋红液染色体(5)制片。用镊子将根尖取出放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖把根尖弄碎，盖上_______，再加一块_______，用拇指轻轻按压载玻片。盖玻片载玻片3.观察4.绘图：绘制有丝分裂中期图。先低倍镜观察：找到___________，其特点是细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。后高倍镜观察：先找_____，后找_____________细胞。分生区细胞中期前、后、末期1.使根尖细胞相互分散的方法：(1)解离时盐酸可破坏细胞壁的果胶层，使组织细胞分离。(2)制片时用镊子把根尖弄碎。(3)压片可使细胞尽可能呈单层铺展。2.实验过程中的注意事项：(1)取材的两点提醒。①剪取生长旺盛、带有分生区的根尖或芽尖。②选材时不能单纯以分裂期所占时间的长短作为选材标准，而是应该选择分裂期占细胞周期时间比例大的材料，因为此种材料分裂期的细胞数目较多，易观察。(2)解离。①剪取根尖时间：一般在上午10时至下午2时左右，此时分生区细胞分裂旺盛。②严格控制解离时间：一般解离时间控制在3～5min。若时间过短，细胞在压片时，不易分离开；若时间过长，导致解离过度，无法取出根尖进行染色制片。(3)漂洗。①漂洗顺序：先漂洗后染色，顺序不能颠倒，否则解离液中的盐酸会干扰染色效果。②漂洗目的：a.防止解离过度，根尖过度酥软。b.洗去盐酸，防止与碱性染液发生作用，影响染色效果。(4)染色：染色时要掌握好染色液的浓度和染色时间，若染色时间过长，染色过深，显微镜下会出现一片紫色，无法正常观察染色体。(5)压片：压片时用力要恰当，过重会将组织压烂，过轻则细胞未分散开来，用力过重或过轻都会影响观察。3.实验结果及分析：(1)视野中最多的细胞：分裂间期的细胞。因为在一个细胞周期中，间期所占的时间占整个细胞周期的90%～95%，时间与细胞数目成正比。(2)视野中往往不容易找全有丝分裂各个时期的细胞，可以移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。(3)观察到的不同时期细胞数目的多少反映出各时期经历时间的长短，间期细胞数目最多。4.四种常见异常情况分析：(1)细胞重叠看不清：根尖解离和制片把握不好，使细胞重叠，难以观察到正常分裂各时期图像。(2)大多数为长方形细胞：取材不当，不是分生区细胞，细胞已分化。(3)找不到图像：未对好光或光线亮度不够好，也有的是未调好焦距。(4)装片中出现气泡：载玻片上滴的清水少或盖玻片的盖法不对。