Agilent 农残分析培训教材完全版

新鲜蔬菜、水果中农药多残留快速检测技术培训教材安捷伦科技2003年5月PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion目录第一部分农残检测基础知识（一）专业术语一农药残留二农药残留分析（目的、特点、分类）三农残分析基本概念（二）基本程序（三）分析结果计算和表述第二部分农残检测技术综述（一）农残检测前处理技术简介（二）国外农残检测技术发展趋势（三）国内农残检测面临任务（四）CDFA-MRSM特点（五）CDFA-MRSM仪器配置（六）保留时间锁定功能PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion标准操作程序（一）流程示意（二）操作程序一目的二内容提纲三正文第四部分Agilent实验室重现CDFA-MRSM部分实验数据（一）有机磷类农药GC-FPD标准工作曲线相关系数（二）有机磷类农药GC-FPD仪器和方法检出限（三）用CDFA-MRSM,GC-FPD分析韭菜中有机磷类农药残留的平均回收率和变异系数PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion（一）专业术语一农药残留（pesticideresidue）n农药使用后残存在生物体、农副产品和环境中的微量农药母体、有毒代谢物、降解物和杂质的总称。以mg/kg,ug/kg,ng/kg表示。n中国一般只检测农药母体。n发达国家检测母体、代谢物、环境降解产物、工业品杂质。PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion（一）专业术语二农药残留分析（pesticideresidueanalysis）对待测样品中微量农药残留进行定性、定量分析。目的:n为新农药提供其在农作物上的残留动态和最终残留量。n制定农药最大残留限量和合理使用准则。n评价农药残留对农畜产品和环境的危险性。n为制定防治农药污染措施提供依据。PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion（一）专业术语二农药残留分析（pesticideresidueanalysis）特点:n分析目的物含量低，在样品中仅以ug,ng甚至pg、fg量存在n目的物种类多，化学结构差异大。n样品种类多，干扰物成分各异。n方法要求快速、简便、成本低、灵敏、准确、安全（QuEChERS)。n对样品的前处理和仪器测试要求越来越高。PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion（一）专业术语二农药残留分析（pesticideresidueanalysis）分类:1单残留分析（singalresidueanalysis)n对待测样品中某类某一种农残定性定量（已知、未知）n农药注册（中国、外国）n中国国标方法2多残留分析（multiresidueanalysis）n对待测样品中多类多种农药残留同时定性和定量（已知、未知）n单种类农药多残留分析（有机磷、有机氯等）中国国标方法n多种类农药多残留分析n未知多类多种残留分析（快速扫描-MRSM）（CDFA、FDA、Canada）PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion（一）专业术语三农残分析基本概念1添加回收率（fortifiedrecovery）空白样品中加入一定浓度某一种或几种农药（C1）后，其样品中此农药浓度测定值（C2）对加入值的百分率（F）。F=C2/C1*100%n添加回收率旨在衡量测定值与真值之间的误差，是制定农残分析方法准确度和可行性的指标。n一般以MRL值水平高一个数量级、低一个数量级和同一个数量级三个浓度水平进行添加，或者在1、5和10LOQ水平添加，测定添加回收率；n可以单个农药添加测定单残留添加回收率，也可多种农药同时添加，测定多残留添加回收率。n至少重复三次。n测试样品具代表性（3-4种）。n测试农药具代表性（4类-5类）。n单残留回收率：80—100%，多残留回收率：70—120%。PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion（一）专业术语三农残分析基本概念2变异系数（Coefficientofvariation,CV）衡量回收率偏异程度，判定农残分析方法的精确度（重现性）指标。CV=标准偏差/平均回收率*100%n一般≤20%PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion（一）专业术语三农残分析基本概念3检出限，定量限（1）检出限（limitofdetection）衡量仪器或方法灵敏度（检出目的物）的指标。要求低于测定目的物的MRL值（最好低一个数量级）。n在色谱图上可清楚确认的分析目的物色谱峰的下限。通常为噪音3倍（S/N=3）。n分为仪器检出限和方法检出限n仪器检出限无样品基质存在，在与样品测定完全相同的条件下，某种分析仪器能够检出分析目的物的最小量或最低浓度。n方法检出限有样品基质存在，在与样品测定完全相同的条件下，某种方法能够检出分析目的物的最小量或最低浓度。PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion（一）专业术语三农残分析基本概念3检出限，定量限（2)定量限（limitofquantitation）衡量仪器或方法灵敏度（定量目的物）的指标。n在色谱图上可准确定量分析目的物色谱峰值的下限。通常为噪音10倍（S/N=10）。n分为仪器定量限和方法定量限n仪器定量限无样品基质存在，在与样品测定完全相同的条件下，某种分析仪器能够准确定量分析目的物的最小量或最低浓度。n方法定量限有样品基质存在，在与样品测定完全相同的条件下，某种方法能够准确定量分析目的物的最小量或最低浓度。PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion（一）专业术语三农残分析基本概念3检出限，定量限（3）测定方法n仪器检出限或定量限,用某分析目的物的最低浓度标样测定。nAgilent仪器化学工作站可以直接测定S/N。如:α-BHC标样浓度为0.01ppm，S/N=30，则仪器LOD=0.001ppm,仪器LOQ=0.003ppmn方法检出限或定量限,用添加某分析目的物最低浓度水平或预测水平的样品，经过该方法的全部操作程序测定。重复实验两次。如:α-BHC添加在韭菜中，CDFA方法添加水平为0.01ppm，样品最终浓度为0.01ppm，S/N=12，方法LOD=0.0025ppm，方法LOQ=0.008ppm。PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion（一）专业术语三农残分析基本概念4农残分析方法认证指标n准确度（Accuracy）真值（truevalue）回收率n精密度（Precision）重现性（reproducibility），变异系数n灵敏度（sensitivity），检出限，定量限n仪器线性范围（Linearity），标准曲线（standardcurves）n（五个不同浓度，覆盖三个数量级或1X,5X,10XLOQ水平）n相关系数（R≥0.9900),测定天数（≥3days）PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion（一）专业术语三农残分析基本概念5农残分析质量保证和质量控制（QA/QC）n试剂空白实验（reagentblank）（每日）n基质空白实验（matrixblank）（每日）n农药标样（基质中添加农药混合标样；至少两种基质；2XLOQ水平）（每日）n添加回收率（添加混标，轮换添加）（每日）nLOD、LOQ、仪器、方法（仪器、方法条件改变时）n仪器线性关系、标准曲线、相关系数（至少三天）PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion最大残留限量（MaximumResidueLimit，MRLs）n在农畜产品中农药残留的法定最高允许浓度，又称最高残留限量，以每千克农畜产品中农药残留的毫克数（毫克/千克）表示。n制订目的：控制食品中过量农药残留以保障食用者安全，对超标的产品采取措施，即禁止食用。推行和指导合理用药，农产品监测超标时，表明未按规定用药。减少国际贸易纠纷，各国均制订本国的MRLs，国际组织FAO/WHO也制定其相应的MRLs标准。n制订方法：按照农药标签上规定的施药剂量和方法使用农药后，在农产品中的最大残留浓度，其数值必须是毒理学上可以接受的，由各国政府部门按法规公布。n在农残检测中，以MRL值判断是否超标。（一）专业术语PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion食品中农药的最大允许残留限量（mg/kg）（强制性国家标准）0.5不得检出不得检出0.01不得检出0.05（棉籽油）0.1（棉籽油）0.05（棉籽油）不得检出不得检出0.05（全果）0.10.50.50.50.5不得检出0.050.21（梨果）0.3（柑桔）1不得检出不得检出0.050.10.50.20.50.5不得检出0.050.21（叶菜）1不得检出不得检出0.10.50.020.10.050.10.50.20.15.00.020.050.10.1（成品粮）0.053（成品粮),80.1辛硫磷敌百虫亚胺硫磷甲胺磷乙酰甲胺磷二嗪磷杀螟硫磷甲拌磷倍硫磷敌敌畏呋喃丹久效磷甲基对硫磷毒死蜱乐果马拉硫磷对硫磷茶叶食用油水果蔬菜稻谷谷类摘自“农产品农药残留限量标准汇编”农业部农药检定所2001.9PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion（二）基本程序前处理仪器分析预处理农残分析提取净化浓缩ECD、ELCDFPD、NPDAED、XSDGCHPLCGC/MSLC/MSEI、CI其它UV、FLD、DAD样品采集贮藏ESI、APCITLC、CEELISAPDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion（三）农残分析结果计算与表述ululmlmlmlgmgmlgmg进样体积定容体积移取样液量溶剂量样品重分析样品量××××=1000111000)()()(ngng标样含量或峰高计算）标样响应值（以峰面积或峰高计算）样品响应值（以峰面积测定目的物量×=（外标法，单点定量）PDFcreatedwithFinePrintpdfFactorytrialversion（一）农残检测前处理