高三生物1高三生物实验总结细胞内物质或结构的检测方法1.淀粉:碘液(越深浓度越大)2.还原糖:斐林试剂。3.CO2:Ca(OH)2溶液、溴麝香草酚蓝水溶液4.脂肪:苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液5.蛋白质:双缩脲试剂6.染色体:龙胆紫、醋酸洋红溶液7.DNA:甲基绿;8.RNA:吡罗红9.线粒体:健那绿实验药品的用途1.NaOH:用于吸收CO2或改变溶液的pH值2.Ca(OH)2:鉴定CO23.HCl:解离或改变溶液的pH值4.NaHCO3:提供CO25.NaCl:配制生理盐水及其他不同浓度的盐溶液,可用于测定动物细胞内液浓度或用于提取DNA6.酒精:用于洗去浮色(50%)、消毒处理(70%)、色素提取(无水乙醇)、叶片脱色及配制解离液(95%)7.蔗糖:配制蔗糖溶液,用于测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原不同浓度的酒精在高中生物实验中的应用(一)体积分数为50%的酒精1、作用:洗去浮色。2、应用:脂肪的检测实验(二)体积分数为95%的酒精1、作用:解离(15%盐酸和95%酒精1∶1混合)2、应用①观察植物细胞的有丝分裂(三)体积分数为70%的酒精1、作用:消毒杀菌2、应用:微生物的培养技术、植物组织培养(四)无水酒精1、作用:提取色素2、应用:叶绿体中色素的提取与分离(五)工业酒精(一般是体积分数为95%的酒精)1、作用:燃烧加热2、应用:包括各类必须加热的实验,(六)盐酸①酶在不同pH下的活性:提供酸性环境②15%的HCl和95%的酒精:解离③观察DNA和RNA在细胞中的分布中,改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色质中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合►探究点一显微观察类实验1.观察类实验总结实验名称细胞状态染色剂生物材料观察DNA、RNA在细胞中死细胞甲基绿、人的口腔高三生物2的分布吡罗红上皮细胞观察线粒体活细胞健那绿观察细胞的减数分裂死细胞无(为固定装片)蝗虫精母细胞低温诱导植物染色体数目的变化死细胞改良苯酚品红染液洋葱根尖细胞观察细胞的有丝分裂死细胞龙胆紫(或醋酸洋红)观察多种多样的细胞活或死细胞无(无需染色)酵母菌细胞、水绵细胞、叶的保卫细胞、鱼的红细胞等观察叶绿体活细胞藓类的叶(或菠菜叶、黑藻叶)观察植物细胞的质壁分离与复原活细胞紫色洋葱鳞片叶表皮细胞1.光学显微镜的使用适用于观察生物的微观结构,如观察细胞质的流动。(1)使用低倍镜应注意正确对光和调焦(粗、细准焦螺旋的调节)。(2)高倍镜的使用方法包括:①低倍镜下找到清晰物像并移至视野中央。②转动转换器,使高倍物镜正对通光孔。③调节细准焦螺旋至物像清晰。2.玻片标本的制作适用于显微观察,凡需在显微镜下观察的生物材料,必须先制成玻片标本。包括:(1)压片法(如洋葱根尖细胞的有丝分裂)。压片的一般过程是:取材→固定→解离(对不易分散的材料用HCl处理)→漂洗→染色→压片→观察。(2)装片法(如高倍镜下观察叶绿体和细胞质的流动)。其过程是:将材料放在载玻片水滴中展平→放盖玻片时应从一侧慢慢盖在水滴上,防止气泡产生→对材料染色或改变溶液浓度→观察。3.观察细胞质的流动处理实验该实验需要增强细胞质的流动性,一般有三种方法可加速细胞质的流动,一是光照15~20min,二是提高盛放黑藻的水温,三是切伤一小部分叶片。4.观察细胞的有丝分裂实验(1)注意取材:观察对象应选择分裂旺盛的部位(根尖、茎尖分生区),取材必须选择在分裂旺盛的时期,这样才能保证制作的装片可观察到较多的细胞分裂图像。(2)本实验所用试剂及作用:①解离液:质量分数为15%的HCl和体积分数为95%的酒精按1∶1混合,目的是使组织中的细胞分散开;②染色剂:0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫(或醋酸洋红)。(3)实验步骤:取材、解离、漂洗、染色、制片、观察。(4)导致实验成败的要素:一是取材,尽量取生长点部位;二是解离时间要适宜,否则细高三生物3胞不容易分散开;三是漂洗必须彻底,否则盐酸会影响染色;四是染色时间要适宜,过深或过浅,染色体的形态和数目不易观察清楚。4.观察植物细胞的质壁分离和复原实验(1)取材:选取成熟的植物细胞(含有大的液泡)。(2)试剂:质量浓度为0.3g/mL的蔗糖溶液;质量浓度为0.05g/mL的氯化钠溶液;质量浓度为0.05g/mL的硝酸钾溶液。►探究点二鉴定类实验1.生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定要特别注意的是斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成,但二者有以下不同:(1)溶液浓度不同;(2)使用原理不同[斐林试剂作用原理:还原糖中的醛基在加热条件下能将Cu(OH)2中的Cu2还原成Cu+,从而生成砖红色的Cu2O沉淀;双缩脲试剂作用原理:双缩脲在碱性溶液中能与Cu2+结合生成紫色络合物,蛋白质分子中含有双缩脲结构相似的肽键];(3)使用方法不同(见下表)。2.叶绿体中色素的提取和分离(1)区分色素提取和分离的原理色素提取的原理——丙酮提取法:绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂丙酮中,所以,可以用丙酮提取绿叶中的色素。色素分离的原理——纸层析法:色素在层析液中的溶解度不同,溶解度高的色素随层析液在滤纸上扩散得快;反之则慢。(2)注意事项①滤液细线要画得细且直,以防止色素带重叠而影响分离效果;待滤液干燥后要再画一两次,目的是积累更多的色素,使分离后的色素带明显;②分离色素时层析液不能没及滤液细线,以防止色素溶解于层析液中而无法分离;覆盖烧杯或试管加棉塞,以防止层析液挥发。3.实验条件的控制方法①增加水中氧气:泵入空气或吹气或放入绿色植物;②减少水中氧气:容器密封或油膜覆盖或用凉开水;③除去容器中CO2:密闭实验装置中放入NaOH溶液或KOH溶液;④除去叶片中原有淀粉:置于黑暗环境一昼夜;⑤除去叶片中叶绿素:酒精加热。⑥避免光合作用对呼吸作用的干扰:给植株遮光;⑦如何得到单色光:棱镜色散或彩色薄膜滤光;⑧防止血液凝固:加入柠檬酸钠;⑨各种细胞器的提取:细胞匀浆离心(差速离心法)4.鉴定类实验归类比较高三生物4►探究点三调查类实验