白细胞计数

白细胞计数--Neubauer(牛鲍)板计数法长治市第二人民医院检验科：薛彬彬1、目的：掌握显微镜法白细胞计数的原理及方法。2、原理：用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液注入血细胞计数板，在显微镜下计数一定体积的白细胞数，经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。3、器材：显微镜、改良牛鲍计数板、试管、吸管、微量吸管、吸头等。4、试剂：白细胞稀释液：2%冰乙酸2ml,10g/L结晶紫（或亚甲蓝）3滴，加蒸馏水到100ml。5、标本：新鲜全血或末梢血。改良的牛鲍计数板。操作步骤1、加稀释液：用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。2、吸取血液：用微量吸管吸取新鲜全血或末梢血20ul，擦去管尖外部余血。将吸管插入试管中白细胞稀释液的底部，轻轻放出血液，并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管2-3次。3、混匀：将试管中血液与稀释液混匀，待细胞悬液完全变为棕褐色。4、充池：再次将小试管中的细胞悬液混匀，用微量吸管吸取7ul左右充入改良牛鲍计数板的计数池中，室温静置2-3分钟，待白细胞完全下沉。5、计数：在低倍镜下计数四角4个大方格的白细胞总数。6、计算:WBC=N/4×10×20×106=N/20×109其中N为4个大方格的白细胞总数。7、细胞计数原则大方格四边压线细胞数左不数右，数上不数下，弓形移动8、考核评价a.常规考核标准（RCS）RCS=×100%评价：白细胞≤4.0×109/L者，RCS＜30%白细胞在（4.1-14.9）×109/L者RCS＜20%白细胞≥15.0×109/L者RCS＜15%超过上述标准者为不合格b.其他方法四大格所见白细胞最大值—最小值四大格所见白细胞数平均值注意事项(1).稀释液密封保存，防止污染，小试管、计数板、盖片均须清洁，以免杂质、微粒等被误认为细胞。(2).采血时针刺深度必须适当，不能过度挤压，防止组织液渗入或采血时间太长引起血液凝固。(3).稀释液和采血量要准确，充分混匀，充液适量，无不足、外溢和气泡，细胞分布均匀。(4).白细胞总数在参考范围内，大方格间的细胞数不得相差10个以上，两次重复计数误差不得超过10％。(5).白细胞数量过高时，可加大稀释倍数，白细胞数量过低时，可计数8个大方格的白细胞数或取双倍血量。(6).一些贫血患者血液中有核红细胞增多，会计数在白细胞总数内，应校正。校正公式：白细胞校正数/L=M×（100/100+N）M为未校正前白细胞数，N为在白细胞分类时，计数100个白细胞的同时计数到的有核红细胞数。谢谢大家！