流行病学调查第五章动物检疫技术临诊检疫技术病理学检查技术检疫材料的采集病原学检查技术免疫学检查技术内容提要第一节流行病学调查一、调查方式和方法(一)现场调查1.询问调查2.现场观察3.查验资料4.动物剖检5.现场采样6.数理统计(二)通信调查电话、传真、E-mail等进行交流调查第一节流行病学调查一、调查方式和方法(现场调查、通信调查)二、调查的种类和内容(一)现况调查1.普查2.抽样调查如每年春季或秋季进行牛结核病和布氏杆菌病的普查;在多雨年份的秋季对全部奶牛进行肝片吸虫病的检查。抽样调查简称抽查是调查有关动物群体中的部分动物,即样本。通过对部分动物的调查了解,估计某病在全群中发生发展趋向,以少窥多。第一节流行病学调查一、调查方式和方法(现场调查、通信调查)二、调查的种类和内容(一)现况调查(二)流行调查(普查,抽样调查)流行调查——是指对某养殖场(户)在短时间内突然集中发生或连续发生大量同一种传染病病畜禽时所进行的调查。目的:是控制或消灭流行,并从中发现防疫工作的薄弱环节,总结经验教训,避免类似事件再次发生。第一节流行病学调查一、调查方式和方法(现场调查、通信调查)二、调查的种类和内容(一)现况调查(二)流行调查(普查、抽样调查)1.最初调查2.深入调查3.追踪调查养殖场(户)基本情况、病史、本次发病情况、环境因素。发病情况调查、传染来源调查、传播途径调查。追踪疫点传染源和传播媒介的扩散趋势。追踪调查的关键是查明接触者。1.发病率:在一定时间内,某动物群体中某病的发病动物数占该群体动物总数的百分率。2.患病率:在一定时间内,某动物群体中某病的患病动物数占该群体动物总数的百分率。三.流行病学调查常用的数和率3.死亡率:在一定时间内,某动物群体中因某病死亡的动物数占该群体动物总数的百分率。4.病死率(致死率):在一定时间内,某动物群体中因某病死亡的动物数占该病患病动物总数的百分率。群体检疫——是指对待检动物群体进行的现场检疫。(一)群体检疫的组织1.群体划分同场、同圈(舍),或同一产地来源的,或同车、同船、同机运输的划为一群。在畜群过大时,要适当分群,以利于检查。第二节临诊检疫技术一、群体检疫2.检疫顺序•大群→小群;幼年→成年;•种用畜群→其它用途的;健康→染病畜群3.检疫时间•放牧的:跟群检疫.•舍饲的:饲喂时检疫。•反刍动物:饲后安静时检疫.•乳牛:挤乳时检疫.•产地和口岸隔离检疫:按规定在规定时间完成必检项目。(二)群体检疫的方法和内容1.静态观察2.动态观察3.饮食观察静态观察是在动物安静休息,完全保持自然状态下,观察其站立、睡卧姿势;精神状态;营养程度和呼吸、反刍等基本生理活动现象。注意有无异常站立、睡卧姿势,有无咳嗽、喘息、呻吟、流涎、嗜睡、孤立一隅等反常现象。经静态观察之后,将被检动物驱赶起来,观察其自然活动和驱赶活动。重点看起立、运动的姿势与步态;精神状态。注意有无不愿起立,不能起立或起立困难以及跛行、步态蹒跚、转圈、共济失调、曲背弓腰、离群掉队及运动后咳嗽、喘气等病态。目的在于检查动物的食欲和口腔疾病。可以观察动物自然采食饮水动作,亦可有意少给食物看其抢食行为。从中发现不食不饮、少食少饮、吞咽困难和退槽、呕吐、流涎等可疑患病动物。通过以上群体检疫,从大群动物中挑拣出有病态的动物,隔离后进一步进行个体检疫。个体检疫——是对群体检疫时检出的可疑病态动物进行详细和系统的临诊检查。若群体检疫没有发现病态动物,亦应抽查5%~20%的动物作个体检疫。若抽查发现检疫对象,再抽检10%,必要时对全群动物逐一进行复查。二、个体检疫(一)视诊1.看精神状态:健康动物静止时安静,行动时灵活,对各种外界刺激敏感。2.看营养程度:★营养状况:肌肉的丰满度、皮下脂肪的蓄积量、被毛状况三方面观察。★营养良好:肌肉丰满,皮下脂肪肥厚,被毛平顺光亮,躯体轮廓丰圆。★营养不良:消瘦,被毛蓬乱无光,骨骼表露明显。二、个体检疫个体检疫的方法和内容如下:(一)视诊1.看精神状态2.看营养程度3.看姿势与运动二、个体检疫个体检疫的方法和内容如下:观察动物站立、睡卧的姿势是否自然,运动时动作是否灵活而协调。4.看皮肤被毛观察动物是否有皮肤病变,被毛是否整洁、平顺有光泽。5.看可视黏膜在检查可视黏膜的同时,检查眼、鼻、口等天然孔分泌物的性状。6.看排泄物7.看呼吸与反刍(一)视诊(二)触诊(三)听诊(四)测体温二、个体检疫个体检疫的方法和内容如下:⑴耳根、角根、鼻端、四肢末端⑵体表皮肤⑶体表淋巴结⑷嗉囊⑴叫声:判别动物异常声音⑵咳嗽:判别动物呼吸器官病变。•干咳:见于上呼吸道炎症(咽喉炎、慢性支气管炎);•湿咳:见于支气管和肺部炎症健康动物:早晨温度较低,午后略高,波动范围在0.5℃~1℃之间。★常根据体温升高程度,判断动物发热程度,进而推测疫病的严重性和可疑疫病范围。★体温升高程度分为:微热(体温升高1℃);中等热(体温升高2℃);高热(体温升高3℃);最高热(体温升高3℃以上)。个体检疫群体检疫群检正常→抽检5%-20%群检异常→个体检查动态观察静态观察食态观察临床检疫临床检疫—小结★站立平稳,不断走动拱食,并发出“吭吭”声。对外界刺激敏感,遇人接近表现警惕性凝视。睡卧常取侧卧,四肢伸展,头侧地,呼吸均匀;爬卧时后腿屈于腹下。排泄物正常。体温正常。被毛整齐光亮。★起立敏捷,行动灵活,走跑时摇头摆尾或上卷尾。遇驱赶,随群前进,不断发出叫声。★饿时叫唤,饮喂时抢食,大口吞咽有响声且响声清脆,全身鬃毛随吞食而颤动。三、各种动物临诊检疫特点(一)猪的临诊检疫特点1.健康猪健康猪健康猪健康猪★精神萎靡,离群独立,全身颤抖或头颈歪斜。蜷卧,不愿起立。被毛粗乱无光,鼻盘干燥,眼有分泌物,肷窝凹陷。行动迟缓,步态踉跄,跛行或出现神经症状。★食欲下降,懒于上槽,或只吃几口就退槽,有些只闻而不食,亦有的食欲废绝。排泄物异常。多有体温异常。2.病猪病猪病猪病猪病猪病猪病猪★站立平稳,神态安静。睡卧时常呈膝卧姿势,四肢弯曲。全身被毛平整有光泽,鼻镜湿润,眼、嘴及肛门周围干净。反刍有力,正常嗳气,呼吸平稳。肉用牛垂肉高度发育;乳用牛乳房清洁,泌乳正常。排泄物、体温正常★健康牛走起路来精力充沛,腰背灵活,四肢有力,摇耳甩尾,自由自在。★饮食中争抢饲料,咀嚼有力,采食时间长,采食量大。放牧中喜采食高草,常甩头用力扯断。运动后饮水不咳嗽。(二)牛的临诊检疫特点1.健康牛健康牛★精神沉郁,头颈低伸,拱背弯腰或有异常体态。睡卧时四肢伸开,横卧或曲颈侧卧,嗜睡,久卧不起或起立困难。被毛粗乱。反刍迟缓或停止。排泄物异常。体温、呼吸多异常。★运动时常跛行掉队或不愿行走。饮食时表现厌食或不食,或采食缓慢,咀嚼无力。出现运动后饮水咳嗽。2.病牛病牛头,背,肩皮表大量结节病牛★站立平稳,乖顺。被毛整洁。呼吸平稳。常于饱腹后合群卧地休息,反刍。遇炎热相互把头藏于对方腹下避暑。★走起路来精神活泼,合群不掉队;放牧中虽很分散,但不离群。山羊活泼机敏,喜攀登,善跳跃,好争斗,尤其是羔羊和幼龄羊。★饲喂时互相争食,放牧时常边走边吃草,边走边排粪,排泄物正常。食后肷窝臌起。(三)羊的临诊检疫特点1.健康羊都安山羊—公羊都安山羊—健康羊隆林山羊—健康羊健康羊★精神萎靡不振,常独卧一隅,遇人接近不起不走。不反刍。排泄物异常。呼吸异常。被毛粗乱,脱毛,皮肤干裂。行走摇摆,或出现异常运动,异常姿势。★食欲不振或停食,食后肷窝仍下陷。山羊喜卧懒动,多有体温异常。2.病羊(四)家禽的临诊检疫特点1.健康家禽★神态活泼,反应敏锐。站立时伸颈昂首翘尾,且常高收一肢,目光伶俐,时常侧视。卧时头叠放在翅内。冠、髯红润,羽绒丰满光亮,排列匀称。口鼻洁净,呼吸正常,排泄物正常。体温正常。★平养鸡行动敏捷,步态稳健;鸭、鹅陆地行走稳健,水中游牧自如,放牧时不掉队。★健康家禽啄食连续,食欲旺盛,食量大,嗉囊饱满。2.病家禽精神萎靡,缩颈垂翅,闭目似睡。冠、髯苍白或紫黑,喙、蹼色泽变暗。有的头颈部肿胀,眼、鼻等天然孔有异常分泌物。羽绒蓬乱无光。行动迟缓,跛行或有肢翅麻痹及其它神经症状。食欲减退或废绝,嗉囊空虚。排泄物异常。多有体温异常。●细检查尸体体表特征及天然孔有无异常,以排除炭疽等恶性传染病。●患炭疽病的动物及其尸体,禁止剖检。●若怀疑动物死于炭疽,先采取耳尖血液涂片镜检,排除炭疽后方可剖检。第三节病理学检查技术一、病理剖检检查技术(一)对动物尸体剖检的要求1.剖检前检查第三节病理学检查技术一、病理剖检检查技术(一)对动物尸体剖检的要求1.剖检前检查2.剖检时间3.剖检地点4.剖检数量5.剖检术式6.安全防护剖检进行的越早越好,最好在白天进行剖检。病理解剖室或;在野外或其它检疫现场剖检时,应选地势高燥并远离居民区、畜舍及交通要道的地方进行。家禽:5只以上;大中动物至少剖检3头。•工作人员的安全防护工作;防止环境污染。•常用的消毒液有:1%~2%硼酸、0.1%新洁尔灭、5%碘酊、70%酒精等第三节病理学检查技术一、病理剖检检查技术(一)对动物尸体剖检的要求(二)外部检查1.检查尸体变化:尸僵、尸斑、尸腐、血液凝固2.检查皮肤、被毛及营养状况3.检查天然孔(三)内部检查1.皮下检查2.内脏器官的检查:对有病变和病变严重的器官要重点检查,分辩病理变化特点,判定病变性质。3.口腔、鼻腔和颈部器官的检查(四)剖检记录1.记录内容:要求完整、客观、真实。记录应在检查过程中完成,而不是事后补记。2.病变描述:必须客观准确,反映组织器官本来的变化。二.病理组织学检查★弥补了肉眼检查的不足,进一步明确病变性质,常使疫病得到确诊。尤其对肿瘤的定性,脑组织病变检查有极高的价值。★常用的有石蜡切片、苏木素—伊红(H.E)染色法;快速冰冻切片★如猪瘟、牛海绵状脑病的检测。第四节检疫材料的采集采集原则供病原学检查材料的采集、处理供病理组织检查材料的采集、处理供血清学检查材料的采集、处理检疫材料的包装和运送内容提要一、采集原则(一)适时采集(二)典型采样典型采样要求样品具有代表性。1.动物活体采样2.从动物尸体采样⑴选择典型动物⑵选择典型材料即未经药物治疗、病状典型的动物,这对细菌性传染病的检查尤其重要。①采集病原体可能在其中含量最高的材料。②在采取病料前,对动物可能患某种疫病作出初步诊断,侧重采集该病原体常侵害的部位。•采集有病变的组织、器官或病变最明显、最典型的部位。•供病理组织切片的样品,应连带部分健康组织。•淋巴结、心、肝、脾、肺、肾,不论有无病变,一般均应采取。一、采集原则(一)适时采集(二)典型采样典型采样要求样品具有代表性。1.动物活体采样2.从动物尸体采样动物群体发病,至少采取5头(只)动物的病料。每一种样品应有足够的数量,除确保本次实验用量外,以备必要的复检用。(三)合理采样(四)无菌采样样品采集全过程应无菌操作,尤其是供微生物学检查和血清学实验的样品。采样部位、采样用具、盛放样品的容器均需灭菌处理。(五)安全采样在采样过程中,采样人员要注意安全,防止感染;同时防止病原扩散而造成环境污染。二、供病原学检查材料的采集、处理(一)供微生物学检查材料的采集、处理1.血液•采血部位:颈静脉或尾静脉或耳静脉;家禽从翅静脉或心脏。死亡动物从右心房采血。•采血量:10ml(大、中动物);3~5ml(小动物和家禽)•全血抗凝:EDTA—Na2、枸橼酸钠、肝素。枸橼酸钠不宜用于病毒血样。•10ml血液+4%枸橼酸钠溶液1ml或0.1%肝素1ml或EDTA—Na215~20㎎。•病毒样品:1ml血样=青霉素+链霉素各500~1000IU,以抑制血源性或在采血过程中污染的细菌。2.分泌物和渗出液⑴口腔、鼻腔、喉气管、泄殖腔及阴道分泌物:用灭菌的棉球蘸取。⑵咽食道分泌物:采前禁食12h,食道探子刮取。⑶乳汁:清洗乳房并消毒→弃去最初挤出的几把乳汁→挤出的10~20ml乳汁。⑷尿液:排尿时采集或用导尿管采取,常取30~50ml。⑸水泡液、水肿液、关节囊液,胸腹腔渗出液:用注射器抽取,至少采取1ml。⑹脓汁:已破口的脓疱,用棉球蘸取;未破口的用注射器吸取。