淋巴细胞亚群

淋巴细胞亚群分析的临床应用北京协和医院免疫科赵丽丹如何测定测定值正常参考值(平均值±标准差）百分比绝对值（细胞／mm3)百分比绝对值（细胞／mm3)白细胞血淋巴细胞32.6±4.682230±478Ｂ淋巴细胞CD19+11.5±3.02252±72自然杀伤细胞CD16+CD56+16.5±7.00371±196Ｔ淋巴细胞CD3+69.7±7.061543±358Ｔ辅助细胞CD3+CD4+38±8.0849±288Ｔ抑制／细胞毒细胞CD3+CD8+26.4±7.23579±175记忆T4细胞CD4+CD45RA-/CD4+57.0±11.41483±200Naive细胞CD4+CD45RA+/CD4+43.0±11.41368±162CD4+CD45RA+62L+/CD4+43.0±11.41368±162CD4+CD28+/CD4+93.1±8.08785±265CD4+CD25+/CD4+3.4±2.9631±39CD4+DR+/CD4+10.2±5.1486±50CD8+CD28+/CD8+48.8±11.6291±101CD8+DR+/CD8+15.1±8.899±79CD8+CD38+/CD8+44.9±12.5271±114CD4+CD95+/CD4+41.9±16.7356±203CD8+CD95+/CD8+22.3±14.8146±109CD8+CD57+/CD8+CD4+Ki67+/CD4+1.6±1.3CD8+Ki67+/CD8+1.8±1CD4/CD81.536±0.589结果分析：1)淋巴细胞总数，T淋巴细胞计数NK细胞计数B淋巴细胞2）CD4＋T细胞比例及计数CD8＋T细胞比例及计数CD4＋T/CD8＋T比例3)第二信号受体CD284）细胞免疫异常激活：报告单外周血淋巴细胞T淋巴细胞NK细胞外周血淋巴细胞亚群CD16+CD56+T辅助细胞CD3+CD19+T8细胞B淋巴细胞CD4+CD8+NaïveTCD45RA+CD45RO-MemoryTCD45RA-CD45RO+CD95DRCD38CD4+/CD8+活化标志细胞毒T细胞抑制型T细胞CD28＋CD28－增殖标志Ki-67体液免疫和细胞免疫产生抗体，中和胞外病毒、细菌外毒素B细胞的发育B细胞在风湿病中的免疫效应活化的B细胞1抗原呈递,提供共刺激信号，活化T细胞；2产生自身抗体，介导II型、III型超敏反应；3调节其他免疫细胞如DC4产生的致炎性细胞因子：TNF-（肿瘤坏死因子）IL-6（白介素-6）Lymphotoxin（淋巴毒素）IFN-（-干扰素）Anti-DNAAnti-SSARA滑膜中的B淋巴细胞RA关节滑膜可出现弥漫性或滤泡样淋巴细胞浸润，甚至可形成生发中心，其中的B细胞可分化为浆细胞并产生RF。免疫缺陷病X连锁无丙种球蛋白血症XLA外周血和淋巴组织中B细胞减少或缺失，Ig缺乏男性婴幼儿，6~9月发病，反复化脓性感染普通变异性免疫缺陷病CVIDIgG显著低下，B细胞减少或正常，naïveT减少青壮年，反复化脓性呼吸道感染选择性IgA缺陷、选择性IgG亚类缺陷高IgM综合征•继发：肿瘤、药物、营养不良•X连锁重症联合免疫缺陷SCIDT细胞和NK细胞减少，B细胞可正常新生儿、婴幼儿，病毒、PCP、念珠菌、败血症理想的B细胞靶向治疗应为清除病理性B细胞和/或促进保护性B细胞的扩增和功能。Anti-CD20抗CD20单抗治疗淋巴细胞亚群监测在抗CD20单抗治疗中的临床指导意义初始治疗B细胞显著增多→应用价值；CD4+T细胞显著减少→应用风险；治疗中的监测B细胞清除效应→预测治疗效果（临床效果与B细胞清除相关，*长寿命浆细胞）随访中的病情监测B细胞恢复－病情复发－强化治疗；感染风险化脓菌、NK细胞：杀伤肿瘤细胞、病毒感染细胞、胞内寄生菌（分支杆菌、利什曼原虫、李斯特菌、真菌）、寄生虫；自身免疫性疾病时降低,病毒感染时升高表面标志物：CD3-CD16+CD56+；NK细胞T淋巴细胞－从基础到临床T淋巴细胞：CD3-TCR复合体→识别MHC-抗原肽复合物CD3+/CD4+：辅助性T细胞（Th）→分泌细胞因子，调节免疫应答CD3+/CD8+：细胞毒T细胞（Ts）→杀伤靶细胞、抑制功能•双重识别：MHC限制性：MHC-II/CD4；MHC-I/CD8；•I类分子表达于所有有核细胞表面—提呈内源性抗原（病毒、胞内病原体、肿瘤）II类分子表达于专职APC、胸腺上皮细胞－提呈外源性抗原胞内病原体（病毒、立克次体、结核杆菌、布氏杆菌、沙门氏菌、李斯特菌、军团菌、新型隐球菌、原虫）肿瘤免疫抗移植排斥第二信号分子CD28－功能标记T细胞活化的双信号：TCR-MHC-抗原肽;CD28-B7;T4细胞亚群及免疫效应体内免疫功能状态辅助临床疾病的诊断探索疾病的发病机理、病程、预后，监测、指导临床治疗方案淋巴细胞亚群-从基础到临床如何看淋巴细亚群检测报告？B细胞、T细胞和NK细胞比例和绝对计数（自身免疫病、肿瘤、免疫缺陷病）药物－感染风险、疗效评估）T4和T8细胞比例和计数Naïve细胞和memory细胞比例和计数功能亚群CD4+CD28+和CD8+CD28+激活亚群HLA+DR+，CD38+：异常细胞免疫激活提示微生物感染（如HIV、CMV和EBV等），激活的程度与感染的严重程度密切相关。CD3+T淋巴细胞CD3增高，见于甲状腺功能亢进、甲状腺炎、重症肌无力、器官移植后排斥反应、慢性活动性肝炎、瘤型麻风、恶性肿瘤、ALL、SLE等CD3减低，见于麻疹后、麻疹脑炎、腮腺炎、流感、带状疱疹、皮肌炎、SLET4、T8淋巴细胞CD4增高，见于RA、SS等；CD4减低，见于SCID、CVID、PBC、慢性活动性肝炎、AIDs等；CD8增高，见于乙型肝炎、传染性单核细胞增多症、麻风、AIDs等；CD8减低，见于RA、SS等。CD4+/CD8+的比值应用：评价自身免疫失调免疫缺陷监测GVHD：较移植前显著↑，GVHD风险↑正常参考值为1.4～2.5；＞2.5：细胞免疫功能过度活跃1.4：病毒感染、恶性肿瘤CD4/CD81.4～2.5CD4/CD8↑2.5CD4/CD8↓1.4细胞免疫激活病毒感染HIV/AIDsEBV（传单）CMV流感HBV自身免疫病SLEMS肿瘤及其他淋巴瘤白血病实体肿瘤I型DMGVHD变态反应RANaïveT细胞（CD4+CD45RA+CD45RO-CD62L＋）NaïveT细胞亚群减少容易发生机会性感染CD28＋的T4或T8细胞亚群减少的个体容易发生机会性感染CD25分子、HLA-DR分子和CD38分子是细胞活化标志，异常的T细胞免疫激活提示病毒感染感染(如HIV、CMV和EBV等)移植后CD4／CD8比值较移植前明显增加，则预示可能发生排斥反应；淋巴细胞亚群与疾病疾病CD3CD4CD8CD4/CD8NK自身免疫性疾病系统性红斑狼疮类风湿性关节炎自身免疫性溶血性贫血重症肌无力免疫缺陷病爱滋病病毒感染传染性单核细胞增多症慢性活动性肝炎活动性肝硬化肿瘤消化道癌,肝癌,肺癌再生障碍性贫血粒细胞减少症SLE淋巴细胞总数减少T4细胞减少，T8细胞正常或升高功能亚群CD28+表达减少活动期激活亚群明显增加？移植移植后的细胞免疫功能评估移植排斥：CD25+表达显著↑，CD4/CD8↑，GVHD移植后CMV感染：T4细胞显著下降，T8比例明显增高；CD28表达下降；HLA－DR、CD38表达升高，NK和B细胞数量降低，CD4/CD8比值0.2必须停用免疫抑制剂－凶险感染.HIV/AIDS淋巴细胞总数显著减少CD19+CD38+活化B细胞增多主要感染T4细胞，T4细胞持续性下降、功能受损、异常免疫激活：naïve细胞减少，CD28+表达减少，T8细胞正常或升高,晚期也减少。CD38,DR,CD95异常升高，且与HIV血浆RNA病毒载量有良好相关性T4细胞数量的减少第一期：原发感染期，T4细胞数量一过性迅速减少第二期：无症状期，T4细胞数量持续缓慢减少第三期，AIDS前期，T4细胞数较快速减少，T4细胞数在350/mm3-200/mm3。第四期，AIDS期，T4细胞数再次快速减少.T4细胞数和病毒载量－－预测机会性感染、把握治疗时机治疗时机：T4350/ul，T4350~500/ul，快速减少中或病毒拷贝105/ml；T4200/ul，预防性抗PCP治疗；T4细胞数与机会性感染T4500/ul:较少出现机会性感染；T4350～500/ul：HSV、带状疱疹病毒感染；T4200～350/ul：皮肤霉菌、口腔念珠菌、HSV、带状疱疹T4100～200/ul：PCP、隐球菌、弓形体T4100：CMV、鸟分支杆菌HIV感染时T4细胞的减少规律T4细胞(cell/mm3）800400急性感染期无症状期艾滋病前期和艾滋病期CD4病毒载量艾滋病人经HAART后的CD4+细胞恢复规律1.90.17/µl/d（CD4+淋巴细胞）0.05/µl/d（记忆CD4+细胞）0.11/µl/d（NaiveCD4+细胞）0.51.43691218501000月150Cells/µlCD4+T细胞功能缺失导致进展至艾滋期5－8年急性感染期无症状期艾滋期HIVCD4白念菌带状疱疹卡波氏肉瘤淋巴瘤卡氏肺囊虫肺炎弓形体巨细胞病毒鸟分支杆菌2003－6个月AIDSCMV感染淋巴细胞总数减少T4细胞减少，T8细胞正常或升高功能亚群CD28+表达减少激活亚群增加谢谢！