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Qubit®2.0荧光计P9-28方法入门指南安装Qubit®2.0荧光计Qubit®2.0荧光计是一台单独的仪器，不需要连接到计算机。1.拆开包装之后，将仪器放置在水平、干燥的表面。2.将附带的电源线的一端插入Qubit®2.0荧光计。根据您所在国家的电源插座配置，另一端应连接适当的插头转接器。3.将电源线插入电源插座。一定要使用仪器附带的电源线。使用未经许可的电源线可能会损坏仪器。4.插上后，仪器自动接通电源。5.如果要断开Qubit®2.0荧光计的电源，请拔下仪器的插头。睡眠模式Qubit®2.0荧光计有一个自动待机（即睡眠）模式，闲置30分钟后触发。您也可以轻触触摸屏左上角的Power（电源）键，进入待机模式。如果要从待机模式中恢复，轻触触摸屏上的任何位置。从待机模式中恢复将使您返回到睡眠模式开始时的那个界面。闲置7.5小时后，触摸屏幕，您将返回到主界面（如下图）。主界面仪器开机时，主界面显示。在主界面上，您可以立即开始定量分析（DNA、RNA或蛋白），利用适当的标准品来校准仪器，访问已保存的数据，设置日期和时间，或调整屏幕亮度。日期和时间设置当您收到仪器时，日期和时间已经预先设定。如果要重设日期和时间，请按照以下步骤操作：1.按下Date/Time（日期/时间）。日期/时间属性界面包含了6个滚轮，它们对应了手指在界面上的运动，就像轮子一样。2.选择日期和时间，将期望值拨到滚轮的中间位置。按下Set（设置），对日期/时间作出更改。更新后的日期/时间就显示在窗口顶端。注意：如果您选择Cancel（取消），那么您的更改将不保存，仪器返回到上一次显示的界面。调整屏幕亮度如果要调整屏幕亮度，请按下触摸屏右上角的Brightness（亮度）键，将滚动条移至理想的亮度水平。升级固件如果要将您的Qubit®2.0荧光计升级到Invitrogen目前最新的固件，请按照以下步骤操作：1.从我们的网站（）上下载最新的固件，保存在您的U盘中。2.按下触摸屏顶部的Version（版本）按钮。版本界面显示如下。3.将U盘插入USB接口，按下Update（更新）。注意：Update（更新）按钮上的绿点表明仪器识别U盘；红点表明U盘未插入USB接口，或仪器无法识别U盘。在成功更新固件后，下列界面显示，之后仪器返回到主界面。现在您可以继续设置您的标准品并定量您的样品。Qubit®2.0荧光计使用指南如欲获得最佳结果，请遵循以下建议。关于更多信息，详见附录第33-35页，Qubit™分析的关键考虑因素。请勿在阳光直射下操作仪器。处理样品时应戴上手套。仅在室温下使用Qubit®2.0荧光计（22-28°C）。在室温下保存所有的试剂盒，仅在Qubit®2.0荧光计测定荧光时才插入分析管。在测量之前请勿用手握住分析管。确保您已经利用适当的标准品校准过Qubit®2.0荧光计。将样品或标准品与工作液混合之后，让Qubit™DNA和RNA分析管孵育2分钟。将样品或标准品与工作液混合之后，让Qubit™蛋白分析管孵育15分钟。如果您要多次读取同一支管，请从仪器中取出分析管，让其平衡至室温30秒，再进行下一次读取。访问，了解其他的应用指南、技术指南、引用文献、固件升级，以及经过验证的Qubit™分析列表，它们已利用Qubit®2.0荧光计的测试。Qubit®2.0荧光计的分析管只有薄壁、透明的0.5mLPCR管适用于Qubit®2.0荧光计。可接受的分析管包括Qubit®分析管（货号Q32856，500支管）或AxygenPCR-05-C管（VWR，货号10011-830）。最小分析体积必须是200μL，以便准确读取。校准Qubit®2.0荧光计简介对于每次分析，您可以选择运行新的标准品，以校准Qubit®2.0荧光计，或使用之前校准的数值（关于更多信息，详见附录第35页，校准Qubit®2.0荧光计）。本节提供了运行新标准品进行校准和使用上一次校准的指南。注意：在第一次使用荧光计时，没有使用上一次校准的选项。注意Qubit®2.0荧光计的校准需要配制适当的标准品溶液。关于如何配制这些标准品，详见您所用分析附带的操作指南。所需的材料开展分析的适当标准品注意：将标准品与工作液混合之后，须孵育适当的时间（Qubit™DNA和RNA分析为2分钟，Qubit™蛋白分析为15分钟）。Qubit®分析管或其他适当的0.5mL分析管可选：Qubit®2.0U盘用于数据转移，仪器附带或单独购买运行新标准品进行校准1.在主界面上，选择您想要运行标准品的分析类型。标准品界面自动显示。2.对于选定的分析，如果您已经开展过校准，Qubit®2.0荧光计会提示您选择读取新的标准品或使用上一次校准。注意：您可以在其他任何界面上按下Standards（标准品），进入标准品界面。3.按下Yes（是），读取新的标准品。插入Standard#1的提示出现在界面上。4.在样品槽中插入Standard#1，并按下Read（读取）。确保您使用了适合分析的Standard#1。读取过程大约需要3秒钟。5.插入Standard#2，并按下Read（读取）。确保您使用了适合分析的Standard#2。6.如果您正在开展Qubit™蛋白分析，它需要三点校准，那么请按照提示插入Standard#3，并按下Read（读取）。在读取Standard#2之后（对于Qubit™蛋白分析，在读取Standard#3之后），校准完成。新的标准品曲线及直线连接的标准品的数据点出现在屏幕上。注意在荧光vs.浓度曲线中，空心圆圈代表正确的标准品，黑色圆圈代表落在分析范围内的样品，而红色圆圈代表不在分析范围内的样品或标准品。最近的样品以大的黑色圆圈表示。“StandardsIncorrect（标准品不正确）”信息表示有错误。检查校准值可能有助于您确定错误来源。详见下一页，检查标准品。使用上一次的校准当Qubit®2.0荧光计会提示您选择读取新的标准品或使用上一次校准时，您可以按下No（否），选择在样品读取时使用上一次的校准。随后您会被要求插入含有样品的分析管。检查标准品检查标准品界面显示了Standard#1、Standard#2、Standard#2（如果适用）和特定分析中最后一次测定的原始荧光值。这些数值可以协助您判断Qubit®2.0荧光计的性能，以及您使用的样品是否在分析范围内。对于Qubit™dsDNABR、Qubit™dsDNAHS、QubitssDNA、Qubit™RNA和Qubit™RNABR分析，Standard#2的读取应当比Standard#1高很多，且样品的读取应落在两个标准品之间。对于Qubit™蛋白分析，Standard#3的读取应当比Standard#2高很多，且样品的读取应不超过Standard#3的50%。如果要访问检查标准品界面，请在标准品界面按下CheckStds（检查标准品）。标准品和最后一个样品的原始荧光值将显示在界面上。读取样品简介在您通过运行适当标准品来完成Qubit®2.0荧光计的校准或接受上一次校准的数值之后，您随时可读取您的样品。本节提供了利用Qubit®2.0荧光计通过适当的Qubit™分析来定量您的DNA、RNA或蛋白样品的操作指南。注意在读取之前，必须正确地制备样品。关于制备样品的操作指南，详见您正在使用的分析所附带的操作指南。所需的材料您想要用来定量样品的Qubit™分析试剂盒（关于现有的Qubit™分析试剂盒及订购信息，详见第33页）您的DNA、RNA或蛋白样品注意：将样品与工作液混合之后，须孵育适当的时间（Qubit™DNA和RNA分析为2分钟，Qubit™蛋白分析为15分钟）。Qubit®分析管或其他适当的0.5mL分析管可选：Qubit®2.0U盘用于数据转移，仪器附带或单独购买读取样品1.选择Sample（样品），进入样品界面。2.在样品槽中插入样品，并按下Read（读取）。读取过程大约需要3秒钟。一旦测定完成，结果会显示在界面上。显示的数字即为分析管中核酸或蛋白的浓度。如果要计算原始样品的浓度，详见第22页，计算原始样品的浓度。3.如果要读取下一个样品，从样品槽中取出样品，插入下一个样品，并按下ReadNextSample（读取下一个样品）。4.重复样品读取，直至所有样品读完。使用图表的注意事项按下HideGraph（隐藏图表），可隐藏荧光vs.浓度图，界面上只显示最近的测定。注意在标准品界面没有隐藏图表功能。按下ShowGraph（显示图表），让图表重新回到界面上。按下ClearGraph（清除图表），清除荧光vs.浓度图中的所有样品数据，但保留标准品数据。Qubit®2.0荧光计自动保存所有读取的数值，但不保存图形数据或计算。如果要将所有的数据和计算保存到Qubit®2.0U盘中，详见第27页，将数据保存到Qubit®2.0U盘中。计算原始样品的浓度简介Qubit®2.0荧光计的DilutionCalculator（稀释计算器）特征可根据您添加到分析管的样品体积，计算原始样品的浓度。稀释计算器1.如果要计算原始样品的浓度，按下CalculateStockConc（计算储液浓度）。包含体积滚轮的稀释计算器界面显示。2.利用体积滚轮，选择您添加到分析管中的原始样品体积。当您停止滚动时，Qubit®2.0荧光计根据测得的分析浓度计算原始样品浓度。3.如果要更改原始样品浓度的显示单位，按下ng/mL。一个显示目前单位（以相邻的红色虚线表示）的弹出窗口打开。4.在单位选择弹出窗口上触摸适当的单位，选择适合于原始样品浓度的单位。如果要关闭单位选择弹出窗口，触摸界面上弹出窗口以外的任何位置。当单位选择弹出窗口关闭时，Qubit®2.0荧光计自动转换到您选择的单位。注意：样品浓度旁边的单位按钮反映了单位的变化（例如，如果您将单位更改为pg/μL，则按钮显示pg/μL）。5.如果要保存计算的数据，详见下一页，将计算保存到Qubit®2.0荧光计。6.如果要退出稀释计算器界面，按下界面下方的任一导航按钮或ReadNextSample（读取下一个样品）。注意：当您离开稀释计算器界面时，Qubit®2.0荧光计只保存稀释计算器中样品体积和单位的最后值。返回到稀释计算器界面显示这些最后选择的值。将计算保存到Qubit®2.0荧光计1.如果要将计算的数据保存到Qubit®2.0荧光计，在稀释计算器界面按下Save（保存）。最后计算出的测量值将以.CSV文件保存，并标上时间和日期戳。2.如果要查看、重命名并将数据保存在Qubit®2.0U盘中，详见下一页，数据处理。数据处理简介Qubit®2.0荧光计呈现了全面的数据及图形报告，且数据可保存为.CSV（逗号分隔值）文件，便于样品比较。.CSV文件中的每个测量数据点都附有编号，并显示时间和日期戳。查看数据1.如果要查看保存在Qubit®2.0荧光计中的数据，可在任一界面按下Data（数据）。数据界面以电子表格形式显示了数据，而更多的数据列隐藏在右侧。最近的数据点显示在电子表格的第一行。2.用手指拖动滚动条，可在电子表格中连续移动，以访问隐藏在右侧的数据列。重命名数据文件1.在数据界面触摸电子表格中的相应行，选择待重命名的数据文件。选定的行将高亮显示。如果未选择任何行，系统会提示您选择一行或多行进行重命名。注意：如果要选择多个文件，一一选择每一行，或按下列标题选择所有文件。如果要取消选择所有行，只需再次按下列标题。2.按下Rename（重命名），输入选定行的名称。字母键盘界面显示。如果要切换成数字键界面，按下123。3.利用保存菜单上显示的键盘按钮输入文件名称。您最多可输入20个字符。注意：如果您已经选择了一次重命名多行，文件将会通过名称最后的数字加以区分。数字将以升序显示，最近的样品从1开始（如，SAMPLE_1、SAMPLE_2等）。4.按下OK，将您输入的名称保存为文件名，并返回到