含动物药矿物药的中药制剂分析

含动物药、矿物药的中药制剂分析§1含动物药的中药制剂分析概述牛黄及其制剂分析天然牛黄人工牛黄：由贝斯素、胆酸、猪去氧胆酸、胆红素、胆固醇、无机盐等配制而成人工培育牛黄§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析牛黄的化学成分胆色素：胆红素等胆汁酸类：胆酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、猪去氧胆酸等脂类蛋白质、肽、氨基酸类无机元素§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析胆汁酸的性质和化学反应多以肽（甘氨胆酸、牛磺胆酸）的形式存在溶解性成盐－－易溶于水游离－－可溶于乙酸、丙酮、碱液，易溶于乙醇、乙醚COOHHHHOHHHOOH胆酸§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析胆汁酸的性质和化学反应颜色反应Pettenkofer反应（冰水冷却）--紫色GregoryPascoe反应（65℃水浴30min）--蓝色Hammarsten反应:＋20％铬酸胆酸－紫色鹅去氧胆酸－不显色温热§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析胆红素的性质及化学反应溶解性：溶于苯、氯仿、氯苯、二硫化碳、碱液，微溶于乙醇、乙醚，成盐后易溶于水不稳定性，易被氧化NHONHCOOHCH2NHCOOHNHO胆红素§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析胆红素的性质及化学反应化学反应Gmelin反应（浓硝酸氧化反应）VandenBergh反应（重氮化反应）蓝紫色(强酸性)→红色(pH2-5)→绿色(pH5.5)NHONHCOOHCH2NHCOOHNHO§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析定性鉴别理化鉴别氯仿试验：＋硫酸/过氧化氢→绿色醋酸试验：＋糠醛/硫酸→蓝紫色水合氯醛试验：色素溶解，呈金黄色速效感冒(伤风)胶囊中人工牛黄鉴别取本品10粒，加50ml氯仿溶解后，加0.5%活性炭（约0.2～0.4g）充分振摇后，再加硫酸与过氧化氢溶液（30%）各2滴，振摇，即显绿色。§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析定性鉴别薄层鉴别胆酸、去氧胆酸胆红素提取溶媒三氯甲烷、乙醇、甲醇三氯甲烷、乙醇混合液吸附剂硅胶G硅胶G展开剂异辛烷-乙酸乙酯-冰醋酸，正己烷-乙酸乙酯-甲醇-冰醋酸氯仿-乙酸乙酯-冰醋酸显色剂硫酸乙醇溶液、磷钼酸乙醇溶液§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析含量测定胆酸的测定酸碱滴定法—总胆酸比色法—去氧胆酸薄层扫描法HPLC※使用ELSD检测器或进行柱前衍生§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析含量测定胆红素的测定分光光度法（重氮化反应）HPLC§1含动物药的中药制剂分析麝香及其制剂分析化学成分及性质大环化合物甾族化合物胆固醇、酯、蜡蛋白质、肽、氨基酸无机盐其他成分O麝香酮§1含动物药的中药制剂分析麝香及其制剂分析定性鉴别理化鉴别—麝香粉末GC紫外光谱法乙醇提取液→220nm,270nm乙醚提取液→231nm,265nm正己烷提取液→220nm,265nm薄层色谱法麝香保心丸中麝香的气相色谱鉴别取本品2g，研碎，加乙醚5ml，振摇，超声处理5分钟，离心，取上清夜，作为供试品溶液。另取麝香酮对照品，加乙醚制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。照气相色谱法(附录VIE)试验，以聚乙二醇(PRG)-20M和甲基硅橡胶为混合固定相，涂布浓度分别为1.64%和1.32%，柱长为2m，柱温为180℃。分别取对照品溶液与供试品溶液适量，注入气相色谱仪。供试品色谱中应呈现与对照品色谱保留时间相同的色谱峰。梅花点舌丸中麝香的薄层鉴别取本品3g，研细，加乙醚10ml，密塞，振摇10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取麝香酮对照品，加乙醇制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液。薄层条件：硅胶G，石油醚-二氯甲烷(2:3)，二硝基苯肼试液§1含动物药的中药制剂分析麝香及其制剂分析含量测定GC固定液—苯基（50%）甲基硅酮薄层色谱法HPLC§1含动物药的中药制剂分析蟾酥及其制剂分析化学成分蟾蜍甾二烯游离型--蟾毒配基结合型—蟾蜍毒素等强心甾烯蟾毒类吲哚碱类OHOHOO蟾毒配基§1含动物药的中药制剂分析蟾酥及其制剂分析定性鉴别显色反应+对二甲氨基苯甲醛/硫酸→蓝紫色+醋酐/硫酸→蓝紫色~蓝绿色氯仿提取液+硫酸→界面鲜黄色，氯仿层淡红色+酒石酸液/二甲氨基苯甲醛→蓝色氯仿提取液+白糖/硫酸→界面红色§1含动物药的中药制剂分析蟾酥及其制剂分析定性鉴别薄层色谱法其他方法：纸色谱、紫外光谱、红外光谱等提取剂吸附剂展开剂显色剂蟾蜍毒素类氯仿硅胶G丙酮-氯仿-环己烷三氯化锑氯仿溶液或10%硫酸乙醇试液蟾蜍碱类甲醇硅胶G氯仿-甲醇-氨水邻苯二醛§1含动物药的中药制剂分析蟾酥及其制剂分析含量测定分光光度法差示光度法薄层扫描法HPLCGC梅花点舌丸中三个蟾毒内酯的含量测定--HPLC主要色谱条件：C18柱，乙腈-水（1:1），检测波长297nm，流速1ml/min对照品：脂蟾毒配基、脂蟾毒配基、蟾毒灵供试品溶液：氯仿超声提取，中性氧化铝小柱纯化§1含动物药的中药制剂分析斑蝥及其制剂分析化学成分斑蝥素、脂肪、树脂、甲酸、色素、挥发油、甲壳质、无机元素定性鉴别理化鉴别纸色谱薄层色谱斑蝥素OOOO斑蝥素薄层色谱鉴别供试品溶液：+氯仿提取，挥干，残渣用石油醚洗涤后，加氯仿溶解。对照品：斑蝥素薄层色谱条件：硅胶G，氯仿-丙酮（98:2），1%溴甲酚绿乙醇溶液§1含动物药的中药制剂分析斑蝥及其制剂分析含量测定薄层色谱GC酸碱滴定§2含矿物药中药制剂的分析概述矿物药（天然矿物、生物化石、人类加工品、化学制品）→无机类药材分类含砷、汞、铅、铜、铁、钙、硅、硫、氯以及其他矿物药§2含矿物药中药制剂的分析矿物药的分析样品的分解和溶解溶解法（湿法）--水、稀酸、浓酸、混合酸等处理熔融法（干法）--碱性熔剂、酸性熔剂、氧化性熔剂、还原性熔剂分析方法容量分析法、重量分析法热分析法可见分光光度法原子吸收光谱法（AAS）§2含矿物药中药制剂的分析含砷矿物药及其制剂分析含砷矿物药：雄黄、雌黄、砒石、砒霜分解硝酸、硫酸等酸性溶剂分解过氧化钠、碳酸钠熔融分解硫酸－过氧化氢、硫酸－硝酸钾※分解时，应防止砷化合物挥发而损失。雄黄雌黄§2含矿物药中药制剂的分析含砷矿物药及其制剂分析定性鉴别硫的鉴别As2S2+2KClO3+3HNO3→2KAsO3+2H2SO4+Cl2↑+NO2↑H2SO4+BaCl2→BaSO4↓(白色沉淀)+2HCl砷的鉴别2As2S2+7O2→2As2O3+4SO2↑As2S3+9O2→As2O3+6SO2↑As2O3+3H2O→H3AsO3H3AsO3+H2S→As2S3↓(黄色絮状沉淀)+H2O△△△△§2含矿物药中药制剂的分析含砷矿物药及其制剂分析含量测定碘量法直接碘量法硫酸分解－直接碘量法H3AsO3+I2蓝色碱熔分解－直接碘量法间接碘量法硫酸过氧化氢分解－间接碘量法分光光度法（Ag-DDC法）pH=8淀粉§2含矿物药中药制剂的分析含砷矿物药及其制剂分析含量测定牛黄解毒片中雄黄含量测定取本品20片，研细，称取2片量(含雄黄约0.1g)，精密称定，置锥形瓶中，加硫酸钾1g、硫酸铵2g与样品混匀。加硫酸15ml，直火加热至溶液呈淡黄色，冷却，缓缓加水50ml，加热微沸3～5分钟，放冷，加酚酞指示液2滴，用40％氢氧化钠溶液中和至显微红色，放冷，用0.25mol/L硫酸溶液中和至褪色，加碳酸氢钠5g，摇匀后，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml,滴定至溶液显紫蓝色。§2含矿物药中药制剂的分析含汞矿物药及其制剂分析含砷矿物药：水银、朱砂、升药、轻粉等等分解硝酸分解法王水或逆王水分解法硫酸－硝酸钾法※分解时，应防止汞的挥发损失低温加热，加回流冷凝管§2含矿物药中药制剂的分析含汞矿物药及其制剂分析定性鉴别亚汞盐＋NH4-/OH-→黑色＋KI→黄绿色↓→灰绿色→灰黑色汞盐＋OH-→HgO↓(黄色)＋KI→猩红色↓→溶于过量KI＋OH-→红棕色↓＋Cu§2含矿物药中药制剂的分析含汞矿物药及其制剂分析含量测定硫氰酸盐法Hg2++2SCN-Hg(SCN)2↓(白色)Fe3++SCN-→FeSCN2+(淡棕红色)※测定温度不宜超过25℃※加高锰酸钾氧化，以消除NO、HNO2的影响HNO3万氏牛黄清心丸中朱砂的含量测定取重量差异项下的本品，剪碎，取5g，精密称定，置250ml凯氏烧瓶中，加硫酸30ml与硝酸钾8g，加热俟溶液至近无色，放冷，转入250ml锥形瓶中，用水50ml分次洗涤烧瓶，洗液并入溶液中，加1％高锰酸钾溶液至显粉红色，两分钟内不消失，再滴加2%硫酸亚铁溶液至红色消失后，加硫酸铁铵指示液2ml，用硫氰酸铵滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml的硫氰酸铵滴定液(0.1mol/L)相当于11.63mg的硫化汞（HgS）。本品按干燥品计算，每丸含朱砂以硫化汞(HgS)计，小丸应为69～90mg；大丸应为138～180mg。§2含矿物药中药制剂的分析含汞矿物药及其制剂分析含量测定分光光度法Hg2++双硫腙→橙色配合物CCl4萃取后，492nm比色原子吸收分光光度法（AAS）§2含矿物药中药制剂的分析双硫腙法测定中药制剂中可溶性汞含量双硫腙四氯化碳贮备液（双硫腙用氨水提纯）双硫腙试液T492nm=60%汞标准贮备液（100ug/ml）、汞标准溶液（1.0ug/ml）样品的消化取1-3g样品，粉碎后，直接置于200ml量瓶中，加入8mlHNO3，放置过夜，在温度为220-270℃的砂浴上预分解10分钟，取出，放置1分钟，加入H2SO425ml和HClO42ml，再置砂浴上继续分解20分钟，取下，趁热加入5%KMnO4溶液1ml，紫色若维持1分钟以上，则表示到达消化终点。若紫色立即褪去，说明样品尚未分解完全，则再加HClO42ml，继续分解20分钟，重复这一操作，直至分解完全为止，冷却后加入10%盐酸羟胺溶液数滴脱色，用蒸馏水定容至200ml后待测。同样操作做一空白试验。标准曲线制备取分液漏斗6个，各加入0.5mol/l硫酸100ml，精密吸取汞标准溶液0、1、2、3、4、5ml，分别加入分液漏斗中，再各加入20%盐酸羟胺溶液2.5ml，36%醋酸5ml，4%EDTA2.5ml，再添加0.5mol/l硫酸使体积为140ml，准确加入双硫腙试液10ml，用力振摇约2分钟，静置分层，过滤有机相至2cm比色皿中，在492nm波长处，以零号管为参比，测定吸光度，并绘制标准曲线。样品分析取消化液30ml于分液漏斗中，加20%盐酸羟胺溶液……§2含矿物药中药制剂的分析中成药散剂内朱砂的含汞量测定—原子吸收法原子吸收分光光度计的工作条件波长：2537埃；汞空心阴极灯，……汞标准贮备液（1mg/ml）、汞标准液（4ug/ml）标准曲线制备精密吸取汞标准溶液0、1、2、3、4、5ml，分别置100ml量瓶中，用0.5mol/l硫酸稀释至刻度，摇匀，依次将上述稀释液置于汞还原汽化装置的反应瓶内，加入还原剂5.0ml，迅速将硅橡胶塞塞紧并剧烈搅拌，使反应60sec，压脚踏开关并同时将二通活塞转向测量方式进气，经30sec后松开脚踏开关，记录峰高吸收谱图后，将二通活塞转向清洗，倒掉反应瓶内的废液即可。同时需做空白试验。样品处理取样品适量（约相当于含汞10mg），置三角烧瓶中，加入消化剂（硝酸-硫酸=1:1）10ml，直火加热至溶解后，放冷，加5%高锰酸钾溶液至粉红色，再滴加10%盐酸羟胺溶液至红色消失，转移至100ml容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，摇匀。样品分析国外开具的“问题中药黑名单”来源：中国经营报美国：禁止出售的中成药有：附子理中丸、安宫牛黄丸、安神补脑丸、抗癌灵、解毒消炎丸、白内障滴眼剂、北京紫雪、安宫降压丸、牛黄清心丸、定心丸、内障明眼丸、中国救心丹、中国尿通、追风透骨丸、朱砂粉、朱砂安神丸、复方五味子片、复方附子丸、