肠球菌 奈瑟菌 卡他莫拉菌

肠球菌属、奈瑟菌属、卡他莫拉菌肠球菌属（Enterococcus）肠球菌属分类肠球菌原归于链球菌属，与D群链球菌血清型相同。1984年Schleifer和Kipper-Bale将其单独成立为肠球菌属。分子方法证实迄今有近20种肠球菌。临床意义是人和动物肠道正常菌群之一。严重基础疾病的老年人和免疫力低下的患者易被感染。主要引起尿路感染，腹腔和盆腔的伤口感染次之，亦可引起全身性感染等。随着抗生素耐药率的增加，肠球菌的感染率正不断上升。形态特征形态：球形或椭圆形。排列：单个、成对或短链状排列。特殊结构：无芽胞和荚膜，少数菌株有稀疏鞭毛。染色性：革兰阳性。培养特性兼性厌氧菌最适生长温度35－37℃，大多数可在10-45℃范围内生长。营养要求不高。血平板：灰白色圆形凸起，有α或γ溶血菌落。麦康凯：较小、稍干燥、粉红色菌落。粪肠球菌生化特征氧化酶（－）、触酶（－）6.5%NaCl培养基上生长。胆汁七叶苷试验阳性。含链球菌D群抗原。一般水解PYR。发酵糖类产酸6.5%NaCl生长肠球菌属的细菌分组试验群Ⅰ群Ⅱ群Ⅲ群Ⅳ群Ⅴ甘露醇++--+山梨糖+----精氨酸-++--各组所含肠球菌群Ⅰ：鸟肠球菌、恶臭肠球菌、假鸟肠球菌、棉子糖肠球菌、解糖肠球菌、E.gilvus、E.pallens群Ⅱ：粪肠球菌、屎肠球菌、铅黄肠球菌、鸡肠肠球菌、孟氏肠球菌群Ⅲ：殊异肠球菌、坚韧肠球菌、希氏肠球菌、E.porcinus、E.ratti群Ⅳ：盲肠肠球菌、硫磺肠球菌、E.asini群Ⅴ：鸽肠球菌、黄色肠球菌临床常见肠球菌的鉴别粪肠球菌与屎肠球菌的鉴别表细菌阿拉伯糖亚硝酸盐丙酮酸盐粪肠球菌-++屎肠球菌+--尿液、脓液等血液葡萄糖肉汤增菌直接血平板（5%CO2）涂片分离培养（45℃可生长）可疑菌落药敏试验PYR(+)、6.5%NaCL生长（+）G+C触酶－胆汁七叶苷试验（+）血清学鉴定为D群肠球菌属细菌各种生化代谢鉴定到种微生物学检查氨基糖苷类抗生素高水平耐药肠球菌的检测：（high-levelaminoglycosideresistance，HLAR）培养基：MH琼脂菌液浓度：0.5麦氏单位孵育时间：16—18h药敏纸片：庆大霉素（120ug/片）链霉素（300ug/片）结果：6mm=HLAR，7-9mm不确定，≥10mm敏感意义：不可用常规青霉素＋氨基糖苷类抗生素联合治疗肠球菌的抗生素敏感试验抗生素的选择：A组：青霉素或氨苄青霉素B组：万古霉素、利奈唑胺、奎奴普丁/达福普丁C组：庆大霉素、链霉素U组：环丙沙星、诺氟沙星、四环素肠球菌天然耐药的抗生素：复方磺胺增效剂（SMZ-TMP）、头孢菌素类、氨基糖苷类（常规剂量）、头霉素类、氯洁霉素、苯唑西林、林可霉素等。奈瑟菌属和莫拉菌属(NeisseriaandMoraxella)分类奈瑟菌属和莫拉菌属属于奈瑟菌科。脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和卡他莫拉菌是主要致病菌。淋病奈瑟菌(N.gonorrhoeae)淋病是淋病奈瑟菌引起的各种化脓性感染，是一种经典的常见的性传播疾病。淋球菌的原发性感染部位主要为男性尿道或女性宫颈管内膜，引起泌尿生殖道的化脓性炎症。淋病奈瑟菌致病性人类是淋病奈瑟菌的唯一天然宿主传播方式：成人---性接触初生婴儿---患病母亲产道感染致病物质：菌毛、外膜蛋白、脂多糖、IgA蛋白酶淋球菌————柱状上皮细胞表面———大量繁殖——细胞裂解———粘膜下层—中性粒细胞聚集吞噬——急性炎症反应—局部充血水肿——粘膜糜烂、脱落——尿道脓性分泌物——入尿道腺体和隐窝潜伏。借菌毛粘附吞饮入胞逸至部分发病机理所致疾病男性--急性淋菌性尿道炎女性--淋菌性宫颈炎、尿道炎初生婴儿--淋菌性结膜炎发展：男性--后尿道炎、前列腺炎、精囊炎、附睾炎等女性--子宫内膜炎、输卵管炎等淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌形态特征菌体：肾形或咖啡豆状。排列：凹面相对、成对排列特殊结构：幼龄菌可有荚膜及菌毛。染色：革兰阴性。脓液中位于中性粒细胞内。慢性淋病常位于细胞外。淋病奈瑟菌培养特征最适pH7.5。最适温度35-37℃。低于30℃不生长普通培养基上不生长，需用TM培养基需5-10%CO2和湿度的环境。菌落：光滑、凸起、半透明、湿润。TM培养基成分：1、GC基础培养基2、抑菌制：万古霉素、多粘菌素E和制霉菌素。3、增菌剂、血红蛋白溶液培养法是WHO推荐的筛查淋病病人的唯一方法，也是诊断淋病的金标准方法。抵抗力极弱在干燥、高热的环境中极易死亡一般消毒剂或肥皂液均能使其丧失活动力。淋病奈瑟菌培养特征淋病奈瑟菌检验程序标本直接涂片巧克力、TM培养基分离培养（5%CO2）(24-48h)露滴样小菌落药敏试验涂片染色、氧化酶（+）葡（+）、麦（-）果（-）、蔗（-）乳（-）报告标本的采集和运送在取材作涂片时，应先用灭菌盐水洗净尿道口，然后用手指挤出脓液，用棉拭轻轻涂布于载玻片上。从男性病人尿道取材作培养时，应用拭子深入尿道2cm-4cm，旋转取出分泌物。从女性病人的宫颈取材时，应将棉拭插入宫颈口1.5cm，稍转动并停留10s-15s。淋球菌抵抗力很弱，最好床边接种，尽快送检。治疗头孢三嗪（ceftriaxon，菌必治）250mg一次肌注，有合并症者连用10天。壮观霉素（spectinomycin，淋必治）2g，一次肌注，有合并症者连用10天。氟哌酸200mg口服，一日3次共7日；氟嗪酸200mg每日2次口服共7日。脑膜炎奈瑟菌(N.meningitidis)密切接触咳嗽、喷嚏脑膜炎奈瑟菌临床意义60%-70%隐性感染，30%上呼吸道感染和出血点型，典型流脑仅占1%。感染后终生免疫。流行特征:全年发病，以冬春为主，3-4月为高峰。病人带菌者易感人群特别是5岁以下儿童致病物质：内毒素,菌毛是细菌主要致病因素分类：按其夹膜多糖抗原分13个血清群,其中我国A群占95%抵抗力：对外界抵抗力弱，对消毒剂敏感，有自溶酶。脑膜炎奈瑟菌临床意义脑膜炎奈瑟菌临床表现1.潜伏期1-10天，短者仅为数小时，多为2-3天。2.病程前驱期：鼻咽部充血和分泌物增多，咽痛，低热败血症期：突发寒战、高热。伴恶心呕吐、全身不适。皮肤黏膜瘀点，瘀斑等脑膜炎期：剧烈头痛、频繁呕吐、烦躁不安，以及颈项强直等脑膜刺激症状等恢复期：症状缓解病程（暴发型）：起病急骤，病情凶险。如不及时抢救，常在24小时内危及生命3.C群流脑具有易传播、隐性感染比例高等特点，临床上常表现为暴发型。脑膜炎奈瑟菌形态特征菌体：肾形或咖啡豆状。排列：凹面相对、成双排列特殊结构：幼龄菌可有荚膜和菌毛。染色：革兰阴性,有抵抗脱色现象。脑脊液标本中大多位于白细胞内。脑膜炎奈瑟菌培养特征最适温度35-37℃。最适pH7.4-7.6。含血液、血清的培养基上才能生长。专性需氧，需5-10%CO2和湿度环境。血平板或巧克力:光滑、凸起、半透明菌落。微生物检查脑脊液瘀点、穿刺液渗出物、鼻咽分泌物血液离心血平板或巧克力葡萄糖肉汤增菌（5%CO2）（5%CO2）上清沉淀可疑菌落（露滴样）药敏试验检查抗原涂片镜检涂片G-双球菌氧化酶（+）葡（+）、麦（+）果（-）、蔗（-）、乳（-）报告淋脑葡萄糖++麦芽糖-+果糖--蔗糖--乳糖--氧化酶(+)触酶(+)脑膜炎奈瑟菌生化反应淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌鉴别菌种35℃营养琼脂麦芽糖氧化产酸脑膜炎奈瑟菌生长不定+淋病奈瑟菌不生长-卡他莫拉菌临床意义早期认为此菌是人体上呼吸道无致病性的正常寄居菌。近期发现可引起下呼吸道和其它部位感染。年老和免疫力低下的患者易感。卡他莫拉菌形态特征菌体：肾形。排列：成双排列。特殊结构：无鞭毛、无芽胞、无荚膜。染色：革兰阴性,有抗退色倾向。卡他莫拉菌培养特征需氧菌。最适生长温度为35℃，22℃也生长良好。营养要求不高。血平板或巧克力：浅棕色、不透明、光滑而凸起菌落。可用接种环完整推过平板表面。耐受较低温度，耐干燥。卡他莫拉菌生化特征触酶、氧化酶和DNA酶均为阳性。硝酸盐还原试验阳性。水解三丁酸甘油酯。不分解任何糖类。相关种属间的区别奈瑟菌属和卡他莫拉菌及相关菌属的鉴别注：*：延长奈瑟菌延长亚种和硝酸盐还原亚种可为阴性。细菌细菌形态氧化酶触酶葡萄糖奈瑟菌属双球菌/球杆菌++*V卡他莫拉菌双球菌++-金氏菌属球杆菌+-+案例分析一患者，22岁，以寒战、高热、恶心、呕吐、头痛入院，皮肤有小瘀点。2天后出现头痛加重，嗜睡、颈项强直等症状，皮肤、粘膜瘀点融合成瘀斑。血象：白细胞数达22×109/L，中性粒细胞在80%-90%以上。脑脊液（CS）WBC2.29×109/L，以多形核细胞为主；蛋白质2.30g/L；葡萄糖0.1mmol/L。初步诊断？微生物学检查CS涂片可在中性粒细胞内找到革兰阴性双球菌。从病人CS或急性期血液分离到脑膜炎奈瑟菌。从病人急性期血清或尿或CS中检测到脑膜炎奈瑟菌群特异性多糖抗原。以PCR检测到病人急性期血清或CS中脑膜炎奈瑟菌的DNA特异片段。肠球菌属【掌握】1.微生物特性：形态染色、培养特点、生化反应2.微生物检验：检验程序、标本直接检查、分离培养与鉴定【熟悉】肠球菌属的分类、临床意义、标本采集奈瑟菌属和卡他莫拉菌【掌握】1.淋病奈瑟菌及脑膜炎奈瑟菌的微生物特性：形态染色、培养特点、生化反应2.淋病奈瑟菌及脑膜炎奈瑟菌的检验程序、标本采集、标本直接检查、分离培养与鉴定3.淋病奈瑟菌及脑膜炎奈瑟菌的临床意义【熟悉】1.奈瑟菌属和莫拉菌属的分类思考题1.关于淋球菌不正确的说法是A人是唯一的自然宿主B有菌毛的菌有毒力C抵抗力弱D感染后可出现无症状带菌者E镜检是确定诊断的依据2．A群链球菌与其它链球菌的主要鉴别试验是A淀粉水解试验B菊糖发酵试验COptochin敏感试验D杆菌肽敏感试验E新生霉素敏感试验3．球菌中能产生自溶酶物质的有A葡萄球菌和肺炎链球菌B脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌C脑膜炎奈瑟菌D肺炎链球菌E肠球菌属思考题4．下列哪个不是肠球菌的特点？AG+球菌，成双或短链排列B普通培养基能生长C6.5%NaCl肉汤生长D40%胆汁培养基生长E只能在血平板上生长5．下列哪种细菌不产生溶血毒素？A金黄色葡萄球菌B乙型链球菌C肺炎链球菌D淋球菌E铜绿假单胞菌1.淋病奈瑟菌可引起哪些疾病？如何从脓性分泌物中检测出该菌？2.脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌生物学特性的有何不同？3.试述肠球菌属不同于链球菌属的生化反应特征。KEYPOINT1.Membersofcocciaredividedintogram-positivecocciandgram-negativecoccibyGramstain.Staphyloccus,StreptococcusandEnterococcusbelongtotheformer,whileNeisseriameningitidis,NeisseriagonorrhoeaeandBranhamellacatarrhalisbelongtothelatter.2.Staphyloccusisthestrongestresistantorganismofthenonsporeformingorganisms,andMRS(Methicillin-resistantstaphylococcus)putsachallengetoclinicaltherapy.3.ThemembersofthegenusEnterococcusarecatalase-negativecocci.Theycangrowinmediumcontaining6.5%NaClorinthepresenceofbile-esculin.4.Optochin,bilesolubilityandinulinfermentationarethemainteststodifferentiateS.pneumoniaefromviridansgroupstreptococci.5.Men