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第一章分光光度分析1、紫外光：波长在200~400nm的光。2、人眼能感受到的光的波长400~760nm。3、分光光度分析：利用某些物质的分子吸收200~760nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法，也称为紫外—可见分光光度法。4、光的特性（1）光是一种电磁波，具有波粒二象性。光的波动性可用波长、频率、光速c、波数（cm-1）等参数来描述：=c；波数=1/=/c（2）光是由光子流组成，光子的能量：E=h=hc/（h=6.626×10-34J·Sh---Planck常数)光的波长越短（频率越高），其能量越大。（3）波长/nm400~430430~480480~500500~560560~590590~620620~760颜色紫色蓝色青色绿色黄色橙色红色5．透射比T:描述入射光透过溶液的程度。（T：0~1）6、吸光度A与透光率T的关系:A＝－lgT7、朗伯—比耳定律数学表达式：A＝lg（I0/It)=klcA：吸光度，描述溶液对光的吸收程度；l：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位；c：溶液的浓度，单位g·L-1k：吸光系数，单位L·g-1·cm-1吸光系数k(L·g-1·cm-1）相当于浓度为1g/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。8、摩尔吸光系数A＝lg（I0/It)=εlcc：溶液的物质的量浓度，单位mol·L-1；ε：摩尔吸光系数，单位L·mol-1·cm-1；（1）ε与k的关系为：k=ε/M（M为摩尔质量）（2）摩尔吸光系数ε在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。摩尔吸光系数是物质吸光能力的量度，可作为定性分析的参考。其值越大，方法的灵敏度越高。9、吸收定律的适用条件（1）必须是使用单色光为入射光；（2）溶液为稀溶液；（3）吸收定律能够用于彼此不相互作用的多组分溶液。（4）吸收定律对紫外光、可见光、红外光都适用。10、偏离朗伯—比耳定律的因素（1）单色光不纯引起的偏离朗伯—比尔定律只适用于单色光。（2）介质不均匀引起的偏离朗伯—比尔定律的基本条件是溶液是均匀的、非散射的。（3）与测定溶液有关的因素通常只有在溶液浓度小于0.01mol/L的稀溶液中朗伯—比尔定律才能成立。11、分光光度法的特点（1）灵敏度高下限一般可达10-4-10-7g/mL（2）准确度高相对误差1-3%0IITt（3）操作简便（4）测定快速（5）有一定的选择性（6）仪器简单例题：已知某化合物的相对分子量为251，将此化合物用已醇作溶剂配成浓度为0.150mmol/L溶液，在480nm处用2.00cm吸收池测得透光率为39.8%，求该化合物在上述条件下的摩尔吸光系数和吸光系数。解：已知溶剂浓度c=0.150mmol/L，l=2.00cm,T=0.398,由Lambert-Beer定律得：ε（480nm）=A/cl=-lg0.398/0.150×10-3×2.00=1.33×103(L·mol-1·cm-1)由ε=kM,得K=ε/M=ε/251=5.30(L·g-1·cm-1)12、分光光度分析的样品前处理固体样品：干法消化、湿法消化、溶剂萃取液体样品：消除干扰物质（离子）13、分光光度分析的条件选择包括试样浓度、测定波长、显色条件、温度、pH及参比溶液等。（1）试样浓度的选择试样浓度应控制在使其吸光度在0.20～0.70（相当于透光率为您65%～20%）之间。试样浓度控制在吸光度为0.434时，测量仪器测量误差最小。当试样浓度控制在吸光度为0.20～0.70范围时，仪器测量误差小于2%。（2）显色条件的选择显色反应:被测组分和某种试剂反应后生成有色物质的反应。显色反应的灵敏度用摩尔吸收系数ε表示。ε105：超高灵敏；(6～10）×104：高灵敏；2×104：不灵敏。显色剂的选择:灵敏度高---εmax最大；选择性好---显色剂只与被测物质反应。有色化合物组成固定---有定量关系。显色产物稳定---便于测定。14、干扰离子的影响及清除方法（1）控制酸度（2）加入掩蔽剂选择掩蔽剂的原则是：掩蔽剂不与待测组分反应；掩蔽剂本身及掩蔽剂与干扰组分的反应产物不干扰待测组分的测定。（3）选择合适的条件（浓度、波长）（4）分离干扰离子15、分光光度计的基本构造和使用流程（1）基本构造：光源、单色器、吸收池、检测器、显示①光源：有热辐射光源和气体放电光源两类要求：在可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在350～1250nm。它是比色计和分光光度计的光源。紫外区：氢、氘灯。发射150～400nm的连续光谱。它是紫外分光光度计的光源。②单色器：单色器是能从光源辐射的复合光中分出单色光的光学装置。主要功能：产生光谱纯度高的光波且波长在紫外可见区域内任意可调。通常由准直镜（聚光镜）、色散元件、狭缝组成。常用的色散元件有棱镜和光栅两种。棱镜——对不同波长的光折射率不同分出光波长（不等距）。光栅——衍射和干涉分出光波长（等距）。③吸收池：样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。玻璃——能吸收UV光，仅适用于可见光区。石英——不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区。要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致）④检测器：将光信号转变为电信号的装置。常用的有光电池、光电管（红敏和蓝敏）、光电倍增管、二极管阵列检测器。⑤信号指示系统（检流计、数字显示或自动记录装置）（2）仪器使用基本流程①检查仪器停止状态②接通电源，打开仪器开关③调节波长，稳定约20min④仪器调零和调满⑤选择合适的吸收池、参比溶液⑥试样放入⑦测量、读数、记录⑧关机16、分光光度计类型（1）简易分光光度计：721型分光光度计；722型分光光度计（2）紫外-可见分光光度计17、分光光度分析方法（1）定性分析方法（2）定量分析方法：标准曲线法、比较法、增量法（标准加入法）、示差法标准曲线法：此法适合所测吸光度皆在0.2-0.7范围内的有色溶液。比较法：此法适用于所测溶液浓度与标准溶液浓度相近时。增量法：此法的优点是自动扣除背景吸收。示差法：此法适合组分含量高的有色溶液。18、数据处理----线性回归分析法简介（1）标准曲线回归法：使用最小二乘法确定的直线称为回归线，表达式为：y=ax+b（2）相关系数相关系数（r）表示数据与直线之间的符合程度。若r=1，则表示所有数据点都完全落在这条直线上；实际测定中，要求r≥0.9970。第二章原子吸收光谱分析法(AAS)1、概念：利用物质的气态原子对特定波长的光的吸收来进行分析的方法---原子吸收光谱分析法。2、原子吸收法的优点：(1)检出限低，10-10～10-14g；(2)准确度高，1%～5%；(3)选择性高，一般情况下共存元素不干扰；(4)应用广，可测定70多个元素（各种样品中）；局限性：难熔元素、非金属元素测定困难、不能进行同时多元素测定。3、原子吸收分析的基本要求（1）样品需气化，使被测定元素由化合物状态变为基态。（2）原子吸收谱线必须是锐线光谱，使用锐线光源。4、原子吸收分析的定量依据：朗伯定律A=k’CL5、原子吸收光谱分析的试样制备和预处理（1）取样：要求样品要有代表性。（2）样品预处理：转化为可测状态（溶液）。6、原子吸收分光光度计的基本结构∑∑12__1____)())(x(niiniiixxyyxaxaynxaybniniii__11__∑∑niniiiniiiniiniiyyxxyyxxyyxxar112_2_1__12_12_)()())(()()(原子吸收分光光度计由光源、原子化系统、分光系统及检测显示系统四个部分构成。光源光源应满足的条件：（1）能辐射出宽度比吸收线宽度还窄的谱线，并且发射线的中心频率应与吸收线的中心频率相同。（2）辐射的强度大而稳定，且背景低、噪声小。（3）光源的使用寿命长。空心阴极灯和无极放电灯基本能满足上述要求。原子化系统原子化器是将样品中的待测组份转化为基态原子的装置。（1）火焰原子化器（2）无火焰原子化装置：主要有电热高温石墨管原子化法和化学原子化法。石墨炉原子化器与火焰原子化器比较有如下优点：1）原子化效率高，可达到90%以上，而后者只有10%左右。2）绝对灵敏度高（可达到10-12～10-14），试样用量少。适合于低含量及痕量组分的测定。3）温度高，在惰性气氛中进行且有还原性C存在，有利于易形成难离解氧化物的元素的离解和原子化。单色器一般用光栅来进行分光，将待测元素的共振线与相邻谱线分开，减少背景干扰。狭缝宽度一般在0.01-2nm之间，可保证经过光栅分光后的谱线有足够的区分度。检测系统检测系统包括检测器、放大器、对数转换器、显示器几部分（1）检测器的作用是将单色器分出的光信号转换为电信号，由光电倍增管实现这一转换。（2）放大器的作用是将光电倍增管输出的电信号放大，信号太弱，造成的误差较大。要求有一定的增益（放大倍数）和良好的稳定性。（3）对数转换器的作用是将光强度与浓度的指数关系转化出成线性关系，使读数（刻度）均匀，减小读数误差。（4）显示装置的作用是显示吸光度的读数，便于计算和保存、管理数据。7、原子吸收分光光度计的类型简介（1）单道单光束原子吸收分光光度计特点：结构简单、体积小、价格便宜、操作方便。不能消除光源波动的影响，读数闪烁，基线漂移。（2）单道双光束原子吸收分光光度计特点：能得到稳定的测量输出信号。无法消除火焰扰动和背景吸收的影响。8、原子吸收光谱分析条件的选择（1）分析线波长的选择一般选用最灵敏线作分析线，若最灵敏线附近有其他干扰线，可选择次灵敏线。（2）空心阴极灯工作电流的选择保正稳定和适当光强度输出的条件下，尽量选用较低的工作电流。一般，通过实验方法绘制吸光度-灯电流关系曲线，可选择有最大吸光度时的最小灯电流。（3）狭缝宽度的选择由于原子吸收光谱法谱线的重叠较少，一般可用较宽的狭缝，以增强光的强度。但当存在谱线干扰和背景吸收较大时，则宜选用较小的狭缝宽度。（4）原子化条件的选择1）火焰的选择火焰法主要是选择适当的火焰。对于分析线在200nm以下的元素，不宜选用乙炔火焰。对于易电离的元素，宜选用低温火焰。而对于易生成难离解化合物的元素，则宜选用高温火焰。2）进样量的选择一般以3-6ml/min为宜，进样量太小，会造成原子蒸汽浓度小，吸收信号较弱，灵敏度低，不便检测。实际进样量应根据吸光度值调整，使吸光度值的范围在0.2-0.7之间。3）燃烧器高度的选择对于不同的元素，自由原子的浓度随火焰高度的分布是不同的。所以测定时，应调节其高度使光束从原子浓度最大处通过。4）无火焰原子化条件的选择石墨炉法则应选择合适的干燥、灰化和原子化温度。9、原子吸收光谱分析干扰及其消除方法（1）物理干扰及其消除方法物理干扰是指试样在转移、蒸发和原子化过程中由于试样任何物理因素（试液的粘度、表面张力、蒸汽压、溶剂）的变化而引起的吸光度下降的效应。一般引起负偏差。消减方法：1）配制与被测溶液组成相似的溶液（很难做到）2）采用标准加入法3）适当稀释样品或使用有机溶剂改善溶液表面张力4）确定合适的抽吸量。（2）化学干扰及其消除方法化学干扰是指在溶液中或气相中由于待测元素与其它组分之间的化学作用而引起的干扰，影响被测元素的解离和原子化，一般引起负偏差。消减方法：1）加入释放剂：在测定时加入一种能与干扰组分生成更稳定或更难挥发化合物的试剂，而使待测元素释放出来，从而消除干扰。2）加入保护剂：加入一种能与待测元素生成稳定化合物的试剂，使得待测元素不与干扰组分反应。而生成的化合物又很容易挥发和原子化，对测定不干扰。3）化学分离：将待测组分和干扰组分分离。4）选择合适的原子化方法也可以抑制或避免某些干扰。提高原子化温度，减小化学干扰。使用高温火焰或提高石墨炉原子化温度，可使难离解的化合物分解。采用还原性强的火焰与石墨炉原子化法，可使难离解的氧化物还原、分解。（3）电离干