组织学与胚胎学第一章组织学绪论一、研究内容和意义组织学:是研究机体微细结构和相关功能的科学。研究内容:细胞、组织、器官和系统几部分,又称显微解剖学。细胞(cell-C)组织(tissue)器官(organ)系统(system)1.细胞C膜、C质、C核是人体结构和功能的最小单位光学显微镜(lightmicroscope-LM)即可观察到。细胞膜细胞核细胞质卵细胞神经C-神经元神经节C、神经胶质C(1)透射电镜(EM):观察C内部更细微的结构,即超微结构。(2)扫描电镜观察组织C的表面立体结构。2.组织:结构相同或相似的C群及C外基质构成。四大基本组织:上皮组织结缔组织肌组织神经组织3.器官:不同的组织按一定的比例、数量及方式组合成器官。系统:若干功能相关的器官构成系统。细胞组织器官系统}}组织学各论组织学总论苏木精-伊红染色法苏木精:碱性染料,使C核内的染色质及C质内的核糖体染成紫蓝色。伊红:酸性染料,C质和C外基质中的成分染成红色。最常用的组织切片染色法-HE染色嗜碱性:对于碱性染料亲和力强的性质。可被苏木精染成紫蓝色。嗜酸性:对于酸性染料亲和力强的性质。可被伊红染成红色。中性:对于两种染料亲和力都不强的性质,HE染色着色淡。组织结构的嗜色性C超微结构模式图•电镜:“两暗夹一明”C膜:•单位膜细胞膜1.光学显微镜(光镜)的发明Lightmicroscope(LM)2.细胞学说的提出和组织学的建立3.电子显微镜(电镜)的发明和超微结构的发现Electronmicroscope(EM)4.当代组织学二.组织学的发展简史和当代组织学1.对组织学内容的审视角度2.注意形态与功能的统一3.注意培养观察与空间思维的能力三.组织学的学习方法(一)光镜技术1.石蜡切片术①取材和固定;②脱水和包埋;③切片和染色;④封片。四.组织学技术简介其他切片技术:火棉胶包埋,冰冻切片,涂片,铺片,磨片。其他染色法:硝酸银→神经细胞(黑)。1.透射电镜电子密度高:当电子束投射到密度大吸附重金属多的结构时,电子被散射的多,因此,射落到荧光屏上的电子少而呈暗像,电镜照片呈黑或深灰色,称为电子密度高。反之称为电子密度低。(二)电镜技术2.扫描电镜观察组织C的表面立体结构。组织化学术:为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学原理和技术,与组织学技术相结合而产生的技术,能在组织切片定性、定位、定量地显示某种物质的存在与否以及分布状态。细胞化学术:前述技术用于游离细胞样品则称为~(cytochemistry)。(三)组织化学术1.一般组织化学术基本原理是在切片上添加某种试剂,和组织中待测反应物发生反应,其终产物或为有色沉淀,以用光镜观察,或为重金属沉淀以用电镜观察。(1)糖类:PAS反应,pariodicacidSchiffreaction(2)脂类:油红、尼罗蓝及苏丹类染料(3)核酸:福而根反应→DNA;甲基绿-派若宁反应→DNA绿色,RNA红色。(4)酶类:酶组织化学术。通过显示酶的催化活性以表示酶的存在。2.免疫组织化学术immunohistochemistry:是根据抗原与抗体特异性结合的原理,检测组织中肽和蛋白质的技术。肽和蛋白质均具有抗原性,当把人或动物的某种蛋白质作为抗原注入另一种动物,其体内则会产生针对该抗原的特异性抗体。将抗体从动物血清中提出后,与标记物相结合,即成为标记抗体。用标记抗体与组织切片孵育,抗体则与组织中相应抗原特异性结合在显微镜下通过观察标记物而获知肽或蛋白质的分布部位。常用的标记物有荧光素,辣根过氧化物酶、胶体金。3.原位杂交技术即核酸分子杂交组织化学术。其原理为用带有标记物的已知碱基序列的核酸探针,与细胞内待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性原位结合,即杂交。然后,通过对标记物的显示和检测而获得待测核酸的有无及相对量。常用的标记物有放射性核素(35S,32P,3H等)和地高辛。(四)放射自显影技术(五)图象分析术(六)细胞培养术和组织工程