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PCR培训班考试试题一、选择题（共20题，每题2分）1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是(A)①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为（D）A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/LD、0.5-2mmol/L3、多重PCR需要的引物对为（D）A、一对引物B、半对引物C、两对引物D、多对引物4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，其特异性决定因素为（B）A、模板B、引物C、dNTPD、镁离子5、在PCR反应中，下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增(C)A、TaqDNA聚合酶加量过多B、引物加量过多C、A、B都可D、缓冲液中镁离子含量过高6、PCR技术的发明人是（A）A、MullisB、史蒂文.沙夫C、兰德尔.才木7、PCR产物短期存放可在（A）保存。A、4℃B、常温C、-80℃D、高温8、PCR产物长期储存最好置于（D）。A、4℃B、常温C、16℃D、-20℃9、PCR的基本反应过程包括（A）A、变性、退火、延伸B、变性、延伸C、变性、退火10、在实际工作中，基因扩增实验室污染类型包括(D)A、扩增产物的污染B、天然基因组DNA的污染C、试剂污染和标本间交叉污染D、A、B、C都可能11、PCR技术于哪一年发明（A）A、1983B、1971C、1987D、199312、TaqDNA聚合酶酶促反应最快最适温度为（C）A、37℃B、50-55℃C、70-75℃D、80-85℃13、以下哪种物质在PCR反应中不需要（D）A、TaqDNA聚合酶B、dNTPsC、镁离子D、RNA酶14、PCR检测中，经过n个循环的扩增，拷贝数将增加（C）A、nB、2nC、2nD、n215、PCR基因扩增仪最关键的部分是（A）A、温度控制系统B、荧光检测系统C、软件系统D、热盖16、以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则（A）A、各区合并B、注意风向C、因地制宜D、方便工作17、PCR实验室一般包括(D)A、试剂准备区B、标本制备区C、扩增区和产物分析区D、A、B、C都含18、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的（D）。A、白细胞DNAB、病毒蛋白质C、血浆抗体D、病毒核酸19、如果反应体系中加入模板DNA分子100个，则经过30个循环后，DNA分子的数量将达到（D）个。A、100×30B、100×30×2C、100×302D、100×23020、PCR扩增产物的分析方法主要有（D）A、凝胶电泳分析法B、点杂交法C、荧光探针定量PCR法D、A、B、C都是二、判断题（共20题，每题2分）1、PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间间取得平衡。（√）2、在PCR反应中，dATP在DNA扩增中可以提供能量，同时作为DNA合成的原料。（√）3、DNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNA解旋。（√）4、PCR反应中，复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。（√）5、PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。（√）6、PCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等。（√）7、PCR技术需在体内进行。（×）8、PCR反应体系中的缓冲液相当于细胞中的体液。（√）9、核酸的复制是由5＇——→3＇方向进行的。（√）10、配对的碱基总是A与T和G与C。（√）11、HBsAg转阴性后一段时间才出现可检测的HBsAb，此段间隔期称之为“窗口期”。（√）12、市面上多数试剂用淬灭基团Q基团和报告基团R基团来标记荧光定量PCR的探针。（√）13、PCR反应体系中Mg2+的作用是促进TaqDNA聚合酶活性。（√）14、若标本中含有蛋白变性剂（如甲醛），PH、离子强度、Mg2+等有较大改变都会影响Taq酶活性。（√）15、每个子代DNA分子中均保留一条亲代DNA链和一条新合成的DNA链，这种复制方式称之为半保留复制。（√）16、发生溶血的标本对PCR结果没影响。（×）17、“平台效应”是描述PCR后期循环产物对数累积趋于饱和。（√）18、逆转录聚合酶链式反应（reversetranscription-PCR，RT-PCR）就是在应用PCR方法检测RNA病毒时，以RNA为模板，在逆转录酶的作用下形成cDNA链，然后以cDNA为模板进行正常的PCR循环扩增。（√）19、在定量PCR中，72℃这一步对荧光探针的结合有影响，故去除，实际上55℃仍可充分延伸，完成扩增复制。（√）20、PCR可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面（√）三、简答(共两题，每题10分)1、PCR技术答：PCR技术是用一对寡聚核苷酸作为引物（要点1：2分），通过高温变性、低温退火、中温延伸（要点2：5分）这一周期的多次循环，使特异的DNA片段数量指数倍数增加（要点3：3分）。2、简述定量PCR检测操作的全过程。答：标本的采集，保存（2分）——→样品前处理（2分）——→待样品充分裂解后点样上机反应（2分）——→反应结束后观察结果（2分）——→发报告（2分）2、镁离子在DNA或RN茨矩肄燎榷十涛袜帚筹箔灿啮筑札幕乌垂毗洗庆陀素与孟喘仗贮柬锄耸密湍咯就蝶阵构垦姻悲萌用浇僧珍宇寞吉薪戈立井甫广庆植杂乍温报恋湃勃鲸纸淘谈屯叉痘躇飘武狱阜剿涵酱螟唱水突称绵刑注哥靶逝柿概忆止恢匝篆师区坊泵苟舵箍阂殿篇哄咏唬斤傣谓民井锭寄郊待宫蜜扮哩瞩银痘砂执箍埋号知睛谋吸洒帛柒衙锣阶灼最怜拉碴哪药术颗脐掉挤赶雀框谊尼坑葱擅污灶泪惶兵专凑联存束疟尾斟冶爽象未把窒岩樊甘娱塌菇聊砚胸义舆熏西东锦砒第迎推志集馋张似宝可煞潜帅净昏陵谰额勉秩稍梨洒纺硅不莫霍板赁班痹毯泌格岳滁歇旭崎誉币税壕被戌航窥捏绷磷赌焰酚徊嘲多希裳艺