微生物的利用PPT课件11-浙科版

选修一生物技术实践微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版专题一微生物的利用微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版最新考纲热点提示1.微生物的分离与培养2．某种微生物数量的测定3．培养基对微生物的选择作用4．利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用。1.培养基的种类、营养要求及配制原则2．无菌技术的具体操作及应用3．运用相关技术解决微生物的分离与培养等实际问题微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版1．培养基的概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其生长繁殖的。2．培养基的成分：一般都含有水、(提供碳元素的物质)、(提供氮元素的物质)和无机盐。还需要满足微生物生长对、特殊营养物质以及的要求。①营养物质②营养基质③碳源④氮源⑤pH⑥氧气微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版1：为什么倒平板后等平板冷却后要将平板倒置？提示：将平板倒置的目的是防止培养皿盖上的水珠滴落到平板上造成污染。微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版稀释涂布平板法测定微生物的生长情况及应用可在培养物生长的不同阶段用稀释涂布平板法进行测定。将培养物进行一系列稀释并接种到平板培养，统计培养后平板上的菌落数，就可以计算出原培养物的密度。平板上的菌落应该是彼此分散开的，菌落数最好在30～300个。微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版计算公式：每毫升的细菌数＝平板上的菌落数×样品的稀释倍数(注：平板上的菌落来自1mL稀释液)举例：稀释1000倍的平板上有38个菌落，原培养物含有：38×1000＝3.8×104个细菌细胞/mL。稀释涂布平板法广泛应用于微生物学的研究。这种技术只统计活菌数，而且需要培养一段时间形成菌落后才能计数。因此，这种方法不宜用于某些食品工业的质量控制，因为有些食品如牛奶易腐败变质，不宜延搁这么长的时间。这时可使用直接的方法，如使用显微镜直接统计细胞的数目。微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版1．含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。2．关键：。⑦防止外来杂菌的入侵微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版3．措施微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤：计算→→溶化→→倒平板。2．纯化大肠杆菌的原理：在培养基上将聚集的菌种稀释分散成单个细胞，形成单个菌落，此菌落是由一个细胞繁殖而来的子细胞群体。⑰称量⑱灭菌微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版3．接种技术——平板划线法和稀释涂布平板法(1)平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。(2)稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面。⑲连续划线⑳梯度稀释微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版2：平板划线法为什么要把第一次以后的每一次划线的起点放在上一次划线的末端？提示：目的是使每一次划线后菌体数目减少，培养之后形成的菌落是由单个菌体繁殖而成。微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版小贴士微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版1．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)菌种筛选：使用是唯一氮源的选择培养基培养。(2)统计菌落数目：常用方法有、显微镜直接计数法。(3)设置对照：指设置除了以外，其他条件都相同的实验，目的是排除实验组中对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。(4)实验流程：土壤取样→制备→微生物的培养与观察→细菌的计数。尿素稀释涂布平板法被测试的条件非测试因素培养基微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版2．分解纤维素的微生物的分离(1)纤维素酶的组成：是一种复合酶，至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和酶。(2)纤维素酶的作用(3)筛选方法：刚果红染色法，即通过是否产生来筛选纤维素分解菌。葡萄糖苷透明圈微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版(4)实验操作步骤微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版1．培养基的种类(1)按物理性质分类培养基种类特点用途液体培养基不加凝固剂工业生产固体培养基加凝固剂(如琼脂)微生物分离、鉴定，活菌计数，菌种保藏微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版(2)按功能分类种类制备方法原理用途举例选择培养基培养基中加入某些化学物质依据某些微生物对某些物质的抗性而设计从众多微生物中分离所需的微生物加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌鉴别培养基培养基中加入某种指示剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计鉴别不同种类的微生物伊红—美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版2.培养基的配制原则(1)目的要明确：根据微生物的种类、培养目的选择不同的原料配制培养基。(2)营养要协调：配制培养基时要注意各营养物质的浓度和比例、pH要适宜。微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版3．平板划线操作的注意事项(1)第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。(2)灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。(3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。(4)划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版平板划线法几次灼烧灭菌的目的比较第一次操作每次划线之前划线结束目的杀死接种环上原有的微生物，避免污染培养物杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，使每次划线菌种数目减少杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是()A.操作前不用做任何处理B.划线操作须在火焰上进行C.在5区域中才可以得到所需菌落D.在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版[解析]每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目减少，以便得到菌落。划线后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。[答案]D微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版1．筛选原理配制选择培养基，把尿素作为培养基中的唯一氮源，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长，其他微生物则不能在此培养基上生长。微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版2．统计菌落数目(1)理论依据：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。(2)计算方法：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数；V代表涂布平板时所用稀释液的体积(mL)；M代表稀释倍数。微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版(3)统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。(4)为使结果接近真实值，要设置重复组，取其平均值。可将同一稀释度的样品接种到三个或三个以上的平板上，经涂布、培养计算出菌落平均数。3．设置对照可排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版4．实验流程(1)以尿素为唯一氮源的培养基作为实验组，制备牛肉膏蛋白胨培养基作为对照组，用来判断选择培养基是否具有选择作用。(2)以培养基加土壤样品进行培养为实验组，培养基不加土壤样品进行培养为对照组，判断培养基是否被污染。微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版5．课题延伸由于分离分解尿素的细菌的选择培养基上可能生长着以尿素分解菌代谢产物为氮源的其他微生物，因此还需借助生物化学方法对分离细菌作进一步鉴定。(1)原理：细菌合成的脲酶将尿素分解成NH3，使培养基碱性增强，pH升高，因此，可通过检测pH的变化来判断该化学反应是否发生。(2)方法：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌，若pH升高，则指示剂变红，说明该种菌能分解尿素。微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版下表为两种微生物的培养基配方A组KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素琼脂1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版B组纤维素粉NaNO3Na2HPO4·7H2OKH2PO4MgSO4·7H2OKCl酵母膏水解酪素5g1g1.2g0.9g0.5g0.5g0.5g0.5g微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版上述两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容至1000mL。(1)如果要对土壤中分解尿素的细菌进行分离，则需要选择上述哪种培养基？________，该培养基中的碳源是________，能分离尿素分解菌的原因是______________________。(2)在分离尿素分解菌所用的培养基中可加入________指示剂，根据指示剂的颜色可鉴定某种细菌能否分解尿素，若有分解尿素的细菌，培养基将会呈现________。(3)从功能上来看，上述两种培养基均属于________培养基；从物理性质来看，A属于________培养基。微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版[思路点拨][解析]培养基A中，氮源只有尿素，所以只有能分解尿素的微生物才能从中获得氮源，分解尿素的细菌在分解尿素过程中产生氨，会使pH升高，酚红指示剂变红。因为培养基A中有凝固剂——琼脂，所以属于固体培养基。培养基B中，纤维素是唯一的碳源，所以也属于选择培养基。[答案](1)培养基A葡萄糖培养基中尿素为唯一氮源，只有能分解尿素的微生物才能生长繁殖(2)酚红红色(3)选择固体微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版1．筛选原理即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版2．实验流程土壤取样：富含纤维素的环境↓选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌数量↓梯度稀释↓涂布平板：将样品涂布于鉴别培养基上↓挑选产生透明圈的菌落微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版3．两种常用刚果红(CR)染色法的比较方法先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应在倒平板时就加入刚果红过程培养基长出菌落―→覆盖CR溶液(质量浓度为1mg/mL)――→10～15min倒配制CR溶液(质量浓度为10mg/mL)―→灭菌―→按照1mLCR溶液微生物的利用PPT课件11浙科版微生物的利用PPT课件11浙科版优点显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作简便，不存在菌落的混杂问题缺点操作繁琐，加入刚果红会使菌落之间发生混杂①由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含淀粉类物质，可能使产生淀粉酶的微生物也形成透明圈，即假阳性反应②有些微生物能力，它们在长时间