岛津LC-2010A型高效液相色谱仪操作规程

岛津LC-2010A型高效液相色谱仪操作规程1．环境要求温度应相对稳定，一般应控制在15～25ºC，室内保持恒温。相对湿度最好为50～70%。2．开机准备2222．1检查仪器的使用登记记录，了解前一次的使用情况是否处于正常状态。上机操作人员需认真阅读过本标准操作程序，并经上机前操作培训。2222．2本机应处于正常状态，且在计量认证的有效期限内。2222．3仪器超过一年必须送计量部门或有资格的单位复检，合格后方可使用。3．操作步骤3．1使用者必须了解仪器的工作原理，熟知注意事项，在掌握基本操作后，才能上机。3．2操作前的准备3．2．1流动相的制备用高纯度的试剂配制流动相，必要时照紫外分光光度法进行溶剂检查，应符合要求；水应为新鲜制备的超纯水，可用超级纯水器制得或用重蒸馏水。凡规定pH值的流动相，应使用精密pH计进行调节。配制好的流动相应通过适宜的0.45um滤膜滤过，用前脱气。应配制足量的流动相及时待用。3．2．2供试溶液的配制供试品用规定溶剂配制成供试溶液。定量测定时，对照品溶液和样品供试溶液均应分别配制2份。供试溶液在注入色谱仪前，一般应经适宜的0.45um滤膜滤过。必要时，在配制供试溶液前，样品需经提取净化，以免对色谱系统产生污染或对色谱干扰。3．2．3检查上次使用记录和仪器状态检查色谱柱是否适用于本次试验，色谱柱进出口位置是否与流动相的流向一致，原保存溶剂与现用流动相能否互溶，流动相的pH值与该色谱柱是否相适应，仪器是否完好，仪器的各开关位置是否处于关断的位置。3．3测定前的准备工作3．3．1111打开LC-2010A及二极管阵列检测器的电源，等待仪器自检通过后，打开电脑，双击桌面LCsolution图标，出现以下界面：3．3．2选择在线系统，出现登陆界面：默认用户名为Admin，点OK后进入在线系统，此时系统自动连接仪器，仪器发出蜂鸣音,表示连接成功，出现在线控制主界面：在线系统（Online）离线系统（Offline）用于编辑方法数据处理3．3．3在仪器控制栏中更改方法，将方法另存后，点击“Download”按钮，发送方法到仪器，点击工具栏中的按钮，将仪器打开，此时进样器、泵、柱温箱、检测器都开始按方法中的设置运行。3．3．4单针进样待基线平衡（按按钮可将基线归零，等同于“Balance”）及信号采集窗口左上角出现绿色的“Ready”标志后，选择功能选择栏中的项，点击[Single信号采集窗口仪器控制栏仪器状态显示功能选择栏工具栏Strat]图标进入单针进样设置，如下图：所有样品信息输入完毕，检查无误后，点击“OK”就开始进样。3．3．5序列进样选择功能选择栏中的项，点击[Wizard]图标进入序列进样设置向导，出现如下设置界面，按图中标注设置序列参数，完成后点击下一步进入下一界面，最后点击完成，结束向导设置。对照品名称对照品序号数据保存路径及名称不同浓度点数量每一对照品进样数对照品数开始之前清除所有标准曲线自动打印报告自动添加序号样品数量只有待测样品只有对照品待测样品及对照品包括标准品插入用于有关物质及最低检测限测定的样品设置结束，将序列表另存后，点击[BatchStart]图标即可。（在序列运行当中如需要对未运行序列表项目进行修改、添加，可按样品名称样品序号数据保存路径及名称每一样品瓶数每一样品进样数自动打印报告[Pause/Restart]暂停序列，待修改结束后再按一次，序列即可恢复运行）3．3．6数据处理3．3．6．1待进样结束，数据采集完毕后，打开“Postrun”即可编辑数据。界面如下：3．3．6．2如果实验时只记录了紫外检测器的数据，就点击左侧紫外数据分析图标，再按存盘路径找到记录的色谱数据，双击打开。3．3．6．3点击“Analyze”图标，可更改积分参数，修改完毕后，点击“DataReport”即可输出数据报告，将其打印即可。3．3333．7777关机清洗柱子后，在主窗口点击工具栏中的“InstrumentOn/Off”按钮，将仪器关闭，关闭计算机及仪器的电源开关。4．用毕处理4.1清洗柱子。4.2关闭仪器。4.2登记使用记录本。5．注意事项5.1色谱柱与进样器及其出口端与检测器之间应为无死体积连接，以免试样扩散影响分离。5.2新柱或被污染柱用适当溶剂冲洗时，应将其出口端与检测器脱开，避免污染。5.3使用的流动相应与仪器系统的原保存溶剂能互溶，如不互溶，则先取下上次的色谱柱，用异丙醇冲洗过滤，进样器和检测器的流通池也注入异丙醇进行过渡，过渡完毕后，接上相应的色谱柱，换上本次使用的流动相。5.4压力表无压力显示或压力波动时不能进行分析，应检查泵中气泡是否已排除，各连结处有无漏液，排除故障后方能进行操作。如压力升高，甚至自动停泵，应检查柱端有无污染堵塞，可小心卸开柱的进口端螺帽，挖出被污染填冲剂后，补入同类填充剂，仔细安装好，再进行操作。5.5发现记录基线波动，出现毛刺等现象，首先应检查检测器流通池中是否有气泡或污染，如不是流通池引起，可等待氘灯稳定，同时检查仪器的接地是否良好，必要时，换上新的氘灯。仪器稳定后方能进行操作。5.6进样前，色谱柱应用流动相充分冲洗平衡，如系统适用性不符合规定，或填充剂已损坏，则应更换新的同类色谱柱进行分析，由于同类填充剂的化学键合相的键合度及性能等存在一定差异，往往依法操作达不到预定的分离时，可更换另一牌号的同类色谱柱进行试验。5.7以硅胶作载体的化学键合相填充剂的稳定性受流动相pH值的影响，使用时，应详细参阅该柱的说明书，在规定的pH值范围内选用流动相，一般pH值范围为(2.5～7.5)。使用高pH值流动相时，可在泵与进样器之间连接硅胶短柱，以饱和流动相，保护分析柱，并尽可能缩短在高pH值下的使用时间，用后立即冲洗。5.8各色谱柱的使用应予登记，应包括本次测试样品及柱中的保存溶剂。色谱流路系统，从泵、进样器、色谱柱、到检测器流通池，在分析完毕后，均应按充分冲洗，特别是用过含盐流动相的，更应注意先用水，再用甲醇—水，充分冲洗。如发现泵漏液等较严重的情况，应请有经验的维修人员进行检查，维修。6．维护与保养6.1仪器应按计量部门规定定时检定，并有专人保管，负责维护保养。6.2经常保持仪器清洁，请使用中性洗涤剂或无水乙醇浸湿的棉花擦洗。注意，不要让液体渗到仪器内部。擦完后，再用一块干燥的棉花擦干。6.3仪器不能随意移动。