原料乳中硫氰酸盐定量检测方法

内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司编号：Q/MN-JS/JS22.2-8-2010-0原料乳中硫氰酸盐定量检测方法作业指导书起草人：王丹慧审核人：李梅审批人：宋晓东(代)文件实施日期：20100301内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司技术中心质量监察部发布2原料乳中硫氰酸盐定量检测作业指导书1目的为确保检验结果准确，同时统一操作方法，特制定本作业指导书。2适用范围本方法适用于技术中心分析中心、质量一、二中心、质量监察部。本标准规定了生鲜牛乳中硫氰酸盐定量检测方法。本标准适用于生鲜牛乳中掺假的测定。3换版说明本文件对实施日期2009年5月18日的编号为Q/MN-JS-FX/JS22.2-2-2009-2的《原料乳中硫氰酸盐定量检测方法作业指导书》进行了修改，自本文件实施之日起，编号为Q/MN-JS-FX/JS22.2-2-2009-2的《原料乳中硫氰酸盐定量检测方法作业指导书》作废。本文件对原文件的如下内容进行了修改：（1）对标准曲线和结果计算进行了修改；（2）增加了精密度要求。4原理牛奶经过沉淀滤除去蛋白等干扰物质，滤液中的硫氰酸根遇铁盐反应生成血红色的硫氰酸铁，通过分光光度计在450nm下测其吸光值，从而测定原料乳中含有硫氰酸盐（以硫氰酸根含量计）的含量。5试剂配制5.1三氯乙酸溶液（200g/L）称取20.0g三氯乙酸，以蒸馏水或纯净水溶解定容100ml。5.2硫氰酸根标准溶液（1000mg/L）精确称取硫氰酸根1.000g（如称取1.418g硫氰酸钠（分析纯，纯度≥98.5%）等），以蒸馏水或纯净水溶解至1L（冷藏保3存)。5.3硝酸铁溶液（16g/L）称取硝酸铁1.6g，以蒸馏水或纯净水溶解定容100ml。6仪器设备分光光度计（包含450nm波长）。7样品的测定7.1样品处理具体处理如下：（1）20ml样品于三角瓶中，加5ml三氯乙酸溶液，边加边混，混合均匀后静置20min；（2）用定量滤纸过滤于干净干燥的三角瓶中，取过滤后的乳清液4mL于干净干燥的试管中，加入2mL硝酸铁溶液，混匀；（3）以水溶液4mL直接加2mL硝酸铁溶液，混匀做空白。7.2比色用10mm比色杯，在450nm测吸光值，以空白调零。通过标准曲线计算出样品中含硫氰酸根浓度。7.3标准曲线制作使用滤液加显色剂的吸光值与水加显色剂的空白接近（不超过±0.005）的原奶作为本底，制得含有硫氰酸根浓度分别为0mg/L、2mg/L、5mg/L、10mg/L、15mg/L、20mg/L、30mg/L的梯度样液。按照7.1的（1）和（2）、7.2步骤操作。以标准溶液添加量为横坐标，以吸光值为纵坐标，绘制标准曲线（一次曲线，截距不设置为零，R2≥0.999）。第一次制作曲线时要选取符合要求的原奶做本底，以后制作曲线时，随机选取用前一次曲线计算值在2mg/L之内的原奶做本底即可，绘制曲线时各浓度点的吸光值需要减去原奶本底的吸光值后作为曲线纵坐标。7.4结果计算将样液测得吸光值代入曲线方程，直接计算出样品的硫氰酸4根浓度，以硫氰酸根浓度计，记算结果保留至小数点后两位。8检出限本方法检出限为1.0mg/L。9精密度在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算数平均值的20%。