白血病免疫分型

白血病/淋巴瘤免疫分型临检血液蒋能刚应用目的：确定淋巴系病变的起源和分化程度；鉴别反应性与克隆性淋巴细胞增生性疾病；确定髓系白血病各亚型；对形态学分类不明细胞进行定性；诊断急性未分化型白血病；诊断急性混合细胞白血病；诊断微小残留白血病或白血病浸润；判断白血病/淋巴瘤预后。流式细胞术(FlowCytometry):对高速流过检测区的单个细胞或生物颗粒进行多参数、快速分析（或分选）的一种技术。数据显示方式：单参数直方图双参数二维点图等高图二维密度图三维图单参数直方图双参数点图荧光素FITC(异硫氰酸荧光素）：530nm（绿）PE（藻红蛋白）：575nm（橙黄）PI(碘化丙啶）：620nm（橙红）PerCP(多甲藻黄素叶绿素蛋白）：675nm（深红）APC(别藻兰蛋白）：660nm（红）检测物：细胞表面、胞浆或胞核抗原性物质CD（clusterofdifferentiation）：1982年起将识别同一分化抗原的来自不同实验室的单克隆抗体归为一个分化群，并进行流水编号。一个CD相关抗体可包含多个克隆号。其他非CD系列抗原：如TCR、HLA等正常血细胞中的抗原表达特点‫1.系列保守性‫2.时序性‫3.抗原表达量的模式化干细胞嗜碱性细胞嗜酸性细胞定向髓系干细胞红系巨核系粒单核系粒系单核系CD36CD71CD235aCD41CD42a/bCD61CD4CD11bCD14CD64HLA-DRCD36CD15CD71CD16(TDTCD7)CD34CD117CD13CD33CD38MPOCD34CD13CD33CD117MPO抗原刺激干细胞早前B前B静止期BPro-BALLPre-BALLCommon-BALLCLL/SLL免疫母细胞浆细胞样淋巴细胞大B细胞淋巴瘤淋巴浆细胞淋巴瘤外套细胞滤泡区母细胞中心母细胞中心细胞边缘带细胞浆细胞套细胞淋巴瘤伯基特淋巴瘤大B细胞淋巴瘤滤泡淋巴瘤边缘带淋巴瘤骨髓瘤TDT+CD34+cCD79a+CD19+CD10±cμ-TDT+CD34+cCD79a+CD19+CD20±CD10+cμ-TDT+CD34±cCD79a+CD19+CD20+CD10±cμ+CD5+CD19+CD20CD22+CD23+sIg+FMC7-CD38CD138CD56cIgCD19-CD45-CD22+CD5-CD10-CD23-CD22+CD10+FMC7+CD23±bcl-2+CD5-CD19+CD20+CD22+CD38+IgM++sIg++CD22+CD10+sIg+CD34-TDT-CD5+CD22+sIg+FMC7+CyclinD1+CD23-CD22+bcl-6+CD10±CD5±CD30±干细胞胸腺Ⅱ期胸腺Ⅰ期TDT+CD34+CD2cCD3CD7CD71TDT+CD34±CD1aCD2cCD3CD7CD4CD8胸腺Ⅲ期TDT+CD2CD3CD5CD7CD4/CD8TCRPrecursor-TALL成熟T细胞各分化群造血细胞在其分化、发育过程中，细胞膜、细胞浆或胞核抗原的有无、表达强弱与血细胞的分化发育阶段密切相关，表现出与细胞系列及其分化程度相关的特性。白血病细胞中的抗原表达特点‫表达模式基本与相应阶段正常细胞相似，还具有以下特点：‫1.跨系表达‫2.时相混乱‫3.抗原表达量的改变免疫分型四种急性白血病单表型急性白血病表达某一个系列抗原为主的急性白血病双表型/双克隆急性白血病未分化型急性白血病各系急性白血病重要抗原指标‫1.急性淋巴细胞白血病(AL)‫敏感性特异性‫B-ALL:‫CD19100%非特异‫cCD79a99%特异‫T-ALL:‫CD7100%非特异‫cCD3100%特异‫2.急性髓细胞白血病(AML)‫表达率特异性‫CD1370%非特异‫CD3370%非特异‫CD11770%特异‫cMPO70%特异错译表达（Ly+AML，My+ALL）：白血病细胞表达非本系细胞抗原标志物，具有预后意义。ALLCD13，CD33t(9;22)AMLCD2+，DR-M3t(15;17)，或RAR+，t(11;17)CD2+，DR+M4Eoinv(16)或t(16;16)CD19+M0t(9:22)多见M2t(8;21)TdT+,CD7+见于M0CD56+M5/M4双表型急性白血病记分系统‫分值B系T系髓系‫2cCD79acCD3cMPO‫CD22TCRαβ‫cIgMTCRγδ‫1CD19CD2CD117‫CD10CD5CD13‫CD20CD8CD33‫0.5TdTTdTCD14‫CD24CD7CD15‫CD64部分慢性B淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型CD5CD10CD19CD22CD23HLA-DRFMC7SIgCD11cCLL+-++/-++-++/-PLL--++-+++-MCL+-/+++-+++-HCL--++-++++FCL-+++-/+++/-+-MZL--++-++++/-LPL--++-/++-/+注：HCLCD103+CD25+部分慢性T淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型CD2CD3CD5CD7CD4CD8CD25CD56CD57T-CLL/PLL+++++/--/+-T-LGL+++/-+/--+--/++NK-LGL+---+/--+-ATL+++-++肝脾γδT细胞淋巴瘤：CD2+CD3+CD7+TCRγδ+CD16+/-CD56+/-CD8-/+CD4-TCRαβ-标本种类：怀疑含有病变细胞的组织或体液，如外周血、骨髓、胸腹水、脑脊液、淋巴结等。标本要求：细胞有活性，最好不要超过48h。光散射特征与细胞形态的关系淋巴单核粒细胞CD45CD45M3正常白血病L1~3,M0~2M6,M7TSSCSSCMM非造血来源细胞CD45在免疫分型中的应用意义原始嗜碱嗜酸正常骨髓AML-M1AML-M2AML-M3AML-M4/M5AML-M6非造血细胞非特异性染色（死亡细胞）ALL分类不明细胞B细胞克隆性结果报告白血病免疫分型其他方法：酶-底物显色荧光显微镜谢谢