RF-5301PC荧光分光光度计验证方案

RF-5301PC荧光分光光度计验证方案（编号：）起草人：部门：起草日期：年月日审核人：、、（验证领导小组）部门：、、审核日期：年月日批准人：部门：批准日期：年月日**公司2012年03月第1页共13页验证目录01.验证项目02.概述03.验证目的04.验证条件05.验证合格标准06.验证范围07.验证人员08.验证内容与方法09.验证数据分析10.验证结论与偏差说明11.再验证12.验证时间安排13.附件第2页共13页1.验证项目RF-5301PC荧光分光光度计验证方案2.概述：2.1RF-5301PC荧光分光光度计：设备编号：QC-016某些物质受到光照射而被激发之后，会发射出比照射波长稍长的光，这种光称为荧光。对于给定物质来说，当激发光的波长和强度固定、液层的厚度固定、溶液的浓度较低时，荧光强度与荧光物质的浓度c有如下关系：F=kc荧光分光光度计就是根据上述原理，对可发射荧光的物质进行定性、定量测量的分析仪器。我公司的荧光分光光度计是于2010年7月购置，其生产厂为日本岛津公司，主要用于铝的检测。2.3技术参数：型号：RF-5301PC电源电压：220V，50HZ体积：长667×宽530×高270mm工作时间：连续工作环境条件：环境温度：15～35℃相对温度：40%～80%电压波动：220V±10%无影响仪器使用的振动和电磁干扰生产厂家：日本岛津公司。3.验证目的按照GMP的要求，需要对该仪器进行安装确认、运行确认、性能确认，以确定目前的实验室环境能否满足该仪器的正常操作和使用，仪器是否具有良好的检测性能，能否满足验证可接受标准和日常分析测试工作的需要。4.验证条件4.1验证前必须对设备所用仪表进行校验，且在有效期内。4.2验证试验过程中所用的标准溶液、空白溶液在使用前必须符合规定。4.3验证试验所用的清洁器具和玻璃容器应按SOP程序清洁并符合要求。第3页共13页5验证合格标准5.1仪器外观及工作环境满足要求5.2波长示值误差限与重复性5.2.1波长示值误差限：优于±2.0nm5.2.2波长重复性：≤1.0nm5.3检出极限：5×10-10g/ml5.4测量线性：r≥0.9955.5荧光光谱峰值强度重复性：≤1.5%5.6稳定性5.6.1在10分钟内零线漂移≤1.5%5.6.2荧光强度示值上限在10分钟内的漂移不超过±1.5%5.7仪器性能满足要求6.验证范围本方案适用于RF-5301PC荧光分光光度计的验证7.验证人员7.1验证人员职责、分工7.1.1确认与验证委员会·负责验证方案的审批；·负责验证数据及结果的审批；·负责验证报告的审批；·负责发放验证证书；·负责再验证周期的确认。7.1.2验证工作小组组长·负责验证方案的制定并组织实施；·负责收集验证、试验记录，并对结果进行分析，起草验证报告,上报确认与验证委员会。7.1.3工程设备部：·负责验证所需仪器、设备的安装、调试及校正；·负责量具的检验及校正。7.1.4质量管理部第4页共13页·负责监督验证的具体实施。7.1.5质量控制实验室·负责验证的准备工作；·负责根据本验证方案的具体实施。7.2验证方案实施单位责任人实施部门责任人签名确认与验证委员会验证工作小组组长工程设备部质量保证室质量控制实验室7.3验证工作小组人员部门姓名部门姓名质量控制实验室质量保证室质量控制实验室工程设备部8.验证内容与方法8.1安装确认8.1.1文件资料的确认下列文件资料是否齐全，是否符合要求序号文件资料存放地1仪器采购订单2原版操作说明书3仪器操作SOP4仪器维护保养SOP5仪器使用记录6仪器维护保养、检修记录结论：检查人：日期：8.1.2售后服务维修单位：联系电话：第5页共13页地址：传真：联系人：结论：检查人：日期：8.1.3关键设备及消耗备品仪器名称荧光分光光度计仪器型号RF-6301PC制造厂商仪器编号使用科室质量控制实验室放置地点关键设备设备名称型号生产厂家备品名称生产厂家和型号数量存放处结论：检查人：日期：8.1.4安装检查对照使用说明书要求安装，确认仪器外观，环境、电源等符合要求。检查内容要求方法结果外观标识齐全，固件紧固良好，各旋钮、按键和开关均能正常工作，目测环境室内不得存放与实验室无关的易燃、易爆和强腐蚀的物质，无强烈的机械振动和电磁干扰。目测环境温度15℃～35℃温湿度表测环境相对湿度40%～80%温湿度表测安装位置仪器应平稳而牢固地安置在工作台上按要求安装电源线与插孔吻合按要求安装结论：检查人：日期：第6页共13页8.1.5软件安装情况检查项目安装情况检查安装的软件文件格式安装位置数据文件保存位置工作站安装结论：检查人：日期：8.1.6安装确认结论所有物品与检查清单相符，仪器外观符合规定，实验室电设计安装合理，实验室环境良好，软件安装正确无误。结论：检查人：日期：复核人：日期：8.2运行确认8.2.1确认所需的材料8.2.1.1玻璃仪器计量玻璃仪器需彻底清洗并经检定，一般玻璃仪器要保证洁净。8.2.1.2标准物质：硫酸奎宁荧光标准物质8.2.1.3工作标准溶液8.2.1.3.10.05mol/L硫酸溶液：1000ml的容量瓶中加入适量的蒸馏水，用移液管移取浓硫酸2.7ml，注入容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，并混合均匀后放置备用。8.2.1.3.2硫酸奎宁标准溶液（1×10-5g/ml）：将硫酸奎宁固体试剂在干燥器中放置24h以上。在分析天平上准确称取5.00mg的硫酸奎宁标准物质于500ml容量瓶中，用适量的硫酸溶液溶解，然后用0.05mol/L硫酸溶液稀释至刻度，混合均匀。8.2.1.3.3硫酸奎宁标准溶液（1×10-6g/ml）：用移液管移取1×10-5g/ml硫酸奎宁溶液25ml，倾入250ml容量瓶中加入0.05mol/L硫酸溶液稀释至刻度，混合均匀。8.2.1.3.4以此类推4×10-7g/ml硫酸奎宁标准溶液，8×10-7g/ml硫酸奎宁标准溶液，1×10-9g/ml硫酸奎宁标准溶液按下表配制第7页共13页欲配标准溶液所取标准母液质量浓度/(g/ml)配置体积/ml质量浓度/(g/ml)配置体积/ml1×10-62501×10-5251×10-71001×10-6104×10-71001×10-548×10-71001×10-581×10-61001×10-718.2.2波长示值误差与波长重复性8.2.2.1激发侧单色器波长示值误差与波长重复性将发射侧单色器置零级位置，将漫反射板（或无荧光的白色滤纸条）放入样品室，仪器的响应时间设置为“快”，扫描速度设置为“中”或采用手动方式，使用实际可行的最窄狭缝宽度，对激发侧单色器在（350～550）nm的波长范围进行扫描，在所得到的谱图上寻找450.1nm附近的光谱峰，并确定其峰位置。连续测量三次，按公式（1）和（2）分别计算波长示值误差和重复性。波长示值误差：3131iri（1）式中：i—波长测量值；r—参考波长值（450.1nm）。波长重复性3131maxiii（2）8.2.2.2发射侧单色器波长示值误差与波长重复性将激发侧单色器置零级位置，将漫反射板（或无荧光的白色滤纸条）放入样品室，仪器的响应时间设置为“快”，扫描速度设置为“中”或采用手动方式，使用实际可行的最窄狭缝宽度，对激发侧单色器在（350～550）nm的波长范围进行扫描，在所得到的谱图上寻找450.1nm附近的光谱峰，并确定其峰位置。连续测量三次，按公式（1）和（2）分别计算波长示值误差和重复性。波长示值误差及波长重复性结果第8页共13页激发单色器r测量值发射单色器r测量值结论：检查人：日期：8.2.3检出极限用0.05mol/L硫酸溶液做空白溶液，选取质量浓度为1×10-9g/ml硫酸奎宁标准溶液，灵敏度置最高档，选择适当的狭缝宽度，根据激发波长在350nm、发射波长在450nm左右的原则，设定两侧的波长。对空白溶液与标准溶液进行连续交替11次测量。如果在测量中，有一次数据确认是由外界干扰或操作引起的较大误差，应将该次数据剔除。由下式计算每次测量的荧光强度：01iiiFFF式中：1iF—标准溶液的荧光强度；0iF—空白溶液的荧光强度荧光强度测量值的平均值为niiFnF11式中：n—测量次数检出极限指二倍于标准偏差读数的物质浓度，用符号DL来表示：sFcDL2式中：F—11次测量的平均荧光强度第9页共13页c—标准溶液的质量浓度s—单次测量的标准偏差1)(12nFFsnii检出极限结果Fn0iF1iFiFFn0iF1iFiF1728394105116F=s=DL=c=结论：检查人：日期：8.2.4测量线性用0.05mol/L硫酸溶液作空白溶液，适当选择灵敏度挡和狭缝，依次测量下表的各质量浓度硫酸奎宁标准溶液。根据激发波长在350nm、发射波长在450nm左右的原则，设定两侧的波长硫酸奎宁标准溶液标准溶液编号1234标准溶液质量浓度1×10-74×10-78×10-71×10-6测量线性结果质量浓度10F11F1F20F21F2F30F31F3FF1×10-74×10-78×10-71×10-6第10页共13页线性相关系数r=结论：检查人：日期：8.2.5光谱峰值强度的重复性根据激发波长在350nm、发射波长在450nm左右的原则，设定两侧的波长。用1×10-7g/ml的硫酸奎宁溶液，见光3min后，对发射波长从365nm至500nm重复扫描三次。光谱峰值强度的重复性按下式计算%1003131max3131iiiiiFFFF式中：iF—光谱峰强度读数光谱峰值强度的重复性结果测量次数123FF荧光强度/%结论：检查人：日期：8.2.6稳定性8.2.6.1调节灵敏度中等程度。关闭闸门，记录10min内的漂移。8.2.6.2置激发波长和发射波长为450nm。置激发和发射狭缝宽度为10nm。漫反射板放入样品室，调节灵敏度，使示值为90%，见光3min后，观察10min内示值的变化。稳定性结果项目零线示值上限稳定性/%10min结论：检查人：日期：8.2.7运行确认结论仪器的波长示值误差与波长重复性，检出极限，测量线性，稳定性，重复性各项数据准确无误，操作符合标准操作规程，各项均应符合验证标准，结论：检查人：日期：复核人：日期：第11页共13页8.3性能确认使用供试品确认仪器性能符合使用要求，对公司使用该仪器的不同品种各三批进行检测，以确保仪器满足实验要求。性能确认检测结果产品名称产品批号产品代码检验日期检验依据检测项目标准规定检验结果结论：检查人：日期：8.4采用文件8.4.1《RF-5301PC荧光分光光度计标准操作规程》（SOP-ZL1019-02-00）8.4.2《RF-5301PC荧光分光光度计维护保养标准操作规程》（SOP-ZL1109-02-00）8.4.3《RF-5301PC荧光分光光度计使用说明书》8.4.4《荧光分光光度计检定规程》（JJG537-2006）9.验证数据分析仪器工作环境，波长准确度与波长重复性，分辨率，基线稳定性，灵敏度，检出限均重复性，仪器外观应符合验证合格标准。如有少量数据超过上述标准，则应由质量控制实验室、质量管理部共同进行分析，找出不合格原因，修订验证方案，再实施，直至符合验证标准。10.验证结果与结论（对验证结果的评价和建议）质量控制实验室部负责收集各项验证、试验结果记录，根据验证、试验结果起草验证报告，报验证委员会。验证委员会负责对验证结果进行综合评审，作出验证结论，发放验证证书，确认RF-5301PC荧光分光光度计验证周期，对验证结果的评审应包括：10.1验证试验是否有遗漏？10.2验证实施过程中对验证方案有无修改？修改原因、依据以及是否经过批准？10.3验证记录是否完整？第12页共13页10.4验证试验结果是否符合标准要求？偏差及对偏差的说明是否合理？是否需要进一步补充试验？11再验证11.1依据验证结果，确定再验证周期，报验证委员会审批；11.2如RF-5301PC荧光分光光度计主要部件