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自我给药训练程序1、静脉插管手术大鼠经2%戊巴比妥钠（腹腔给药）麻醉，将静脉插管置于右侧颈静脉，插管尖端位于右心房开口处。静脉插管固定后经皮下穿过耳后置于颅骨上方，与静脉自我给药套管相连，用牙科水泥固定于颅骨上，水泥凝固后手术完毕。术后当天静脉给于0.2%的肝素钠0.25ml/只抗凝。将大鼠单笼饲养，术后大鼠体重恢复至手术前即可进行实验。每天静脉注射青霉素20万单位/只以防止静脉给药套管堵塞或发生感染。2、自我给药训练大鼠进行10天的自我给药训练，每天3小时，每小时之间暂停5分钟。训练在大鼠的夜间周期进行。训练采用FR1强化程序，每次给药之间有40秒的不应期，每次给药伴随有5秒的声音及灯光线索。每个训练期以笼灯开启为信号，动物触碰有效鼻触后笼灯关闭，不应期结束后笼灯再次开启。为防止动物给药过量发生死亡，每小时给药次数被限制在一定次数。3、消退训练根据不同的点燃方式选择相应的消退程序。在由给药相关线索点燃的消退训练过程中，笼灯关闭，动物触碰有效或无效鼻触均不引起给药或条件相关线索（灯光－声音）或者药物。动物进行消退训练直至触碰有效鼻触的次数降低到基线值的20％以下（基线值为自我给药训练最后3天的均值），且维持至少2天。在由药物本身点燃的消退训练过程中，笼灯开启，动物触碰有效或无效鼻触均不引起给药，但是伴有与自我给药训练期间相同的条件相关线索（灯光－声音）。动物进行消退训练直至触碰有效鼻触的次数降低到基线值的20％以下（基线值为自我给药训练最后3天的均值），且维持至少2天。4、复燃测试点燃方式可分为训练期间给药伴随相关线索点燃与药物本身点燃。当动物的觅药行为消退至达到上述标准后，对动物进行给药相关线索复燃测试时，除了触碰有效鼻触不引起给药外，测试时的条件与训练期间相同，测试时间为30分钟，并由电脑同步记录测试期间动物触碰有效或无效鼻触的次数。对动物进行药物本身的复燃测试时，根据药物的起效时间，选择恰当的给药途径提前给与点燃剂量的药物。除了触碰有效鼻触不引起给药外，测试时的条件与训练期间相同，并由电脑同步记录测试期间动物触碰有效或无效鼻触的次数。自身给药训练注意事项1.训练前清洁训练箱；2.酒精冲洗输液管；3.再用盐水冲洗输液管，后测泵速；4.测完泵速后，打开程序，确保程序运行正常；5.训练中，每隔20分钟观察输液管以及大鼠鼻触情况；6.每天静脉注射青霉素；7.每天训练完后，清洗训练箱，并做好消毒工作，保持实验室环境整洁；8.密切注意温湿度；9.注意周围环境的影响，尽量保证安静的环境；10.核团给药前三天疏通套管以确保微注射顺利进行；11.每天抚摸大鼠，增加交流。条件性位置偏爱(CPP)实验程序常见的条件性位置偏爱实验分为三个步骤：前测（preconditioning）、条件性训练(conditioning)与测试(test)。前测在前测之前通常还可进行长短不同的适应期，以尽可能减少实验动物暴露于实验装置的新奇感（novelty）与对动物造成的应激，也可不用，通过前测使动物适应测试环境。前测时，将实验动物放入箱体中，让其在各箱体中自由活动并记录动物在每侧箱体停留的时间。前测在各个实验室的设计中各不相同，比如可每天测试1次，每次15分钟，连续4天，第4天时记录动物在两侧箱体内的停留时间，若动物在一侧箱体内停留时间超过10分钟，说明动物对一侧环境具有天然倾向，应将动物从实验组中剔除，尽可能保证实验组的动物不具有天然倾向性。这一挑选程序有时会剔除掉25%左右的动物。在正式训练前检测非条件性偏爱（天然偏爱倾向），并根据前测的结果设计合理的实验方案，被认为能够有效控制非条件性偏爱的干扰。如上所述，前测不仅可以使动物熟悉实验装置，而且其基线数值是客观解释实验结果的依据。条件性训练使药物与箱体搭配，将实验动物注射药物后限制于一侧箱体内停留固定时间，使动物在药物与箱体间建立起关联。药物可与任何一侧箱体搭配，但应保证某只动物生理盐水与药物分别搭配两侧，且整个训练过程中固定不变；此外通常将每组动物中的一半与药物搭配一侧箱体，另一半与药物搭配另一侧箱体（counterbalance）。根据药物起效时间不同，注射药物后将动物放入箱体前的预处理(pretreatment)时间也不同，目的是保证动物进入箱体时药物已完全起效，这一方法也可以用来检测药物奖赏效应的时程曲线（timecourse）。如果预处理时间较长，应在注射药物后将动物放回饲养笼中。训练搭配的次数不同的研究不同，常见为训练8天，其中药物训练4天，生理盐水训练4天，各自间隔进行。也有研究使用上午训练生理盐水，下午训练药物，反复数天的训练方法，这能够节省训练的时间。条件性训练的次数不等，在一定范围内，搭配的次数越多，CPP越强，但也有报道药物与生理盐水各一次训练动物即已形成CPP。测试测试与训练时程序完全相同，只是动物可以在两个箱体内自由活动，测试通常在末次条件性训练24小时后进行，记录动物在两个箱体内分别停留的时间。常见的测试时间是15分钟。核团立体定位手术标准程序将大鼠用50%戊巴比妥钠（腹腔给药）麻醉后俯卧位固定于脑立体定位仪。将大鼠头顶颅骨结缔组织刮干净，并用止血弯夹暴露颅骨，调整至前卤与后卤水平。用电钻钻3个孔，拧紧螺丝。记录前卤点的数值后将持套管臂移到将套管埋入目的脑区（中脑腹侧被盖区、伏隔核中央部）。根据Paxinos和Watson(1998)大鼠脑立体定位图谱，选择相应的坐标。套管经不锈钢螺丝和牙科水泥固定于颅骨上，不锈钢探针插入套管以保持通畅和预防感染，待水泥干燥后，将老鼠从定位仪上取下，并注射青霉素防止感染，单笼饲养，恢复7天后开始试验。核团微注射标准程序核团给药的前一天使用生理盐水进行模拟给药，目的是使大鼠熟悉第二天的操作。将微注射器的针管与软管用去离子水和酒精洗净，晾干。将针管与软管内充满生理盐水，并将气泡排出。吸取药物前留一小截气泡，以免药物和生理盐水相混。药物注射到气泡进入针头前停止，以免气泡进入动物脑内。将针头插入大鼠头上埋好的管内，固定。以0.5?l/min的速度，推药1分钟，并停留1分钟。将其从大鼠头上取下，并盖好套管的帽。行为敏化操作标准程序行为敏化的步骤：适应阶段--形成阶段--撤药戒断--表达阶段适应阶段（共3天）：目的是使所有大鼠适应箱中环境及腹腔注射过程。基础值测试前2天将所有大鼠放入自发活动箱中适应2h。基础值测试前1天及基础值测试当天均给予所有大鼠注射0.9%生理盐水（1ml/kg,i.p.）并放入箱中适应2h。基础值测试当天记录大鼠在箱中2h的自发活动路程以备分组使用。敏化形成阶段：每天给予大鼠生理盐水（1mg/ml,i.p.）/药（1mg/kg,i.p.）注射，并测定其自发活动2h，连续14天。戒断期：行为敏化形成后，所有大鼠于饲养笼中撤药戒断1周或2周。敏化表达阶段：大鼠经1周或2周的撤药戒断期后，再次腹腔给药（1mg/kg,i.p.）激发（challenge）并测试其自发活动2h。