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肾脏穿刺活检标本组织切片厚度对PAS染色效果影响广东省人民医院病理医学部病理科豆文宪(我是医生)材料与方法组织来源：随机抽取2013年1月至7月肾内科送检的肾穿刺活检标本30例，其中系膜增生型IgA肾病8例，新月体性肾小球肾炎5例，狼疮性肾炎5例，增生硬化性肾小球肾炎5例，局灶节段性肾小球硬化症5例，肾小球微小病变3例标本处理：10%中性福尔马林固定，常规脱水、透明、包埋(我是医生)材料与方法试剂：1%高碘酸水溶液；0.5%偏重亚硫酸钠水溶液；无色品红液(Shiff氏液)－购自SIGMA公司（批号：SLBC3266）－本科室自配(我是医生)1石蜡切片（每个病例切片6张，1µm及3µm各3张；分别染HE、PAS染色（自配及商品化试剂）230.5%偏重亚硫酸钠洗涤3次，每次1min，流水冲洗5min，浅染苏木素，常规脱水、透明、封片材料与方法切片脱蜡至水，1%高碘酸氧化10min，水洗，无色品红液浸染10min实验步骤(我是医生)PAS染色结果•肾小球毛细血管基膜、肾小管基膜、系膜基质呈玫瑰红或紫红色;•肾小管上皮细胞胞浆呈淡红色(我是医生)实验结果切片厚度细胞分布肾小球系膜、基膜显示背景染色1µm细胞单层分布纤细、清晰清晰3µm部分细胞重叠偏粗稍有背景染色，容易出现过染切片厚度对PAS染效果影响(我是医生)结果切片厚度对染色结果影响1µm3µm(我是医生)结果1µm3µm(我是医生)结果切片厚度对染色结果影响1µm3µm(我是医生)结果切片厚度对染色结果影响1µm3µm(我是医生)结果商品化Shiff氏液与自配Shiff氏液染色效果比较商品化自配(我是医生)结果商品化1µm商品化3µm自配1µm(我是医生)讨论通过氧化剂（高碘酸）的氧化作用，使肾小球毛细血管基膜、肾小管基膜或系膜基质（多糖）的羟基打开而生成醛基，醛基再与无色品红液发生反应生成新的品红的复合物（紫红色）而将基膜或系膜清晰显示出来。肾穿PAS染色的染色原理(我是医生)讨论PAS染色——高碘酸-无色品红染色，是肾脏病理常用的染色方法之一正常：显示肾小球毛细血管基膜、肾小管基膜、系膜基质；病变：肾小球毛细血管壁增厚、系膜基质增生及硬化、肾小球基膜的破坏或皱缩等(我是医生)影响肾穿活检PAS染色效果的若干因素因素1技术人员的实验操作步骤的严谨性因素2试剂质量及操作过程的质量把关是影响染色效果的重要因素因素3组织切片的厚薄讨论(我是医生)Shiff氏液的质量对染色结果影响讨论自配商品化(我是医生)结果1µm3µm(我是医生)结论SIGMA公司的无色品红液优于自配试剂肾脏穿刺活检PAS染色切片以1µm最佳