药物的杂质检查-全面

第三章药物的杂质检查第一节药物的杂质与限量第二节杂质的检查方法第三节药物中一般杂质的检查第四节特殊杂质的鉴定方法一、药物的纯度指药物纯净程度，反映了药物质量的优劣，含有杂质是影响药物纯度的主要因素。§3-1药物的杂质与限量是指药物中存在的①无治疗作用或②影响药物的稳定性和疗效,甚至③对人体健康有害的微量物质.2.药物的杂质为保证药品质量,确保用药安全、有效,必须检查杂质,控制药物纯度.1.有毒副作用的物质2.本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质3.本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质纯度：药物的纯净程度。杂质：ChP规定任何影响药品纯度的物质，是影响药物纯度的主要因素。药物的纯度检查也可称为杂质检查。需要从药物的外观性状、理化常数、杂质检查和含量测定等方面进行综合评定。药物纯度与化学试剂纯度：药物纯度：从杂质对用药安全、有效和对药物稳定性的影响等方面来限定。只有合格品和不合格品两个等级。化学试剂纯度：从杂质可能引起的化学变化对使用的影响方面来限定，不考虑杂质对生物体的生理作用及毒副作用。纯度等级包括色谱纯、光谱纯、优级纯、分析纯、化学纯等。（一）生产过程中引入二、药物杂质的来源（1）所用原料不纯；（2）合成工艺中未反应完全的原料、反应中间体、副产物等；（3）药物在制成制剂的过程中产生的新杂质；（4）合成工艺中使用的试剂、溶剂等；（5）合成工艺中使用的设备、器皿可能引入重金属。例：阿斯匹林由水杨酸乙酰化制得乙酰化不完全水杨酸(杂质)OHCOOH(CH3CO)2O+COOHOCOCH3CH3COOH+H2SO470~75oC++例：盐酸普鲁卡因注射液的制备制备过程中加热灭菌盐酸普鲁卡因注射液进一步脱羧转化对氨基苯甲酸苯胺引起毒性反应∙（二）贮藏过程中引入（1）保管不善或贮存时间过长（2）包装不当产生杂质型转化、潮解、发霉聚合、异构化、晶水解、氧化、分解、在外界条件药品气、微生物温度、湿度、日光、空例：麻醉乙醚在日光、空气及湿气作用下，易氧化分解为醛及有毒的过氧化物。CH3CH2OCH2CH3CH3CHO+CH3CH(OH)-O-O-CH(OH)CH3（二羟乙基过氧化物）药典规定：启封后24小时内使用96：131．在药物生产过程中引入杂质的途径为A.原料不纯或部分未反应完全的原料造成B.合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成C.需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成混晶等造成D.所用金属器皿及装置等引入杂质E.由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入的杂质三、药物杂质的分类按来源分为：检查方法收载在ChP正文各品种的质量标准中。检查方法收载在ChP的附录中。特殊杂质：一般杂质：在多种药物的生产和贮藏中容易引入的杂质。在特定药物的生产和贮藏中引入的杂质。按毒性分为：本身一般无害，但其含量多少可反映药物纯度水平，指示生产工艺是否合理。如：氯化物、硫酸盐等。对人体有毒害的杂质。在质量标准中严加控制，以保证用药安全。如：重金属、砷盐、氰化物、氟化物等。信号杂质：毒性杂质：按化学类别和特性分为：无机杂质——Cl-、S2-、CN-、重金属等有机杂质——中间体、副产物、降解物、异构体等残留溶剂（1）具有光学异构体的药物，生物活性有很大差异；如：肾上腺素为左旋体，其升压作用是右旋体的12倍。（2）顺式体与反式体药物，生物活性也不相同；如：VA以全反式的生物活性为最高。（3）多晶型药物，晶型不同生物活性也有差异；如：驱虫药甲苯咪唑，有A、B、C三种晶型。其中C晶型的驱虫率为90%，B晶型的驱虫率为40~60%，A晶型的驱虫率小于20%。无效或低效杂质按结构可分为2类无机杂质——Cl-、S2-、CN-、As、重金属.有机杂质——中间体、副产物、分解物、异构体、残留溶剂.按性质可分为3类信号杂质——指本身一般无害,但其含量多少可反映药物纯度水平,指示生产工艺是否合理.如：氯化物、硫酸盐等.有害杂质——对人体有毒害的杂质.在质量标准中严加控制,以保证用药安全.如：重金属、砷盐、氰化物、氟化物等.无效或低效杂质a具有立体异构体的药物,其生物活性有很大差异;如：肾上腺素为左旋体,其升压作用是右旋体的12倍.b异构体中,其顺式体与反式体的生物活性也不相同;如：VA以全反式的生物活性为最高.c药物的晶型不同,其理化常数,溶解性稳定性、体内的吸收和疗效也有差异.如：驱虫药甲苯咪唑,有A、B、C三种晶型.其中C晶型的驱虫率90%,B晶型的驱虫率40~60%,A晶型的驱虫率小于20%.必须重视异构体和多晶型对药物有效性和安全性的影响.控制药物中低效、无效以及具有毒性的异构体和多晶型,在药物纯度研究中日益受到重视四、药物的纯度与化学试剂的纯度药物的纯度考虑杂质的生理作用，药品只有两个等级：合格或不合格。化学试剂有很多等级，如基准试剂、优级纯（GR）、分析纯（AR）、化学纯（CP）、色谱纯、光谱纯。99x：85．中国药典中规定的一般杂质检查中不包括的项目是A.硫酸盐检查B.氯化物检查C.溶出度检查D.重金属检查E.砷盐检查限量表示方法：百分之几（%）百万分之几（ppm）对照法灵敏度法比较法四、杂质的限量杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量。杂质定量测定法杂质限量控制方法限量检查法（ChP）例:平行试验比较两比色管的颜色或浊度，判断杂质含量是否符合规定。对照管样品管对照法：取限度量的待检杂质对照品配成的对照溶液，与一定量供试品配成的供试品溶液，在相同条件下处理，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过限量。灵敏度法：在供试品溶液中加入一定量的试剂，在规定条件下反应，不得出现正反应。即以检测条件下的反应灵敏度来控制杂质限量。例：乳酸中枸橼酸的检查水供试品(0.5g)5mL溶液氨试液调微碱性1ml氯化钙试液水浴△5min不得产生浑浊比较法：取一定量供试品，在规定条件下测定待检杂质的特定参数（如：吸光度等），与规定限量比较，不得更大。例：肾上腺素中肾上腺酮的检查供试品溶液(2.0mg/ml)盐酸溶液供试品(0.05mol/L)A310nm规定：A310nm≯0.05100%杂质最大允许量杂质限量供试品量100%对照溶液的浓度对照溶液的体积供试品量限量计算公式注意:①单位是否统一②供试品是否有稀释③表示方法%或ppm100%CVLS610(ppm)CVLS写成：或61010501000012520100.%.%.100%CVLS例1.对乙酰氨基酚中氯化钠的检查-,Cl25ml100ml2.0g依法检查样品过滤溶解水对照溶液：标准NaCl溶液（10gCl-/ml），取5.0ml同法操作比较，浊度不得更大。计算：氯化物限量是多少（%）？供试品溶液：例2.肾上腺素中酮体的检查取本品0.20g，置100ml量瓶中，加盐酸溶液(9→2000)溶解并稀释至刻度，摇匀，在310nm处测定吸光度不得超过0.05，已知酮体的百分吸收系数为435，求酮体的限量。11%1cm%1cm//EAclcAEl酮体-40.05=1.1510g/100ml4351（）-6=1.1510g/ml（）-30.20=2.010g/ml100c样品（）631.1510100%=0.06%2.010cLc酮体样品一、杂质的研究规范（一）有机杂质在药品质量标准中的项目名称1.以杂质的化学名称作为项目名称如：阿司匹林中的游离水杨酸2.以某类杂质的总称作为项目名称如：硝酸毛果芸香碱中的其它生物碱黄体酮中的有关物质3.以检测方法作为项目名称如：杂质吸光度、溶液透光率§3-2杂质的检查方法（二）杂质检查项目的确定（三）杂质限量的确定在确保用药安全有效的前提下，应考虑到生产的可行性、批与批之间的正常波动、药品本身的稳定性。根据起始原料、生产工艺及稳定性情况确定。药物在质量研究中和稳定性考察中检出的，并在批量生产中出现的杂质和降解产物单一对映体药物：检查其它对映体消旋体药物：旋光度检查杂质检查方法包括化学法、光谱法、色谱法等。有机杂质多采用色谱法，特别是HPLC。检查方法要求专属、灵敏，应验证方法的专属性。分析方法的检测限应符合质量标准中对杂质限度的要求。（四）杂质检查方法的选择与验证二、杂质的常用检查方法显色反应检查法沉淀反应检查法生成气体的检查法滴定法（一）化学方法NHCH2CH2NH2+显色（比色法检查）如：氯硝柳胺中2-氯-4-硝基苯胺的检查显色反应检查法2杂质：2-氯-4-硝基苯胺O2NNHClClOHCONO2NHClO+NaNO2+2HCl2NN2Cl++NaCl2H2O+-ClO2NNNNHCH2CH2NH2Cl如：盐酸肼屈嗪中游离肼的检查沉淀反应检查法H2NNH2+CHOOHHCOHNNH2+H2O杂质：游离肼NNNHNH2．HClCHOCNH2NNH2·H2OHCl盐酸肼屈嗪盐酸肼屈嗪杂质：游离肼比浊法或重量法检查如：硫酸亚铁片剂中高铁盐的检查滴定法2Fe3+2KI2Fe2+I22K++++++I22Na2S2O32NaINa2S4O6与药典规定限量进行比较（二）色谱方法1.薄层色谱法2.高效液相色谱法3.气相色谱法4.毛细管电泳法难以采用化学法、光谱法对杂质进行检查时，多采用色谱法。色谱法是检查药物中有关物质的首选方法。1.薄层色谱法（1）杂质对照品法：适用于杂质已知并有杂质对照品的情况。方法：根据杂质限量，取供试品溶液和一定浓度的杂质对照品溶液，分别点于同一薄层板上展开，定位后进行检查。供对供试品溶液除主斑点外的其它斑点与相应杂质对照品溶液的主斑点比较。示例3-8（2）供试品溶液自身稀释对照法：适用于杂质的结构未知或无杂质对照品的情况，且杂质斑点颜色与主成分斑点颜色应相同或相近。方法：先配制一定浓度的供试品溶液，然后按限量要求将其稀释至一定浓度作为对照溶液，将两溶液分别点于同一薄层板上展开，定位后进行检查。供试品溶液的杂质斑点与自身稀释对照溶液的主斑点比较。示例3-11供对（3）杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照并用法：适用于药物中存在多个杂质的情况。有对照品的杂质：杂质对照品法检查；未知杂质或没有对照品的杂质：供试品溶液自身稀释对照法检查。供对对（4）对照药物法：适用于无合适的杂质对照品，或杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异而难以判断限量的情况。方法：选用与供试品相同的药物作为对照。对照药物中所含待检杂质应符合限量要求，稳定性好。供对2.高效液相色谱法使用高效液相色谱法测定含量的药物，可采用同一色谱条件进行杂质检查。采用此法检查杂质时，ChP规定应进行色谱系统适用性试验，以保证仪器系统达到杂质检查要求。（1）外标法（杂质对照品法）：适用于有杂质对照品，而且进样量能够精确控制的情况。ACCA杂对杂对%100%CC杂供杂质限量杂质对照品溶液供试品溶液（杂）（对）（2）加校正因子的主成分自身对照法：适用于已知杂质的控制。杂质的校正因子（f）和相对保留时间收载在ChP各品种的质量标准中。//ACfAC主主杂杂杂质对照品+药物主成分对照品溶液自身稀释对照溶液（主）（杂）（主）（杂）供试品溶液/AfCAC杂杂对照主（3）不加校正因子的主成分自身对照法：适用于没有杂质对照品，且杂质结构与主成分相似的情况。ACCA杂对照杂主自身稀释对照溶液（主）供试品溶液（杂）（4）面积归一化法：适用于供试品中结构相似、相对含量较高，且限度范围较宽的杂质含量的粗略考察。杂质限量（%）=A杂/A总×100%A总=A杂1＋A杂2＋A主供试品溶液（杂1）（杂2）（主）检查方法：同高效液相色谱法用于药物中挥发性杂质的检查，如药物中残留溶剂、农药残留量等。3.气相色谱法4.毛细管电泳法用于酶类药物中酶类杂质的检查。检查方法：同高效液相色谱法利用药物与杂质对光选择吸收性质的差异进行检查。（三）光谱方法1.紫外-可见分光光度法例：肾上腺素中肾上腺酮的检查方法：规定杂质最大吸收波长（药物在此无吸收）处的吸光度；利用杂质的呈色反应对其进行定