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粪大肠菌群检测方法注解1/2粪大肠菌群检测方法注解粪大肠菌为总大肠菌群的一个亚种；直接来自粪便，除了它耐热，在44-44．5℃的高温条件下仍可生长繁殖并将色氨酸代谢成吲哚，其他特性均与总大肠菌群相同。总大肠菌群中的细菌除生活在肠道中外，在自然环境中的水与土壤中也经常存在，但此等在自然环境中生活的大肠菌群培养的最合适温度为25℃左右，如在37℃培养则仍可生长，但如将培养温度再升高至44．5℃，则不再生长，而直接来自粪便的大肠菌群细菌，习惯于37℃左右生长，如将培养温度升高至44．5℃仍可继续生长。因此，可用提高培养温度方法将自然环境中的大肠菌群与粪便中的大肠菌群区分。在37℃培养生长的大肠菌群，包括在粪便内生长的大肠菌群称为“总大肠菌群”(Totalcoliform)；在44．5℃仍能生长的大肠菌群，称为“粪大肠菌群”(Fecalcoliform)，粪大肠菌群细菌在卫生学上具有重要的意义。1．5检验注意事项(1)将接种好的样品放人恒温水浴箱或隔水式恒温培养箱时，箱内温度一定要求达到所要求的温度(44±1℃)时，方可放入。如用恒温水浴箱其水面要高于接种物面，放滤膜的培养皿要沉到水浴箱底部。(2)MFC培养基中苯胺蓝的纯度和质量往往影响菌落的颜色，根据试验结果用进口苯胺蓝加O．1g，用国产苯胺蓝加0．2g，培养出的粪大肠菌菌落颜色较典型。但国产苯胺蓝的性能是否同样稳定尚不能肯定。因此，制好的培养基在使用前，最好先接种典型粪大肠菌，以观察对比菌落的颜色。粪大肠菌群检测方法注解2/2玫红酸高压后会分解，配好的试液应在2-lO℃保存不超过2周，如颜色由暗红变成棕色沉淀时应弃去。如杂菌污染少，且加与不加玫红酸对菌落计数无影响时，可不加。．(3)在滤膜上生长的菌落除挑取蓝色菌落外，浅蓝色菌落或浅蓝色中心较深的菌落也应挑取。(4)生活饮用水通常都是经氯处理消毒的，水中含有一定量的余氯，使大肠菌群处于受损或受抑制状态，在采集水样时应加硫代硫酸钠脱氯，使此受损的细菌得以复苏与修复，从而避免计数结果偏低甚至假阴性出现。(5)采样后水样的正确保存很重要，如保存不当可使检样中的大肠菌群细菌死亡或在一定条件下再生长，这些都将影响检验结果的准确性。检验室接到水样后，应立即检验。如因故不能检验时，应立即置于冰箱内并于2小时内检验。关于水样储存时间与温度对大肠菌群数的影响，Lonsans等报告认为水样中大肠菌群数不多时，则冰箱保存与室温保存相差不大；如水样中菌数多时，则在室温(23-39．5℃)内保存比在冰箱(0-1O℃)中保存菌数的减少速度快。