03紫外分光光度计操作规程

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03紫外分光光度计操作规程1、适用设备本规程用于北京普析通用公司生产的TU-1901型双光束紫外可见分光光度计。2、用途说明用于测量溶液紫外可见光范围内(λ=190nm~900nm)的吸光度(A)或透射比(T)。3、测量原理分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。由于各种物质具有各自不同的分子、原子、和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特定的、固有的吸收光谱曲线,可根据吸收普光上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度计定性和定量分析的基础。该仪器的工作原理基于郎伯-比尔定律,即当一束平行单色光垂直通过某一均匀非散射的吸光物质时,其吸光度与吸光物质的浓度及吸收层厚度成正比。4、操作步骤4-1开机前的准备(1)检查《仪器使用记录表》,查看上一次测量结束后设备是否正常;(2)检查干燥剂是否有效;(3)检查设备外观是否完好;4-2测量(1)打开稳压电源,等5-10秒,稳压电源稳定后打开计算机,等待计算机正常进入到桌面后,再打开仪器主机电源。(2)打开仪器主机电源后,确定样品池内没有挡光物(干燥袋或比色皿等)。双击桌面的“紫外软件”图标,(或点击“开始”菜单,选择“程序”,找到“Uvwin5紫外软件”,选择“Uvwin5紫外软件”);等待仪器进行初始化,每一项检查“正确”后进行测量。(3)正确放入比色皿:TU-1901仪器是双光束分光光度计,要在两个样品池内都放入空白溶液(或参比溶液)进行空白校正。然后只取出外侧的比色皿,放入测量的样品进行读数。备注:样品池内侧的参比溶液在测量中不能取出,除非空白溶液改变或测量波长改变才拿出重新进行空白校正。(4)选择测量功能:Uvwin5紫外软件提供了丰富的测量功能,根据需要在“工作室”内选择所需要的测量方式。测量方式简介:①光度测量:可以做单个波长或多个波长下的吸光度(或透过率)测量。②光谱扫描:主要测量样品的图谱做定性分析,即寻找测量样品的最大吸收峰。③定量测定:主要通过测量标准样品自动建立工作曲线,来测量样品的浓度。④时间扫描:主要测量样品在一定波长下随时间的变化曲线。也称动力学测量。(5)选择好测量方式后,直接按F4,(或点击“测量”,在下拉菜单中选择“参数设置”)进入参数设置界面。主要设置测量波长。设置完成后一定单击“确定”,完成设置。(6)正确放入空白溶液后,点击“校零”(在光谱扫描功能下是“基线”)键进行空白校正。(7)空白校正完成后,正确放入样品,点击“开始”键(或按F9)进行测量。(8)测量完成后根据需要保存测量数据。退出紫外程序后如果不保存数据将清除。(9)一定要取出样品池内的所有比色皿,关闭Uvwin5紫外软件。(10)退出紫外操作系统后,依次关掉主机、计算机,最后关闭稳压电源,罩上防尘罩并清理工作台面,填写仪器使用记录。5、维护保养(1)不使用仪器时不要开灯,并尽量减少开关次数;连续使用时间不应超过3小时;(2)不得随意拆开单色器密封盒,要经常更换单色器盒内的干燥剂;(3)仪器使用半年以上或搬动后要进行波长校正;(4)比色皿使用后应立即冲洗干净,并保护好比色皿的两个光学窗面,盛有溶液的比色皿不宜在样品室内放置过长时间;(5)不要随便插拔仪器连接线,如需插拔,请先关闭仪器和电脑电源,以免烧坏电路板;(6)不得将溶液洒入样品池内,若洒落一定溶液,及时擦拭干净,若洒的较多,应马上关闭仪器电源,待擦拭干净后在使用仪器。

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