回收试验回收•回收是指分析方法准确测定加入常规分析样品中的纯分析物的能力,用于反映分析方法的比例系统误差。实验误差实验误差系统误差SE随机误差RE:是由一些偶然的原因造成的恒定系统误差CE:与干扰物有关比例系统误差PE:与被测物浓度有关实验目的1.掌握回收试验的原理。2.熟悉实验方法和操作过程。3.掌握实验数据处理的方法。实验原理首先用候选方法测定基础样本和回收样本相应物质的浓度,然后计算回收率。通过回收率判断该方法比例系统误差的有无或大小,从而对候选方法的准确性作出可靠评价。实验器材微量移液器水浴箱722型可见光分光光度计吸量管实验试剂1.正常人混合血清2.80mmol/L葡萄糖标准液(1.44g无水葡萄糖+100ml蒸馏水)3.GOD-POD法测定葡萄糖试剂盒基础样品及回收样品制备(实验准备前工作)基础样品:混合血清0.9ml+0.1ml蒸馏水回收样品Ⅰ:混合血清0.9ml+0.01ml80mmol/L葡萄糖标准液+0.09ml蒸馏水回收样品Ⅱ:混合血清0.9ml+0.09ml80mmol/L葡萄糖标准液+0.01ml蒸馏水学生按下表操作加入物空白管标准管基础样品(1,2)回收Ⅰ(1,2)回收Ⅱ(1,2)蒸馏水(ul)20————5.5mmol/L糖标准液(ul)—20———样品(ul)——202020工作液(ml)3.03.03.03.03.0混匀,置水浴箱37℃,15分钟,722型分光光度计于505nm波长处测定,空白管调零,分别测各管吸光度A值。计算:测定浓度=A测/A标×C标(5.55mmol/L)计算结果请填入表内:平均吸光度测定浓度加入浓度回收浓度回收率基础样品———回收样品Ⅰ回收样品Ⅱ平均回收率————回收试验数据处理1.加入浓度计算:加入浓度(mmol/L)=加入标准液量ml/(混合血清量ml+标准液量ml)×标准液浓度(80mmol/L)2.回收浓度计算:回收浓度=回收样品测定浓度-基础样品测定浓度3.回收率计算:回收率=回收浓度/加入浓度×100%结果判断一般检验方法要求回收率在95%~105%之间,最理想的回收率应是100%。如果候选分析方法的回收率位于此区间,那么候选方法的准确度是可以接受的可以进入临床应用阶段。注意:试剂的配制和加入量必须准确,考虑到多方面因素的影响,一般应由技术熟练专业人员多做几次实验后作出结论。操作提醒•准确加样在本实验中尤其重要,如果吸量稍不准确就会很大影响结果。