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,991年18(4)橄生物学通报UASB底部活性污泥中优势微生物群系及其对PTA生产废水的降解作用传宏(抚顺石油学院应用化学系,抚顺)白硫谦(山东大学微生物系,济南)抽要处理对苯二甲酸(pTA)生产废水的上流式厌氧生物沁床(UAsB)底部活性污泥中的橄性物分析表明,其优势群系为专性好氧菌和兼性厌氧菌。经分离得到l,6株橄生物,分别为假单胞翻属、微球菌属、葡萄球菌属、不动细菌属、芽抱杆菌属和酵母菌属。其中大部分菌株可以PT人生产废水,中某些成分为唯一碳源而生长,而以菌株T`对PT人降解活性为最高。经鉴定,该菌与类产碱假单胞翻(p“.domo。“户`。“`o`le`11。,,,*)很相似,但存在某些差异,尚需进一步研究确定。关挂词pTA生产废水;优势微生物区系;假单胞菌近年来,有关厌氧消化反应器中微生物生态学方面的研究国内外虽有报道,但多是报道产甲烷细菌的生理及生态学特性t卜,,,而对不产甲烷微生物的各种特性报道较少。一般认为,厌氧消化中的不产甲烷细菌主要是专性和兼性厌氧菌。也有人发现厌氧消化中有好氧菌存在,如顾蕴旋等团的研究表明,在沼气发酵过程中钓非产甲烷细菌类群除了专性和兼性厌氧菌外,还有好氧的硝化细菌存在。本文分析了处理对苯二甲酸(PTA)生产淡水的上流式厌氧生物滤床(UABS)底部活性污泥中的微生物主要区系,及其对PTA生产废水中各成分的降解利用等情况。材料和方法(一)样品来派样品为抚顺石化研究院环保所上流式厌氧生物滤床底部(近污水人口处)的活性污泥;该反应器中部活性污泥。(二)培并签1。分离好氧菌培养基:肉膏蛋白陈琼脂培养基。2.分离厌氧菌培养基:葡萄糖琼脂培养基。3,碳源利用培养基:(N氏)z5.029,NaHZPO二HZO0.59,K:HPO.0.59,Mgs.o.7HZo0.29,eae12·ZHzo0.19,碳源0.2一1关,蒸馏水1000ml,pH6·504·pTA培养基:(N执):Hpo;l·59,KH:p.o1.09,MgSO二7Hzo0.59,MnCI:.4H:010mg,NaCI1omg,CaClz10mg,FeCI,·6H:O1omg,ZnCI:·7H2010科g,CuSO二SH:O50林g,H3Bo,10拌g,pTA(用NaOH溶解)29,蒸馏水1000ml,pH8.00(三)好级条件下的橄生物分离取sml反应器底部和中部活性污泥溶液,用常规稀释法平板分离。(四)厌级东件下的徽生物分离囚(五)PTA降解,的,集培并与分离将适量活性污泥溶液接人盛满PTA培养基(另加人0.05外L一半胧氨酸)的带磨口玻璃塞的250ml三角瓶中,在30℃下培养至细菌明显生长后,取10ml培养液重复上述操作,继续富集。富集过程中PTA浓度从10mg/1逐渐增大到Zo00mg/l。富集几代后,分别按前述的方法分离、纯化和保存。DOI:10.13344/j.microbiol.china.1991.04.009橄生物学(六)PTA含.的侧定将试样调pH)10,双层滤纸过滤后,用焦馏水稀释至1/200,在242nm波长下(uv-24。型紫外分光光度计)测定。(七)形态现察与生理生化特性侧定7[一”结果和讨论(一)UASB反应器中、底部活性污泥中的主要徽生物区系1.反应器底部:经好氧分离、纯化后,共分离出74株细菌,4株酵母菌。纯化后分别进行鉴定和需氧性测定。试验结果见表1。通报1991年z娜(4)aZ反应.中娜活性污泥中主共一生物异燕种种类类株数数专专专棒状杆菌属O种)))l22237。,,性性性Cor夕,君bo`rerf.加加99928。lll厌厌厌芽抱梭菌属l(种)))8882,。000权权权Clorrridi“用用333,。444葡葡葡萄球菌属(1种)))))))SSSSS盆aP为ylococe一sssssss放放放线菌属(l种)))))))AAAAA`r`月。邢ye`sssssss兼兼性性无无好好双双双专专性性无无好好双双双农1反应.班部活性污泥中主典橄生.区系好权性株数百分比(%)ó托ù呜几甘…,`60自尹乙.5l.5l沂旅性厌暇专性厌权采用厌氧分离方法从底部活性污泥中共分离出假单胞菌25株,葡萄球菌`株,芽抱杆菌,株,未定属3株。采用穿刺接种培养后发现,所有分离菌在琼脂柱内从底部到表面几乎都生长。证明这些菌株均为兼性厌氧菌,且其生理生化特性与好氧分离出的兼性厌氧菌一一对应。2.反应器中部:以中部活性污泥为材料,分别进行好氧和厌氧分离,结果见表2。好氧分离结果显示无菌落生长。而采用厌氧分离,共得上述32株菌。经需氧性试验测定,这些菌均为厌氧菌。取适量反应器底部活性污泥溶液接人PTA培养基中,在厌氧条件下富集培养。富集几代后分别在好氧和厌氧条件下分离,纯化。好氧条件下分离到21株菌,厌氧条件下分离到17株菌。穿刺接种试验表明,38株菌均为兼性厌氧菌。这些菌经鉴定均为假单胞菌属。上述所有试验表明,从反应器底部活性污泥中分离到的好氧菌和兼性厌氧菌确系该处的优势微生物区系。另从表3可知,处理PTA的UAsB反应器内必有产甲烷菌群的存在。这进一步说明该反应器内从下至上微生物区系演替过程为好氧及兼性厌氧菌群一厌氧发酵菌群一产甲烷菌群。反应器底部(近污水人口处)活性污泥中有好氧菌、兼性厌氧菌及少量原生动物存在,说明反应器底部残存一定浓度的氧。而这些微生物的存在可以消耗掉反应器内残留的氧为中部、上部的厌氧发酵菌、产甲烷菌提供良好的厌氧条件,因而对PTA生产废水的厌氧处理具有比较重要的作用。农3PTA厌妞筑化的产气率和气体姐分.撼撼床床CO仇rrr产气率率产气ttt产气中甲烷烷类类型型去除率(%)))(m,/二,床层d)))(m,/kgCOD)))含t(%)))陶陶拉拉73。9998。3330。46664888泌泌床床床床床床.表内数据由抚顺石化研究院环保所提供。(二)主要细菌区系对PTA废水中几种成分的利用1991年18(4)微生物学通报PTA生产废水含有多种有机成分,其水质情况如表4。农4PT^生产度水水质情况*废水组成对二甲苯苯甲酸甲基苯甲酸邻苯二甲式_对苯二甲酸(PTA)4一狡基苯甲醛醋酸甲配醋酸乙酸含最%0。0070。0070.心760。0030.2510。0030.1250。l一0.210。035.抚顺石化研究院环保所提供。本文从反应器底部活性污泥分离菌中选取形态特征具有代表性的8株细菌,对PTA生产废水中的主要成分PTA及其他一些成分进行了微生物利用试验。结果见表5。试验结果表明,假单胞菌主要利用PTA、邻苯二甲酸、苯甲酸、醋酸甲酷、醋酸等;微球菌主要利用醋酸甲醋、醋酸等;葡萄球菌和芽抱杆菌主要利用醋酸;酵母菌主要利用醋酸甲醋;不动细菌主要利用醋酸、乙醛等。氧条件下PTA降解率的结果表明,这些菌株静止培养30天,降解率一般为35外左右。(三)T6菌株的分类鉴定T6菌株为革兰氏阴性无芽抱杆菌,以极生单鞭毛运动,菌体大小为.05一0.7x1.0一1.,产m(图l)在肉膏蛋白陈培养基上生长良好,形成边缘整齐、半透明、奶油状低凸面菌落,24小时内菌落直径1一之smm。有机化能异养,不发酵。能利用C:以上的碳源为唯一碳源。兼性厌氧。接触酶弱阳性。氧化酶阳性。积累聚户经基丁酸盐作为碳的贮藏物。精氨酸可作为唯一的碳源。41℃可生长。有精氨酸双水解酶。卵黄反应阳性。无反硝化作用。可利用葡萄糖、山梨糖、甘露醉等。产橙色水溶性色素。无荧光色素。最适生长温度为3,℃。最适生长pH为7.5一8.0。G+Cmol沁为61.1。农S橄生怕对几种有机物的利用,况碳源PT人苯甲酸醋酸!乙醛自株邻苯二甲酸醋酸甲酮TI,(假单胞菌属)T31(微球菌属)T32(芽抱杆菌属)T3,(酵母属)T38(芽抱杆菌属)T3,(翻萄球菌属)T40(不动细菌属)T杜(徽球翻属)了图l菌株T`的形态(透射电镜,K100O0)十+++二上述特征与类产碱假单胞菌(八.娜”doal-calige,es)`,,,很相似,但二者之间存在一定的差异(表6)。该菌是否为一新种尚需进一步研究。十十十一+++++++++++十农6特征T`.株与类产旅妞单二的.加++++++令+二生长旺盛;十:生长;一:不生长。T6菌株!类产碱假单胞自从所分离的假单胞菌中选取菌落生长丰满的24个菌株,接种到PTA液体培养基中,30℃下振荡培养,测定好氧条件下的PT人降解率。其中有6株培养48小时的降解率均在85关以上,而T6菌株降解率可达98并。同时进行的厌,日黄反应葡萄塘山梨摘甘慈醉好斌性令l七生长十+++兼性厌暇良好好斌很差,224-微生物学通报1991年18(4).考文献二钱泽洲,阂肮:沼气发醉微生物学,浙江科学技术出版社,杭州,l,86年。j.M.bRA:C.rr,,rMi`护obiol二3:321一324,一,80。3。Z.hnderAJBet`1.:才r`汤.材矛erob`01.,1肠:1一,.1980-4。顾越旋等:中国沼气,4:10一12,1985。,·白软傲等:橄生物实验技术,山东大学出版社,济南,1,87。`·周德庆等:掀生物实验手册,_七海科技出版社,上海,l,86。,·中国科学院微生物研究所细菌分类组:一般细菌常用鉴定方法,科学出版社,北京,l,,s年。.8长谷川武治:微生物刃分顺乏同定,学会出版中,夕一,日本,198,。9·周怠玲等:微生物学报,1叹2):13峪一139,1978010.REBoc`。na。等著,中国科学院翻译组译:伯杰细翻鉴定手册(第八版),科学出版社,北京,1,8.年。从观赏动物五爪龙的粪便中分离出三种肠道病原菌罗明义秦庆学单建青王海燕李生才(石家庄地区卫生防疫站)摘要本文报道从稀有爬行动物五爪龙(人ro.`,。,。ot,)的休内同时分离出三种肠道病原菌,伦教沙门氏菌(sa100。,llalondo。)、德比沙门氏菌(S·d,r吞y)和一株类志贺邻单胞菌(ple,`o,0.,`功枯刁lo份“)。并提出应注愈经常监测各类动物的带菌状况,加强对带菌动物的管理。关妞词观赏动物;五爪龙;沙门氏菌;类志贺邻单胞菌1,87年7月我们对石家庄市动物园的各种观赏动物进行了人兽共患病原菌的检测,其中从一只五爪龙的粪便中同时分离出三种肠道病原菌:伦敦沙门氏菌(5.1。”d。幻、德比沙门氏菌(5.dobry)和一株类志贺邻单胞菌(lP。-Ji000二。,:`i君,lloide,)。现将结果报告如下:材料与方法供试标本的采集、分离、鉴定:沙门氏菌:取新鲜粪便约gl在4小时内接种于SF和RI.增菌液中培养,再分别转种55和BS平板,培养18一24和48小时,挑取可疑菌落接种于克氏双糖琼脂,凡初步符合沙门氏菌生化反农1生化试脸结.项目德比沙门氏菌类志贺氏邻单胞菌项目德比沙门氏菌类志贺氏邻单胞菌++十+十++十十一+十十十+十十十+++++十十十翻萄艳乳箱决芽他甘皿醉稼艳水杨素阿拉伯抢木塘徽李饱卫茅醉侧金盏花醉肌醉山梨醉,塘尿素他基质伦敦沙门氏菌田MRVPH:S拘椽酸盐棉干塘菊塘明胶液化苯丙氨酸脱氮酶赖氨酸脱毅酶精氮酸双水解酶鸟氮酸脱狡酶丙二酸盐硝酸盐还原动力氧化酶o/一z,教感性}.田”产酸产气产+.阳性,4一”阴性,“。”未做。