反硝化细菌的筛选及其亚硝酸盐降解特性研究罗秀针

罗秀针1,徐长安2,唐　旭2,何建林2(1.,　　363005;2.,　　361005):2010-04-25;2010-06-03:(1981-),,,,:(1962-),,,,(E-mail:[e-mail]):(K09102-1)　:6,1JN1,JN1,:JN1,:1000～4000mg·L-1,5%(v/v),100mL(250mL),,18～30h,pH6.5～7.5。:;;:Q939.9:AIsolationandnitritedegradationabilityofadenitrifyingbacteriumLUOXiu-zhen1,XUChang-an2,TANGXu2,HEJian-lin2(1.ZhangzhouHealthVocationalCollege,Zhangzhou,Fujian　363000,China;2.TheThirdInstituteofOceanographyStateOceanicAdministration,Xiamen,Fujian　361005,China)Abstract:Sixstrainsofdenitrifyingbacteriawereisolatedfromthemudinmarineaquacultureponds.Amongthem,oneshowedthestrongestnitritedegradationcapability.ThestrainwassubsequentlyidentifiedtobeaPseudomonassp.andnamedJN1.Itsoptimumnitritedegradationconditionsweredeterminedinthelabtobeat1000-4000mg·L-1sodiumnitriteconcentration,5%(v/v)bacterialinoculumsandpH6.5-7.5with100mLoffillvolumeina250mLflaskandmoderateaerationinthefermentationfor18-30h.　　(、),,,,,[1-3]。()、(、)(),。[4-5],。,。1,。1　材料与方法1.1　1.1.1　筛选样品　20091117。1.1.2　培养基　:KH2PO40.5g、K2HPO40.5g、MgSO4·7H2O0.2g、CaCl20.1g、NaCl0.2g、MnSO4·H2O、5.0g、NaNO21.0g,1000mL,pH7.0。:KH2PO40.5g、K2HPO40.5g、MgSO4·7H2O0.2g、CaCl20.1g、NaCl0.2g、MnSO4·H2O、5.0g、NaNO2(1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5g),1000mL,pH7.0。1.1.3　仪器设备　(,SW-CJ-1FD)、(THERMO,FP)、(,TCYQ)、(,LF-6)、-(,UV-1700)。1.1.4　试剂　KH2PO4、K2HPO4、MgSO4·7H2O、CaCl2、NaCl、MnSO4·H2O、、NaNO2、福建农业学报25(4):513～516,2010FujianJournalofAgriculturalSciences:1008-0384(2010)04-513-04DOI:10.19303/j.issn.1008-0384.2010.04.027I、Ⅱ、,,。1.2　1.2.1　反硝化细菌的筛选　1g100mL,36℃48h,(1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5g·L-1)36℃48h。0.1mL,36℃48h,。,,,。3。1.2.2　菌株的初步鉴定　《》[6]。16SrDNA。1.2.3　反硝化细菌的生长检测方法　(OD600),。1.2.4　亚硝酸钠浓度的测定　[7]:NO2-N(0.03mg·mL-1),I,10min,Ⅱ2%,520nm,NO-2-N,。,NO-2-N。1.2.5　NO-2-N初始浓度对降解效果的影响　250mL50mL,,1000、20003000、4000、5000mg·L-1,10%(v/v),36℃180r·min-148h,(OD600)NO-2-N。1.2.6　培养时间对NO-2-N降解效果的影响　50mL(1g·L-1)10%(v/v),36℃180r·min-1,6、12、24、3648h(OD600)NO-2-N。1.2.7　接种量对NO-2-N降解效果的影响　50mL(1g·L-1)1%、3%、5%10%(v/v),36℃180r·min-1,48hNO-2-N。1.2.8　装液量对NO-2-N降解效果的影响　250mL30、50、70、100、150mL(1g·L-1),10%(v/v),36℃180r·min-1,48hNO-2-N。2　结果与分析2.1　,520nm。,A,(1)。1　Fig.1　Standardcurvefornitriteconcentrationdetermination2　Fig.2　Nitritedegradationrateofisolatedstrains2.2　85,,(1g·L-1)(1.5～5.0g·L-1),6,2,632.57%78.64%,514福建农业学报25JN1。2.3　JN1JN1、,16SrDNA,JN1(Pseudomonassp.)。2.4　NO-2-NJN148h,(OD600)NO-2-N(1)。1,,,2000mg·L-1,;(1000～4000mg·L-1)JN1,5000mg·L-1,,,NO-2-N,,NO-2-N,85%。1　NO-2-NTable1　EffectofnitriteinitialconcentrationonitsdegradationNO-2-N(mg·L-1)NO-2-N(%)OD600100085.10±0.021.33200094.00±0.011.47300092.40±0.011.29400090.20±0.021.18500083.20±0.020.672.5　NO-2-NJN1NO-2-N34。3,,12h,24h,30h。4,NO-2-N,,NO-2-N,18hJN1,30h,68.62%,,。2.6　NO-2-N5,JN148h,NO-2-N,5%(v/v),81.70%。,,,。10%(v/v),,,,3　JN1OD600Fig.3　OD600atdifferentfermentationtimeperiodsforJN14　Fig.4　Effectoffermentationtimeonnitritedegradation,。。5,JN15%(v/v)。5　Fig.5　Effectofinoculationvolumeonnitritedegradation2.7　NO-2-N250mL30、50、70、100mL(1g·L-1),10%(v/v),36℃180r·min-148h,2,,。;,NO-2-N,5154罗秀针等:反硝化细菌的筛选及其亚硝酸盐降解特性研究,NO-2-N。2　NO-2-NTable2　Effectoffillvolumeinflaskonnitritedegradation(mL)(%)OD6003046.53±0.011.245049.58±0.021.097051.91±0.020.8610070.54±0.020.543　结论与讨论,JN1NO-2-N,(1000～4000mg·L-1)JN1,5000mg·L-1,,1000～4000mg·L-1,NO-2-N,,NO-2-N,85%。JN15%(v/v)。NO-2-N。5%(v/v)NO-2-N。30mL/250mL,NO-2-N,46.53%。JN1NO-2-N,JN1NO-2-N。,NO-2-N,,()NO-2-N,JN1NO-2-N,。,JN1、NO-2-N,,。:[1],,,.[J].,2004(9):41-43.[2],,,.[J].,2006,30(4):466-470.[3].[J].,1997,17(1):17-20.[4],,.[J].:,2008,31(4):467-471.[5],,,.[J].,1995,16(6):21-23.[6]RE,NE.[M].8.:,1984.[7].[M].3.:,1989:260-263.(责任编辑:林海清)516福建农业学报25