富油微藻筛选及油脂组分与影响因素研究

青岛科技大学硕士学位论文富油微藻筛选及油脂组分与影响因素研究姓名：孙珊申请学位级别：硕士专业：发酵工程指导教师：田黎20090418富油微藻筛选及油脂组分与影响因素研究作者：孙珊学位授予单位：青岛科技大学相似文献(10条)1.期刊论文李植峰.张玲.沈晓京.赖炳森.孙树秦四种真菌油脂提取方法的比较研究-微生物学通报2001,28(6)采用索氏法、超临界CO2萃取法、酸热法和有机溶剂法分别提取雅致枝霉、拉曼被孢霉、少根根霉、畸雌腐霉和橙黄红酵母的油脂,从样品要求、最小样品量、仪器要求、处理样品能力及油脂得率等方面对4种提取方法进行综合评价,并对索氏法、超临界CO2萃取法和酸热法提取的雅致枝霉油脂的脂肪酸组成进行气相色谱分析.索氏法的油脂得率最高,但耗时较长;超临界CO2萃取法和酸热法的油脂得率相近,较索氏法略低,但酸热法更为简便,单位时间内样品处理能力强;有机溶剂法提取效果最差.我们建立的酸热法是一种适合油脂及多不饱和脂肪酸高产菌株筛选的简便、有效的真菌油脂提取方法.2.期刊论文曹健.汪晨辉.曾实.赵文杰.白爱英卷枝毛霉Mucorcircinelloides3.2208油脂几种提取方法的比较-中国油脂2004,29(4)以卷枝毛霉Mucorcircinelloides3.2208为产油菌株,分别以索氏提取法、研磨法、酸水解法对其进行油脂提取,通过结果分析得出,酸水解法是一种简便、快捷的油脂提取方法,其油脂得率与索氏提取法相等,但多不饱和脂肪酸的提取效果较索氏提取法好.3.学位论文齐沛沛微藻油脂制备生物柴油研究2008本研究旨在开发一种富含油脂的微藻资源来制备生物柴油,从以下四个方面对微藻小球藻进行了系统的研究:微藻的培养及培养条件优化、微藻油脂提取条件研究、富含油脂微藻培养条件探讨、微藻油脂制备生物柴油及产品性能研究,主要结果如下:三株小球藻(Chlorellaspp,Chlorellasorokiniana,Chlorellavulgaris)生长和繁殖的适宜培养条件为:培养基为BG11,接种密度0.25(OD540nm),初始pH8,培养温度25℃,光照强度35001ux～45001ux,尿素均为三者更适宜的氮源,适宜的氮含量依次为0.125g/l、0.0625g/l、0.125g/l.微藻油脂提取适宜的方法为溶剂浸提法,以石油醚乙醚(体积比2:1)混合液为浸提溶剂,在40℃水浴中浸提5h.通过对不同培养条件下微藻的油脂得率的研究,确定了三株微藻最佳的富集油脂的条件;采用气质联用和气相色谱法分析了微藻的主要脂肪酸组成及含量,结果表明三株小球藻的主要脂肪酸组成均为C16和C18脂肪酸.将微藻生长的最适条件与富集油脂条件综合考虑,筛选出富含油脂的微藻藻株为Chlorellaspp,其优化的培养条件为:初始pH8,温度25℃、光照强度35001ux、以硝酸钠为氮源并使其含氮量为0.25g/l,在此条件下,微藻油脂含量高达43.7％.采用碱催化转酯化法将微藻油脂制备成生物柴油,并测定该生物柴油产品的主要性能指标:密度、运动黏度、燃烧值、闪点、酸值及十六烷值,结果表明,以微藻油脂制备的生物柴油符合生物柴油国家标准GB/T20828-2007和美国标准ASTM6751-03,可作为燃料使用.4.期刊论文高适.邬建国.刘平.李淑钰.GAOShi.WUJian-guo.LIUPing.LIShu-yu刺孢小克银汉霉产油脂的提取方法研究-湖北工业大学学报2008,23(5)以刺孢小克银汉霉为载体,在分离有机溶剂的方法、不同溶媒、溶媒配比、酸热时间和次数方面对提取油脂的传统酸热法进行了改进研究,获得了新的酸热法,并将其与索氏提取法进行了含油率和气相色谱后成分的比较分析.新的酸热法,采用抽滤分液和正己烷、乙醇按2:1混合萃取,两次热冷破壁.与传统的酸热法相比较,更为安全,简便,省去了离心的过程.油脂得率提高了20.71%;与索氏提取法进行比较:新酸热法单位时间处理能力是索氏提取法的96倍,设备要求低.它的油脂得率能达到索氏提取法的95%以上,GLA的含量较索氏提取法高出了17.45%,是一种真正高效、快速的能运用于工业化的提取方法.5.学位论文潘艳丽火龙果种仁及其种仁油脂提取方法的研究2004该论文研究了火龙果种仁的营养成分,初步探讨了正己烷、超临界和微波萃取火龙果种仁油脂的条件,对超临界和微波分别萃取的火龙果种仁油脂的成分和性质进行了比较.该论文的具体研究内容和结果如下:该论文首次对火龙果种仁的营养成分进行了分析,实验结果表明火龙果种仁的主要营养成分为:水分5.80g/100g,蛋白质22.06g/100g,脂肪32.02g/100g,淀粉21.03g/100g,灰分3.18g/100g,粗纤维6.76g/100g,还原糖0.78g/100g,总糖1.75g/100g.火龙果种仁蛋白质中氨基酸种类齐全.谷氨酸含量最高占氨基酸总量的23.36﹪,鲜味氨基酸占氨基酸含量的37.65﹪,甜味氨基酸占氨基酸含量的9.04﹪.火龙果种仁的八种必需氨基酸的含量为25.23﹪;如果加上半必需氨基酸组氨酸,则必需氨基酸的含量为30.24﹪;火龙果种仁氨基酸的第一限制氨基酸为赖氨酸Lys,种仁氨基酸的评分为30.正己烷提取火龙果种仁油脂的优选方案为:提取温度为50℃,溶剂比为1:6,提取时间为60min,在此条件下火龙果种仁油脂提取的产率为29.3﹪;影响提取产率大小的因素顺序为:温度溶剂比时间.超临界萃取压力分别为15、20、25、30Mpa,随着萃取压力增大火龙果种仁油脂的量也逐渐增加.微波萃取火龙果种仁油脂的优选方案为:萃取功率为495W,萃取溶剂比为1:16,萃取时间为60s,此条件下的油脂萃取的产率为30﹪;影响萃取产率大小的因素顺序为:功率溶剂比时间;在微波萃取过程中温度随着功率的增大而上升,并且微波萃取产率随着温度增大.超临界萃取得到的火龙果种仁油中含有八种脂肪酸,其中4种为不饱和脂肪酸,不饱和脂肪酸含量高达80.83﹪;微波萃取得到的火龙果种仁油脂含有九种脂肪酸,其中也有4种为不饱和脂肪酸,不饱和脂肪酸含量为63.75﹪.超临界萃取和微波萃取各有特点:超临界萃取得到的油脂亚油酸含量比较高,微波萃取得到的油脂的多不饱和、单不饱和脂肪酸的比例较好,接近1:1:1;并且比较了超临界萃取和微波分别萃取的油脂的碘价、酸价和皂化价.6.期刊论文许冬倩.郝义波.XUDong-qian.HAOYi-bo一种有效的油脂DNA的提取方法-食品研究与开发2008,29(10)以文献介绍的DNA提取方法为基础.对其中的某些步骤进行了改进,分别提取了市售的几种大豆油,通过含量和纯度检测,并以355启动子作为内源基因检测提取的DNA作为PCR反应模板的可靠性,结果证明:较之于国家标准介绍的DNA提取方法,用改进的方法提取的DNA含量高、纯度高,可以作为PCR反应的模板.7.学位论文王亚食用油DNA提取方法及转基因成分检测技术的研究2007从古至今，植物源性食用油一直是人类得以健康生活的保证。近年来，许多农业公司利用包括转基因技术在内的现代生物技术开发新的植物品系。由于转基因植物存在的安全性问题使得转基因农作物的标签问题成为公众关注的主要热点，已有30多个国家制定了相应的法律法规对转基因作物及其衍生产品进行标签。目前，许多未经标签和认证的转基因生物及其深加工产品可能已经进入中国市场，这就迫切地需要合适的检测手段以确定这些食品中是否含有转基因成分。以油脂为材料提取DNA进行分子生物学研究的关键是能否提取到高质量的油脂DNA。自DNA分析技术兴起后，国内外在这方面做出了巨大的成就，发展了多种转基因食品DNA检测方法。但仍存在以下问题：①各种提取方法通用性不好。在许多实验中存在扩增成功率在物种和食品种类之间的差异。虽然专用DNA提取试剂盒有较好的通用性，但昂贵的价格限制了该试剂盒的广泛应用，因此构建一套效果好、通用性好、性价比高的油脂DNA提取方法，可以大大推进油脂DNA技术的推广。②对外源基因最佳PCR检测方法的摸索，检验灵敏度和效率都不高。本文以4种植物油为材料，分别构建了2种新的DNA提取方法解决现存的问题；分别用普通PCR和降落PCR检测转基因成分，并对其反应体系和条件进行优化，主要结果如下：1、本论文中构建的改进型CTAB提取方法广泛适用于各种植物油DNA提取，仅一次提取即得到高质量的模板DNA，成功率高，一般不需重复提取，对PCR产物的扩增结果也证实了方法的可靠性和通用性。虽然有些公司的油脂DNA提取专用试剂盒也有着较好的通用性，但其昂贵的价格(25元/次)使其在大量分析样品时受到很大的限制。与之相比，本方法成本低廉，每提取一个样品的成本低于3元，用实验室常用试剂即可完成油脂DNA提取，同时产物纯度高于专用试剂盒。即拥有超过专业试剂盒的提取效果，又尽可能的降低了实验成本，真正实现了实验室通用性，有利于油脂DNA技术的迅速推广。2、本研究中还利用快速蛋白液相色谱法(FastproteinliquidchromatographyFPLC)，通过阴离子交换柱分离纯化DNA，提高了产物的纯度，关键是可以把完整基因组DNA与DNA片断分开，同时节省了提取时间，回收率高，适宜少量样品的快速DNA提取。3、通过优化实验对普通PCR法检测外源基因进行分析，得出以下最佳反应条件：①Mg,2+浓度为2.5mmol/L、引物浓度为0.1μmol/L．至0.4μmol/L、dNTPs浓度200μmol/L，Taq酶添加量为5U。最佳退火温度为54.8℃(CaMV35S)和53.2℃(NOS)。4、通过优化实验对降落PCR法检测外源基因进行分析，并与普通PCR法作比较，证明了TD-PCR明显提高了普通PCR检测特异性和效率，更大程度上避免了假阳性产物的存在，可提供一种比普通PCR更可靠灵敏的转基因成分定性检测方法。8.期刊论文马建设.韩方方.叶海仁.周茂洪.黄可新.赵肖为.MAJianshe.HANFangfang.YEHairen.ZHOUMaohong.HUANGKexin.ZHAOXiaowei裂殖壶菌油脂提取方法的研究-温州大学学报（自然科学版）2009,30(6)比较了有机溶剂提取法、酸热法和超声波提取法对于裂殖壶菌油脂的提取能力.酸热法和超声波提取法的提取得率高于有机溶剂提取法.当氯仿和甲醇以1:1的体积比混合时,油脂提取得率最高.当氯仿和甲醇以2:1的体积比混合时,提取所得油脂中的DHA含量最高.但总提取得率还是以氯仿和甲醇的体积混合比为1:1时为最佳.9.期刊论文朱振宝.易建华.田呈瑞.ZhuZhenbao.YiJianhua.TianChengrui提取方法对核桃油特性的影响-食品与发酵工业2005,31(9)研究了不同方法提取的核桃油脂的主要理化特性,分析测定了3种提取方法所得核桃油脂的脂肪酸组成和含量、VE组成和含量、磷脂的含量以及油脂的氧化稳定性.结果表明:超临界CO2流体萃取法提取的油脂质量明显优于压榨法和有机溶剂浸出法所得油脂,其具有色浅、酸价、皂化价低、过氧化价低的特点,但其抗氧化性能较低.核桃油中不饱和脂肪酸含量高,容易氧化,应采取措施防止其氧化.10.学位论文李小华非洲山毛豆种子成分分析及其油脂和蛋白质的研究2009以野生非洲山毛豆种子为材料，分析其常量化学成分、种子特征物理常数、黄酮含量和油脂提取工艺，并通过气相色谱-质谱和液相色谱-电喷雾离子源-离子阱质谱技术测定其油脂的脂肪酸与甘油酯组成以及清除自由基活性，对油脂进行营养评价。研究山毛豆种子蛋白质的提取工艺、组成和组分蛋白的功能特性，分析了其氨基酸组成，进行了蛋白质体外模拟消化，酶法水解蛋白质等实验。结果表明：（1）种子的粗脂肪和粗蛋白质含量较高。紫外分光光度法测得山毛豆种子的黄酮含量为7.777mg/g，乙醚提取物的黄酮含量为17.172mg/mL，乙醚提取残余物的黄酮含量为6.426mg/g。与其他食品原料如大豆等比较，山毛豆含有较多的黄酮类物质。（2）乙醚为非洲山毛豆种子油