第46卷第4期西安建筑科技大学学报(自然科学版)Vol.46No.42014年8月J.Xi'anUniv.ofArch.&Tech.(NaturalScienceEdition)Aug.2014给水塑料管材生物稳定性快速评价方法的建立与运用文刚,黄廷林(西安建筑科技大学环境与市政工程学院,陕西西安710055)摘要摘要摘要摘要::::给水塑料管材的生物稳定性直接影响供水水质.建立了评价饮用水塑料管材生物稳定性的新方法(BioMig),并使用该方法评价了典型塑料管材的生物稳定性.该方法主要由迁移实验、生物膜形成实验、病原菌形成潜能和毒性评价组成.该方法具有操作简单、易于推广、灵敏度高、重现性好等优点.研究结果表明:管道材料PEX-a和PEX-c具有很好生物稳定性,而密封材料EPDM2%却具有很高的微生物再生长潜能.除EPDM20%外的其它管材均能支持三种病原菌的生长,其中P.aeruginosa比E.coliO157和V.cholerae在迁移水中具有更高的生长潜能.EPDM20%具有很高的有机物释放潜能,但由于其毒性作用抑制微生物在溶液及其表面生长.关键词关键词关键词关键词::::塑料管材;生物稳定性;测试方法中图分类号中图分类号中图分类号中图分类号::::TU991文献标文献标文献标文献标志志志志码码码码::::A文章编号文章编号文章编号文章编号::::1006-7930(2014)04-0578-05饮用水输配过程可能会导致水质恶化,例如部分管材会释放污染物,如嗅味[1]、有毒有害物质[2]或支持微生物再生长[3].塑料管材由于良好的抗腐蚀性和低廉的价格,在过去20年被广泛用作给水管材[4].大多数高分子聚合物均含有有机添加剂,如软化剂、润滑剂、抗氧化剂和稳定剂等,而这些物质与水接触时可能会释放到水中,一部分物质对细菌的生长具有毒害作用而另外一部分对细菌生长具有促进作用[5-6].对于不采用消毒剂或消毒剂浓度非常低的管网系统,塑料管材的生物稳定性至关重要.目前用于评价饮用水塑料管材是否适合在给水输配中的使用,主要基于两种测试方法:(1)塑料材料迁移到水中的物质,通常以总有机碳(TOC)含量的高低来表示塑料材料释放有机物的潜能[7];(2)微生物在塑料材料表面的生长潜能,如英国的MDOD方法[8],德国的W270方法[9],荷兰的BPP方法[10]等.但这些方法都存在一些缺点,如方法灵敏度低,需要很长的测试时间,很难重现等.本研究提出了将迁移测试和生物膜形成测试两种方法同时运用于塑料管材生物稳定性的评价,形成了目前的方法-BioMig.该方法主要包括两部分,第一部分是迁移实验(Migrationtest),用来评价塑料管材的生物稳定性和毒理学特性,包括塑料管材释放有机物的潜能(TOC含量)和微生物再生长的能力(AOC含量).第二部分是生物膜形成实验(Biomasstest),用来评价塑料管材的长期生物稳定性.BioMig方法还可以评价管材的病原菌再生长潜能(PGP)、释放的有机物对微生物的毒理作用,即BioMig方法可以根据需要进行组合.1实验材料与方法实验材料与方法实验材料与方法实验材料与方法1.11.11.11.1测试样品的准备测试样品的准备测试样品的准备测试样品的准备以常见的几种塑料材料为研究对象,其特性见表1.塑料材料的清洗方式为:先用自来水冲洗表面的杂质,然后在超纯水中浸泡1h,超声波水浴中清洗10min,最后用超纯水再次进行清洗,每个测试的塑料的表面积为100cm2,在250mL测试瓶中进行.玻璃器皿的清洗:首先用0.2M盐酸溶液浸泡24h去除无机污染物,然后将水烘干,最后在500℃高温加热2h去除有机污染物.实验中涉及到的塑料瓶盖、弹簧以及用于生物膜脱落实验的组件,首先在0.2M盐酸溶液中浸泡24h去除无收稿日期收稿日期收稿日期收稿日期::::2014-02-17修修修修改改改改稿日期稿日期稿日期稿日期::::2014-07-20基金项目基金项目基金项目基金项目::::国家自然科学基金资助项目(51308438);教育部博士点新教师资助项目(20136120120002);陕西省教育厅重点实验室资助项目(13JS047);陕西省教育厅专项基金资助项目(2013JK0883)作者简介作者简介作者简介作者简介::::文刚(1983-),男,博士,讲师,主要从事高级氧化和生物稳定性的研究.E-mail:hitwengang@163.com材料缩写材料全名添加剂样品形状饮用水应用是否合格PVC-P聚氯乙烯增塑剂平板2mm阳性对照否PB聚丁烯无管状和平板管材是PEX交联聚乙烯无管状管材是EPDM2%三元乙丙橡胶2%增塑剂平板2mm密封圈是EPDM12%三元乙丙橡胶12%增塑剂平板2mm膜材料否EPDM20%三元乙丙橡胶20%增塑剂平板2mm密封圈否表表表表1.塑料管材的特性塑料管材的特性塑料管材的特性塑料管材的特性Tab.1Propertiesofpolymericmaterialsinthisstudy第4期文刚,等:给水塑料管材生物稳定性快速评价方法的建立与运用579机污染物,然后在过硫酸钾(100g/L)溶液中(60℃)反应1h去除有机物,最后用超纯水清洗,风干[11].1.1.1.1.2222迁移实验迁移实验迁移实验迁移实验首先将测试材料清洗干净,清洗的方法是用自来水清洗材料表面,然后换超纯水用超声波清洗器清洗10min,倒掉该水样.在测试玻璃瓶中放入待测的材料,加入100mL用0.22µm滤膜过滤的Evian水,在60℃浸泡24h,将第一次的浸泡液倒掉,再加入100mL用0.22µm滤膜过滤的Evian水,连续进行7次实验(M1-M7),每次实验结束后更换0.22µm滤膜过滤的Evian水,每次实验结束后的水溶液(M1-M7)分别测定TOC,AOC,PGP.每个测试样品至少需要进行2次重复实验.1.31.31.31.3生物膜形成实验生物膜形成实验生物膜形成实验生物膜形成实验将清洗干净的测试材料置于250mL反应瓶中,加入100mL用0.22μm滤膜过滤的Evian水,在60℃浸泡24h,然后将第一次的浸泡液倒掉,加入0.22μm滤膜过滤的Evian水,再加入接种液,接种液初始浓度为1×104cells/mL,在30℃中培养2周.实验结束后,需要测定液相中和材料表面的细菌总量,以及溶出到水体中的有机碳(DOC)含量.生物膜形成实验中使用玻璃和PVC-P分别作为阴性和阳性对照,每个测试样品需要重复2-3次实验.1.41.41.41.4病原菌生长潜能病原菌生长潜能病原菌生长潜能病原菌生长潜能采用水中三种常见的病原菌(EscherichiacoliO157,VibriocholeraEl-Tor和Pseudomonasaeruginosa)测定迁移到水中有机物的病原菌生长潜能(PGP)[12].病原菌生长潜能的测定原理和AOC测定一致,分别使用这三种病原菌代替了土著菌进行实验,实验中需要防止其它细菌的污染.三种病原菌在进行该实验前需要进行预培养以适应贫营养环境.三种病原菌的初始接种浓度为1×103cells/mL,在30℃避光培养至稳定期(7d),用流式细胞仪测试法定量水中病原菌的数量和尺寸.1.1.1.1.5555塑料材料的毒性评价塑料材料的毒性评价塑料材料的毒性评价塑料材料的毒性评价细菌能否在塑料材料的迁移溶液中或材料表面进行生长,取决于塑料材料释放的TOC含量和释放有机物的微生物可利用性,除碳之外其它的元素是否充足和释放的有机物的毒性决定.评价材料的毒性方法主要包括:(1)在迁移水中生长细菌的细胞膜完整性,主要采用SYBGGreenI和PI联合染色,表征细菌细胞膜完整性[13];(2)共聚焦激光扫描显微镜观察细菌的生理特性[14].1.61.61.61.6可同化有机碳的测定可同化有机碳的测定可同化有机碳的测定可同化有机碳的测定取20mL用0.22μm滤膜过滤的待测水样,70℃灭菌1h,冷却至室温后接种Evian水并加入矿物元素,天然菌的初始浓度为5×103cells/mL,在30℃培养至细菌达到稳定期,用流式细胞仪测定细菌总数.在测定AOC过程中如果水样中有残余氧化剂,需要用无机还原剂进行终止.AOC的浓度用统一的转换系数1×107cells/μgAOC进行计算[11].2典型塑料管材的生物稳定性评价典型塑料管材的生物稳定性评价典型塑料管材的生物稳定性评价典型塑料管材的生物稳定性评价2.12.12.12.1迁移实验结果迁移实验结果迁移实验结果迁移实验结果迁移实验结果如图1所示,包括了阴性对照(玻璃)、阳性对照(PVC-P)、两种管道材料(PEX-a和PEX-c)和两种管道密封材料(EPDM2%和EPDM20%)七次连续迁移实验的结果.在阴性对照中,随着迁移步骤进行,TOC和AOC变化很小,TOC的平均浓度为0.18mg/L(n=50)而AOC的浓度为0.04mg/L(n=40),在样品测试过程中,均已扣除了阴性对照的数值.除阴性对照外,其余材料随迁移步骤的进行,TOC和AOC的浓度均逐渐降低.管道材料PEX-a和PEX-c释放的TOC浓度非常接近,但是AOC浓度不同,PEX-a中仅有约30%的TOC为AOC,而对于PEX-c却有超过80%的TOC为AOC.此外,与PEX-c相比较,PEX-a释放TOC的速率更加快,M7溶液的TOC和AOC均已经接近检测限.对于这两种PEX材料,7次迁移实验后其TOC含量均低于0.5mg/L,满足德国饮用水标准[9].EPDM2%比PEX材料释放的TOC高2-3倍,有50%的TOC能够被微生物利用.EPDM20%释放更多的有机物,在相应的迁移步骤中TOC浓度高0.00.20.40.60.81.0Negativecontrol0.20.40.60.8PEX-aTOC-AOC(mgL-1)M1M2M3M4M5M6M70.00.20.40.60.81.0PEX-c0.20.40.60.81.0PositivecontrolEPDM20%EPDM2%01020304050TOC-AOC(mgL-1)M1M2M3M4M5M6M701020304050图图图图1TOC和和和和AOC连续迁移实验结果连续迁移实验结果连续迁移实验结果连续迁移实验结果Fig.1TOCandAOCinthesevenmigrationwaters580西安建筑科技大学学报(自然科学版)第46卷表表表表2三种塑料材料支持病原菌生长潜能和消耗的有机物占三种塑料材料支持病原菌生长潜能和消耗的有机物占三种塑料材料支持病原菌生长潜能和消耗的有机物占三种塑料材料支持病原菌生长潜能和消耗的有机物占AOC的比例的比例的比例的比例Tab.2GrowthpotentialofanestimatedfractionofAOCconsumedbythethreepathogensonorganiccarboncompoundsmigratingfromplasticmaterials参数PEX-aPEX-cEPDM2%DOC(mg/L)0.170.620.83P.aeruginosaPGP(105cells/mL)1.55±0.108.50±0.406.50±0.20AOC消耗(%)36±1.488±1240.5±1.8V.choleraPGP(105cells/mL)1.35±0.106.30±0.881.80±0.01AOC消耗(%)26.5±1.742.1±3.516.8±0.6E.coliO157PGP(104cells/mL)4.80±1.0010.10±2.107.30±0.09AOC消耗(%)17.8±0.418.8±0.616.9±0.3100~200倍,但是该材料释放的有机物不能支持微生物生长.综上所述,迁移实验结果可以表征塑料材料的有机物释放潜能和微生物可利用性.2.2.2.2.2222生物膜形成实验结果生物膜形成实验结果生物膜形成实验结果生物膜形成实验结果迁移实验主要通过短期实验来评价材料释放的有机物特