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AxioVertA1倒置显微镜操作指南一、显微镜主要观察方法简介明场：适合常规镜检、病理、染色样品的观察方法。此观察方法优点是视野亮度高、均匀，应用范围广，操作简单。缺点是：透明标本对比度低，标本没有立体感。荧光：物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为高能状态，再回到低能状态时释放出的光，是非温度辐射光——冷光。即：物质吸收短波光，发射出的长波光。荧光显微镜利用荧光光源激发样品中的荧光物质，检测激发光的情况。微分干涉PlasDIC：采用新型光学设计，可观察塑料培养器皿，可以使被检物体产生没有光晕的三维立体像。三、系统开关机（一）开机顺序1．打开显微镜电源开关2.不拍荧光直接第3步，拍荧光时打开荧光光源（X-Cite200DC，图片为120型号）注意：使用X-Cite200DC操作时不要用力拉扯弯折液态光导管3．打开电脑及显微镜软件ZEN2012（二）关机顺序：先关软件，然后将显微镜光源电压调低、关闭电源。四、明场观察成像操作流程1.调节光强，光路100%转到目镜，低倍（如10X倍）下观察样品，通过移动载物台至目标位置，并通过粗细调焦旋钮聚焦，然后再调至高倍。不同倍数下调节聚光镜孔径光阑大小已获得最佳的衬度2.准备拍照，首先光路切换至相机，打开软件，点开Live（预览）按钮3.先曝光——对照Live结果进一步精细聚焦——调节曝光时间——如果彩色模式拍照需要做自动或手动白平衡——再次曝光后——Snap成像——保存Save五、微分干涉PlasDIC观察操作流程1.将聚光镜上PlasDIC狭缝插板推入光路，孔径光阑调至最大2.将物镜转换器下方的PlasDIC检偏模块推入光路，调节光强，找到样品聚焦清晰后调节PlasDIC上的调节螺钉直至呈现最佳的立体效果。六、荧光观察成像操作流程1.开荧光光源（五级可调，100%、50%、25%、12%、0）2.先按明场观察方法找到阳性信号3.关闭卤素灯，打开荧光灯光闸4.荧光滤片组根据标记染料的颜色打到FITC（绿），Rhod（红）或DAPI（蓝）等八，单张图片的拍摄1.Locate窗口点击Live2.SetExpoure自动曝光或者Camera窗口选择手动曝光(拖动横杆或者输入准确的曝光值)3.Camera里面选择1388x1024的分辨率，(如果是明场图片，点击Whitebalancemode中Auto或者Pick进行自动白平衡或者手动白平衡)，最后点击Snap。