荧光淬灭荧光猝灭分为静态淬灭和动态淬灭荧光猝灭•荧光猝灭(fluorescencequenching)是指荧光物质分子与溶剂分子之间所发生的导致:荧光强度变化或相关的激发峰位变化或荧光峰位变化物理或化学作用过程。•与荧光物质分子发生相互作用而引起荧光强度变化和相关的激发峰位和荧光峰位变化的物质被称为荧光猝灭剂•利用某种物质对某一种荧光物质的荧光猝灭作用而建立的对该猝灭剂的荧光测定方法,即为荧光猝灭法。一般而言,荧光猝灭法比直接荧光测定法更为灵敏,具有更高的选择性。动态猝灭•激发态荧光分子与猝灭剂碰撞使其荧光猝灭则称为动态猝灭。静态淬灭•基态荧光分子与猝灭剂之间通过弱的结合生成复合物,且该复合物使荧光完全猝灭的现象称为静态猝灭。•静态猝灭的特征是基态荧光分子M和猝灭剂Q发生反应,生成非荧光性物质,使M失去光谱特性。动态猝灭的特征是激发态M*和Q碰撞,发生能量或电子转移从而失去荧光性,或生成瞬时激发态复合物MQ*,使荧光分子M的荧光猝灭。动态猝灭通常并不改变M的吸收光谱。PET光致电子转移•分子经过特定波长的电磁波(可视光,紫外光等)照射后发生的分子内部电子转移现象。PET光致电子转移•典型的光诱导电子(photoinducedelectrontransfer,PET)转移体系是由包含电子给体的受体部分R(receptor),通过间隔基S(spacer,如一CH2一)和荧光团F(fluorophore)相连而构成的。其中荧光团部分是能吸收光和发射荧光的场所,受体部分则用来结合客体,这两部分被间隔基隔开,又靠间隔基相连而成一个分子,构成了一个在选择性识别客体的同时又给出光信号变化的超分子体系。PET荧光分子探针中,荧光团与受体单元之间存在着光诱导电子转移,对荧光有非常强的淬灭作用,通常是电子从供体转移到激发态荧光团。因此在未结合客体之前,探针分子不发射荧光,或荧光很弱。一旦受体与客体相结合,光诱导电子转移作用受到抑制,甚至被完全阻断,荧光团就会发射荧光。