检测中心微生物文件文件编号:OLQ-JLZ001菌落总数测定操作规程第1页共1页颁布日期:2011年1月10日适用范围:食品检样经过处理,在一定条件下培养(如培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等),所得1m1(g)检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果,只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。操作内容:1、检验程序:检样→做成几个适当倍数的稀释液→选择2-3个稀释度各取1ml分别加入灭菌培养基内→每皿内加入适量营养琼脂(36±1℃,24±2h)→菌落计数→报告2、操作方法:2.1以无菌操作,将检样25g(ml)放于含有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。2.2用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管混均,做成1:100的稀释液。2.3另取1ml灭菌吸管,按上条操作顺序,做10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次,即换用1支1ml灭菌吸管。2.4根据食品卫生标准要求或对检污染情况的估计,选择2-3个适宜稀释度,分别在做10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌培养皿内,每个稀释度做2个培养皿。2.5稀释液移入培养皿后,应及时将凉至46℃营养琼脂培养基注入培养皿约15ml,并转动培养皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液灭菌培养皿内作空白对照。2.6待琼脂凝固后,翻转平板,置36℃±1℃温箱内培养48h±1h3、菌落计数方法:3.1做平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜,以防遗漏。在记下各平板的菌落后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。