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东胜创新生物科技有限公司东胜创新生物科技有限公司OpticonOpticon及及OpticonOpticon22实时荧光定量实时荧光定量PCRPCR仪介绍仪介绍聂尚海博士2东胜创新东胜创新仪之仪之图片图片生产商：美国MJResearch公司3东胜创新东胜创新仪之仪之组成介绍组成介绍热循环仪（PCR仪）荧光检测系统计算机及软件系统4东胜创新东胜创新仪仪热循环仪（PCR仪）荧光检测系统计算机及软件系统5东胜创新东胜创新仪仪加热方式：水加热空气加热电热丝加热半导体+电热丝加热致冷方式：水致冷空气致冷压缩机致冷半导体致冷6东胜创新东胜创新加热:电热丝+半导体制冷:半导体7东胜创新东胜创新仪结构：三传感器双区域温度-----温度梯度8东胜创新东胜创新、温度变化曲线比较II、温度梯度曲线MJResearch特点：同时到达目标温度以保证：延伸时间基本相同实验结果可信度高实验重复性好Column1Column2Column3Column4Column5Column6Column7Column8Column9Column10Column11Column129东胜创新东胜创新仪之仪之热循环仪优点热循环仪优点优点：体积小控温快速准确精确性、均一性能良好主动致冷，可低于室温带温度梯度11东胜创新东胜创新仪之仪之组成介绍组成介绍热循环仪（PCR仪）荧光检测系统计算机及软件系统12东胜创新东胜创新仪之仪之光源及检测器光源及检测器光源：钨灯氩离子激光发光二极管(LED)检测器：摄像头(CCD)光电二极管光电倍增管(PMT)14东胜创新东胜创新优势价格便宜寿命长稳定体积小产热少劣势需要滤光片发光二极管（LED）15东胜创新东胜创新仪之仪之光电倍增管（光电倍增管（PMTPMT））优势超灵敏:可检测到单个光子检测线性范围广劣势体积大一次只能读一个样品光电倍增管(PMT)16东胜创新东胜创新™™蓝色LED（96个）96个发光管依次发光，每个2ms扫描的各种参数都可控每2秒钟扫描96个样本17东胜创新东胜创新仪之仪之检测系统检测系统--------结构结构绿色LED阵列（96个）96个发光二极管依次发光，每个1-100,000ms扫描的各种参数都可控每2秒钟扫描96个样本双PMT检测器18东胜创新东胜创新仪之仪之检测系统检测系统--------小结小结不产热的光源---发光二极管（LED）灵敏度高的检测器---光电倍增管（PMT）19东胜创新东胜创新仪之仪之检测器优点检测器优点优点：不产热---无散热装置，全封闭无机械转动装置---抗震性强，无需经常校准，耐用灵敏度高线性范围广20东胜创新东胜创新仪之仪之组成介绍组成介绍热循环仪（PCR仪）荧光检测系统计算机及软件系统21东胜创新东胜创新监控软件Opticon2WindowsNT4.0;Option1.04监控软件Opticon操作系统光盘刻录机光驱15英寸液晶，VIEWSONIC显示器40G硬盘128兆内存奔腾四1.7GCPUIBM原装计算机22东胜创新东胜创新性能小结性能小结荧光检测热循环仪光色:蓝色光均一性:±0.4°C染料:FAM,SYBRGreenI,MolecularbeaconsTaqManProbes精确性:±0.3°C激发光波长：450-495nm发射光波长:515-545nm升降温速率:最高3°C/秒.灵敏度:5nM的荧光素温度梯度:有检测范围:100-108拷贝容量:96样品反应管:0.2mL反应管&96孔板操作系统:WindowsNT23东胜创新东胜创新荧光检测光色:绿色光染料:第一通道：FAM,SYBRGreen第二通道：VIC,HEX,Joe,TAMRA,ROX等激发光波长：470-505nm发射光波长:523-543nm;540-700nm灵敏度:5nM的荧光素检测范围:100-1010拷贝容量:96样品反应管:0.2mL反应管&96孔板操作系统:WindowsXP24东胜创新东胜创新仪之仪之性能特点性能特点96个绿色LED依次激发样品激发范围:470-505nm通过两个PMT实现同时双色检测，双通道通道一(523-543nm)：FAM,SYBRGreenI通道二(540nm以上)：VIC,HEX,Joe,TAMRA,ROX等25东胜创新东胜创新仪之仪之新增功能新增功能新增分析功能：同时显示双色检测的数据及标准曲线新的基因型分析窗口--CtvsCt及终点分析有单色及双色两种模式26东胜创新东胜创新仪之仪之性能优点性能优点优点：热循环仪技术可靠检测系统不发热，光源瞬时发光无机械转动部分系统经久耐用灵敏度高有温度梯度27东胜创新东胜创新仪之仪之结果分析结果分析--标准定量曲线标准定量曲线原理：初始模板量的对数与C(T)循环数之间呈线性关系荧光强度---循环数曲线初始模板量对数---C(T)循环数标准曲线28东胜创新东胜创新仪之仪之结果分析结果分析--样品模板定量样品模板定量确定初始模板的浓度初始DNA量越多,荧光达到某一值（域值）时所需要的循环数越少Log浓度与循环数呈线性关系，根据样品扩增达到域值的循环数就可计算出样品中所含的模板量29东胜创新东胜创新仪之仪之结果分析结果分析--融解曲线融解曲线溶解曲线分析（Tm）30东胜创新东胜创新仪之仪之监控软件监控软件孔类型空（Empty)空白(Blank)定量标准(Quantitationstandard)样品(Sample)平板设置(PlateSetup)孔描述样品体积定量标准温度（Temperature)读板（PlateRead)梯度（Gradient）融解曲线（MeltingCurve)循环（Goto)主界面(Master)程序程序设置(Protocol)计算（Calculated）模块（Block)温度热盖温度及热盖模式恒温（Constant)随温（Tracking)关闭（Off)32东胜创新东胜创新