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专题二课题1一、选择题1．固体培养基中需要加入琼脂的目的是(D)A．为菌体提供碳源B．为菌体提供氮源C．使培养基保持水分D．使培养基凝固[解析]加入琼脂的主要目的是使培养基凝固。2．现有菌液10mL，按下图进行系列稀释，在最后一个试管中测得细菌数为20个，则未稀释前的试管中有细菌(C)A．600个B．1200个C．2×107个D．2×106个[解析]从本题的图中可看出，每次都是稀释10倍，总共稀释6次，即稀释106倍，最后一个试管中有细菌20个，即原来菌液中应该有细菌2×107个，C正确。3．下列有关平板划线接种法的操作错误的是(D)A．将接种环放在火焰上灼烧B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连[解析]将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他的金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，故A正确；接种环必须冷却后，才可以伸入菌液中蘸取一环液，否则会烧伤或烧死微生物，故B正确；蘸取菌液和划线要在火焰旁进行，防止空气中的杂菌，故C正确；划线时要避免最后一区的划线与第一区划线连，因为最后一区是细菌最稀少的，而第一区是细菌最致密的，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，故D错误。故选D。4．下列关于灭菌的说法中，错误的是(A)A．灭菌是指杀死一定环境中所有微生物的细胞，不包括芽孢和孢子B．对不同的生物材料，应当采取不同的灭菌方法C．培养基一般采取高压蒸汽灭菌法D．高压蒸汽灭菌法最终使菌体蛋白质凝固变性[解析]灭菌是一种严格的使所有微生物(包括胞体、孢子、芽孢等)均死亡的措施。5．利用稀释涂布平板法纯化的大肠杆菌，经培养后发现培养基上出现了多种菌落，不可能的原因是(D)A．培养基制备过程中被杂菌污染B．接种过程中，无菌操作不符合要求C．系列稀释时，无菌操作不符合要求D．大肠杆菌的种类不同[解析]大肠杆菌培养基中出现了多种菌落，说明污染了杂菌，杂菌可能来自培养基，也可能是因为操作过程中无菌操作不符合要求。二、非选择题6．某种产脂肪酶菌常被用作饲料添加剂。下表是从土壤中初筛该菌的培养基配方，请回答下列问题：(NH4)2SO4NaClMgSO4·7H2OK2HPO41%橄榄油蒸馏水pH0.1g0.05g0.01g10g4mL定容至100mL7.0(1)在上述培养基中，橄榄油能为产脂肪酶菌提供__碳源__。为增大产脂肪酶菌的浓度，需用该培养基进行富集培养，富集培养基宜选用液体培养基的原因是__液体培养基能增大菌体与培养基的接触面积，为菌株的生长和繁殖提供更多营养和空间__。(2)用涂布平板法分离产脂肪酶菌时，在上述培养基的基础上，还应加入__琼脂__和溴甲酚紫(碱性条件下呈紫色，在酸性条件下为黄色)。在平板生产脂肪酶菌落的周围会出现黄色圈，原理是__脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸，脂肪酸使溴甲酚紫变为黄色__。筛选时常选择菌落大、黄色圈直径大的菌落，二者分别说明__菌体繁殖能力强、脂肪酶活性高(产脂肪酶能力强)__。(3)菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。在平板上，有的菌落较小，呈乳白色，表面光滑，无丝状物，这些菌落可能为__细菌__(填“细菌”或“霉菌”)。有的菌落连成一片，形成原因最可能是__接种菌液的浓度过高__。(4)研究发现，在饲料中添加产脂肪酶菌剂后，动物的体重明显增加，这说明__脂肪酶菌剂能提高饲料转化率(利用率)__。[解析](1)橄榄油是本培养基中的唯一碳源，能为产脂肪酶菌提供碳源。由于液体培养基能增大菌体与培养基的接触面积，为菌株的生长和繁殖提供更多的营养和空间，所以进行富集培养时宜选用液体培养基。(2)用涂布平板法分离产脂肪酶菌时所用的培养基为固体培养基，所以在上述培养基的基础上，还应加入琼脂。脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸，脂肪酸呈酸性，能使溴甲酚紫变为黄色，因此在平板生产脂肪酶菌落的周围会出现黄色圈。菌落大，说明菌体繁殖能力强；黄色圈直径大，说明所产脂肪酶的活性高或产脂肪酶能力强。(3)菌落较小，呈乳白色，表面光滑，无丝状物，这些特征与细菌的菌落特征相符。平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。如果接种菌液的浓度过高，则会导致菌落在平板上连成一片。(4)在饲料中添加产脂肪酶菌剂后，因脂肪酶能催化脂肪水解，有利于脂肪的吸收，即脂肪酶菌剂能提高饲料转化率(利用率)，导致动物的体重明显增加。