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专题二课题2一、选择题1．关于土壤取样的叙述错误的是(C)A．土壤取样，应选取肥沃湿润的土壤B．先铲去表层土3cm左右，再取样C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D．应在火焰旁称取土壤[解析]取样用的小铁铲和信封在使用前需要进行灭菌处理，C错误。2．PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能忍受93℃左右的高温。如果请你寻找这种耐高温的酶，你会去哪里寻找(C)A．土壤中B．海水中C．热泉中D．冷库中[解析]热泉中的温度较高，可以找到耐高温的酶，C正确。3．需要在火焰旁操作的有(D)①土壤取样②称取土壤③稀释土壤④涂布平板⑤微生物的培养A．①②③④⑤B．②③④⑤C．③④⑤D．②③④[解析]土壤中尿素分解菌的分离和计数中除土壤取样外，其余均需要无菌操作。4．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是(A)A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹红Ⅲ试剂D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂[解析]以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。5．用作土壤分解尿素的细菌的分离与计数的培养基要严格(C)A．防腐B．消毒C．灭菌D．化疗[解析]培养基要采用高压蒸汽灭菌法灭菌。6．甲、乙、丙是三种微生物，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基(如下表)。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖，甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是(D)成分ⅠⅡⅢ粉状硫10g＋＋＋KH2PO44g＋＋＋FeSO40.5g＋＋＋蔗糖10g＋－＋(NH4)2SO40.4g－＋＋H2O100mL＋＋＋MgSO4·7H2O9.25g＋＋＋CaCl20.5g＋＋＋A．甲、乙、丙都是异养微生物B．甲、乙都是自养微生物，丙是异养微生物C．甲是异养微生物，乙是固氮微生物，丙是自养微生物D．甲是固氮微生物，乙是自养微生物，丙是异养微生物[解析]利用不同的选择培养基可分离出我们所需的微生物。从表格中可看出，Ⅰ培养基中无氮源，Ⅱ培养基中无碳源，Ⅲ为完全培养基。由此可知，能在Ⅰ中生存的甲只能是固氮微生物，能在Ⅱ中生存的乙是自养微生物，丙只在Ⅲ中存活，为异养微生物。7．从土壤中分离能分解尿素的细菌，可以利用选择培养基，其成分中一定有(A)①尿素②有机氮化物③无机盐④有机碳化物⑤水⑥无机碳化物A．①③④⑤B．②③④⑤C．①③⑤⑥D．②③⑤⑥[解析]本题考查选择培养基的成分。分离分解尿素的细菌需用选择培养基，其中必须将尿素作为唯一氮源。8．实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触)，将平板置于37℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析，以下叙述不正确的是(D)A．链霉素能阻止结核杆菌的生长B．链霉素对结核杆菌比对霍乱菌更有效C．链霉素对结核杆菌比对伤寒菌更有效D．链霉素可以用于治疗伤寒病人[解析]从图中可以看出，这是含有链霉素的选择培养基，接种的三种细菌中，霍乱菌和结核杆菌都可以被杀灭，并且链霉素对结核杆菌杀灭的有效程度大于霍乱菌，而伤寒菌照常生长不受影响，所以链霉素不能用于治疗伤寒病人。选项D错。9．在缺乏氮源的培养基上，大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出(C)A．乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌B．固氮细菌、大肠杆菌、放线菌C．固氮细菌、霉菌、放线菌D．固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌[解析]固氮细菌可以在无氮培养基上生长；青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长，但不会抑制霉菌的生长；加入10%的酚的培养基可以抑制细菌和霉菌的生长，但不会抑制放线菌的生长。10．测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是(C)A．细菌个体小，真菌个体大B．细菌易稀释，真菌不易稀释C．细菌在土壤中数量比真菌多D．随机的，没有原因[解析]土壤中的微生物大约70%～90%是细菌，真菌的数量要比细菌少；样品的稀释度越高，在平板上生成的菌落数目就越少；在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30～300，适于平板计数，所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。11．欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作不正确的是(D)A．将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B．同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C．可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照D．用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌[解析]欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，要将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板，同时要将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照，以检查培养基灭菌是否彻底；筛选分解尿素的细菌要用酚红指示剂。12．下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法，不正确的是(D)A．因为土壤中各类微生物的数量不同，所以为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离B．测定土壤中不同微生物的数量，选用的稀释范围不同C．如果得到了2个或2个以上菌落数目在30～300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数D．牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落[解析]样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数目。实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30～300之间适于计数的平板。土壤中不同类型的微生物的数量不同，因此在测定其数量时，选用的稀释范围也不同。将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。二、非选择题13．尿素是一种高浓度氮肥，通过土壤中某些细菌分解为氨后，被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：KH2pO4Na2HPO4MgSO4·7H2O蛋白胨葡萄糖尿素琼脂1.4g2.1g0.2g1.0g10.0g1.0g15.0g(1)根据培养基的成分分析，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？__不能__(填“能”或“不能”)，原因是__尿素不是唯一氮源__。在接种前需要检测培养基灭菌是否彻底，常用的检测方法是__将未接种的培养基在适宜的温度下培养一段时间，观察是否有菌落产生__。(2)要统计每克土壤样品中活菌数目，最好采用__稀释涂布平板__法接种。某同学取稀释倍数为105倍的菌液0.1ml接种后，测得平板上菌落数为156、178和191，则每毫升样品中的菌落数为__1.75×108__。(3)某同学在分离纯化土壤中分解尿素的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，可能的原因是__菌液浓度过高__，为避免此种现象发生，正确的操作方法是__对菌液进行梯度稀释(加大稀释倍数)__。[解析](1)分离尿素分解菌所需要的唯一氮源是尿素，碳源是培养基中的葡萄糖。据表分析，表中的蛋白胨可以为微生物的生存提供氮源，所以不能分离尿素分解菌；检测培养基灭菌是否彻底，可将未接种的培养基在适宜的温度下培养一段时间，观察是否有菌落产生。(2)常用接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法常用来进行微生物的计数，统计平板上的菌落数目可以推测出样品中活菌数。每毫升样品中的菌落数＝(156＋178＋191)÷/3×10×105＝1.75×108个。(3)培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高，为避免此种现象，应对菌液进行梯度稀释。14．(2019·河北省衡水中学高三大联考)科研人员发现，工业污水中有一种极难降解的含氮有机物NS(无色的NS与碘作用可形成蓝色反应)，但可被NS分解菌高效降解。请分析回答下列问题：(1)在筛选NS分解菌的过程中，以NS为唯一氮源的培养基属于__选择__培养基，NS可为NS分解菌提供生长所需的__碳源和氮源__等营养物质。若要对NS分解菌加以纯化并计数，可采用__稀释涂布平板__法接种。(2)NS分解菌培养过程中，获得纯净培养物的关键是__防止外来杂菌的污染(或“无菌技术”)__，为排除杂菌污染，应设置的对照实验是__不接种的空白培养基__。(3)欲鉴定筛选得到的NS分解菌是否具有实用价值，在培养NS分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入__碘__用于颜色反应鉴别NS分解菌。若用上述培养基比较不同菌株降解NS能力的大小，请用简洁的语言写出设计思路：__用含相同NS浓度的上述培养基培养不同菌株，一定时间后，通过测定菌落周围透明圈的大小(或直径)来确定不同菌株降解NS能力的大小__。[解析](1)在筛选NS分解菌的过程中，以NS为唯一氮源的培养基能抑制其他不需要的微生物的生长，而促进所需要的NS分解菌的生长，所以该培养基属于选择培养基；NS是一种含氮的有机物，所以NS可为NS分解菌提供生长所需的碳源和氮源等营养物质。若要对NS分解菌加以纯化并计数，可采用稀释涂布平板法接种。(2)微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的污染(或“无菌技术”)，为排除杂菌污染，应设置不接种的空白培养基做对照实验。(3)无色的NS与碘作用可形成蓝色反应，所以可在培养基中加入碘，以用于颜色反应鉴别NS分解菌；可用含相同NS浓度的上述培养基培养不同菌株，一定时间后，通过测定菌落周围透明圈的大小(或直径)来确定不同菌株降解NS能力的大小。15．随着现代生物技术的不断进步，微生物已经是人类生活和生产中非常重要的资源，它可以肥沃土壤、清洁环境、改善我们的食物、生产药品等。(1)每种微生物的利用，都离不开微生物的分离、提纯和培育。实验室筛选微生物需人为提供有利于目的菌生长的__温度、pH、营养__等条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长，能达此目的的培养基称为__选择培养基__。在实验中，需设置对照组，与实验组不同的是__对照组使用的培养基是牛肉膏蛋白胨培养基__。(2)筛选尿素分解菌可将土壤稀释液经__稀释涂布平板法或平板划线法__接种于__以尿素为唯一氮源__的选择培养基上进行筛选。(3)菌种需临时保藏时，要先将菌种接种到试管的斜面固体培养基上，在__适宜__温度下培养，当菌落长成后放入冰箱保存。(4)在发酵生产中，常用到多种微生物的协同作用，但不同微生物和发酵条件不同。在用苹果制作苹果醋的过程中，先后用到酵母菌和醋酸菌，两者的发酵条件前者是__18～25℃、密闭__，后者是__30～35℃、通入无菌氧气(空气)__。[解析](1)实验室筛选微生物需人为提供有利于目的菌生长的温度、pH、营养等条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长，能达此目的的培养基称为选择培养基，在实验中，为验证培养基能达此目的，设置的对照组与实验组不同的是使用的是牛肉膏蛋白胨培养基。(2)土壤中分解尿素的细菌的分离实验中，应以尿素为唯一的氮源，采用稀释涂布平板法或平板划线法将菌种接种到固体培养基上。(3)菌种需临时保藏时，要先将菌种接种到试管的斜面固体培养基上，在适宜温度下培养，当菌落长成后放入冰箱保存。(4)在用苹果制作苹果醋的过程中，先后用到酵母菌和醋酸菌，两者的发酵条件前者是18～25℃、密闭，后者是30～35℃、通入无菌氧气(空气)。