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专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养第1课时培养基和无菌技术题型一培养基成分及种类分析1．不同培养基的具体配方不同，但所有培养基都含有()A．碳源、磷酸盐和维生素B．氮源和维生素C．水、碳源、氮源和无机盐D．水、碳源、氮源和氧气答案C解析虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。在某些特定培养基中需要维生素等特殊营养物质或氧气等。2．下列叙述正确的是()A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B．培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个菌体答案A解析按物理状态不同，培养基可分为液体培养基、半固体培养基、固体培养基，按用途不同，培养基又可分为选择培养基和鉴别培养基，B错误；固体培养基由于添加了凝固剂琼脂，所以即使加入少量水也不可能制成液体培养基，C错误；单个菌体是肉眼看不见的，由同种微生物的众多菌体构成的菌落是肉眼可以看见的，D错误。3．不同的微生物对营养物质的需求不同。下列叙述正确的是()A．配制培养基时都应该加糖类作为碳源B．同一种物质不可能既作碳源又作氮源C．碳源物质一定也是微生物生长所需能源物质D．氮源物质为该微生物提供必要的氮元素答案D解析不同的微生物对碳源的要求不同，如自养型微生物不需糖类作碳源，A错误；对异养微生物来说，蛋白胨既是碳源，又是氮源，B错误；以糖类等有机碳作碳源时，碳源物质往往也是能源物质，以CO2等无机碳作碳源物质时，碳源物质不是能源物质，C错误；氮源物质在微生物培养中的主要作用是为微生物提供氮元素，D正确。题型二无菌操作4．关于灭菌和消毒的理解，不正确的是()A．灭菌是指杀灭物体内外一切微生物，包括芽孢和孢子B．实验者的双手用酒精消毒C．接种环用灼烧法灭菌D．常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌和紫外线照射等答案D解析灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)，A正确；实验者的双手用酒精消毒，B正确；金属接种工具常用灼烧灭菌法灭菌，C正确；微生物的培养过程中常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等，紫外线照射属于消毒方法，D错误。5．以下部位不含有微生物的是()A．洗干净的脸上B．洗完澡后的皮肤C．刷完牙后的口腔D．灼烧之后的接种环答案D解析灼烧之后的接种环已经灭菌，故不含微生物，A、B、C三项所示内容不是灭菌，D符合题意。6．消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死部分微生物而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理()①皮肤②饮用水③牛奶④注射器⑤培养皿⑥接种环⑦培养基⑧果汁⑨酱油⑩手术刀A．①②③⑧⑨B．④⑤⑥⑦⑩C．①②③④⑤⑥⑧D．以上全部答案A解析皮肤可用酒精消毒，饮用水可用氯气消毒，牛奶采用巴氏消毒，果汁和酱油宜采用消毒方法处理，避免营养成分被破坏，①②③⑧⑨符合题意；注射器需要进行灭菌处理，培养皿可采用干热灭菌，接种环可用灼烧灭菌，培养基、手术刀可采用高压蒸汽灭菌。7．下面对微生物培养中灭菌的理解不正确的是()A．防止杂菌污染B．灭菌就是杀死培养基中的杂菌C．培养基和培养设备等都必须进行灭菌D．灭菌必须在接种前答案B解析培养基和培养设备等都需要灭菌，且消灭全部微生物而不只是杂菌，B错误。8．防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是()A．实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B．在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防被微生物感染C．接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌D．使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境答案C解析为防止杂菌污染，研究和应用微生物时应进行消毒和灭菌，实验室可以用紫外线或化学药物进行消毒，A正确；在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防被微生物感染，B正确；接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰部位灼烧灭菌，C错误；使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境，D正确。9．在生物技术上常利用大肠杆菌制成“工程菌”。某生物小组的同学，利用实验室提供的大肠杆菌品系及其他必要材料，对该品系大肠杆菌进行了培养。请分析回答下列问题：(1)微生物在生长过程中对各种成分的需求量不同，故制备培养基时各成分要有合适的____________。培养基中含有的蛋白胨、淀粉可分别为微生物提供______________、______________。(2)配制培养基时，需将pH调至________或微碱性。(3)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是________________________。答案(1)浓度和比例氮源、碳源和维生素碳源(2)中性(3)高压蒸汽灭菌解析(1)培养基中各成分要有合适的浓度和比例，保证微生物有充足的营养，又不会因外界浓度过大而失水。淀粉提供碳源，而蛋白胨含C、N等元素，既能提供碳源，又能提供氮源和维生素。(2)培养细菌时需将培养基pH调至中性或微碱性。(3)培养基灭菌用高压蒸汽灭菌法。10．请选择合适的无菌操作技术对下列材料或用具进行处理。①牛奶②水源③操作者双手④接种环、接种针⑤玻璃器皿(吸管、培养皿)⑥培养基⑦空气(1)巴氏消毒法：________。(2)化学药剂消毒法：________。(3)灼烧灭菌法：________。(4)干热灭菌法：________。(5)高压蒸汽灭菌法：________。(6)紫外线消毒法：________。答案(1)①(2)②③(3)④(4)⑤(5)⑥(6)⑦解析(1)对于一些不耐高温的液体，如牛奶，则使用巴氏消毒法。(2)操作者双手常用酒精擦拭，水源用氯气消毒，属于化学药剂消毒。(3)接种环、接种针可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，属于灼烧灭菌法。(4)能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等常采用干热灭菌法。(5)培养基常采用高压蒸汽灭菌法。(6)紫外线照射可以杀灭物体表面或空气中的微生物。11．在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题：(1)在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具________(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是________________________________。(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能__________________，在照射前，适量喷洒__________________，可强化消毒效果。(4)水厂供应的自来水通常是经过________(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是____________________。答案(1)可以(2)在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少(3)破坏DNA结构消毒液(4)氯气(5)未将锅内冷空气排尽解析(1)能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)煮沸消毒法即在100℃煮沸5～6min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢；巴氏消毒法即在70～75℃煮30min或在80℃煮15min，可以杀死微生物，并且保证营养物质不被破坏。因此，与煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高温瞬时消毒法的优点是在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少。(3)因紫外线能破坏DNA结构，所以密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒。在照射前，适量喷洒消毒液，可强化消毒效果。(4)通常乙醇消毒有气味，影响水质，不适宜消毒自来水；高锰酸钾本身有颜色，消毒后溶液呈紫红色，无法使用；因此水厂供应的自来水通常是经过氯气消毒的。(5)采用高压蒸汽灭菌时，锅内的水加热煮沸，将其中原有的冷空气彻底排除后才能将锅密闭。如果未将锅内冷空气排尽，则会出现压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度的现象。