•家禽的人工授精技术•家禽精液的保存•影响家禽人工授精的因素第三章家禽的人工授精《养禽学》第一节家禽的人工授精技术一、家禽人工授精的意义(一)提高种禽受精率•火鸡、番鸭、珍贵禽类的繁殖。(二)减少母禽损伤,提高存活率•大型禽类造成种禽受伤,淘汰率增加。(三)减少公禽饲养量,降低生产成本•自然交配:1:10-12,•人工授精:1:30-60。(四)育种工作的需要•充分利用优秀种公禽;•提高后裔测定的准确性。(五)加快种公禽的调换•自然交配一般需要3周以上,•人工授精可控制在1周以内。(六)饲养方式改变的需要•种鸡生产大量采用笼养,•肉用种鸡矮小型品系的应用。二、鸡的采精和输精技术(一)公鸡的采精技术1.种公鸡的选留和训练•选留:•初选:5-6周龄,•第二次选择:16-18周龄,•第三次选择:28-30周龄。•训练:•使用前1-2周,每天采精1次,•固定程序,建立条件反射,•选留和淘汰不良公鸡。2.种公鸡的采精方法•基本原理:刺激公鸡的腰荐部盆神经和腹下交感神经,引起性兴奋,交接器充血射精。•方法:•双人(三人)采精法,单人采精法;•背腹式按摩采精,背式按摩采精。back1:273.采精注意事项•采精前停止喂料:3-4小时。•采精人员相对固定:不同人员差异很大。•采精动作要迅速:几秒钟内采1只鸡。•采精手势要正确:影响精液品质的因素。•采精间隔:隔天采精1次为宜。轻型蛋鸡中型蛋鸡肉用型鸡平均采精量(ml)0.30.50.55采精量范围0.05-0.80.2-1.10.2-1.5精子密度(亿/ml)403035密度范围17-6015-609-50公鸡采精量和精子密度水禽输精器和集精杯公鹅保定公鹅采精操作(二)母鸡的输精技术1.输精方法—需两人配合,保定和输精。•笼养母鸡:•根据笼具的设计确定输精方法。•平养母鸡:•围栏圈住母鸡,进行输精操作。0:392.输精技术要点•翻肛人员不要用力过大,轻捉轻放,输精人员要轻轻插入输精器;•输精要迅速及时,采出的精液须在30分钟内输精完毕。•输精要点•输精时间:应在下午2:00点以后进行;•每次输精量:为原精液量0.025ml,适当稀释,便于剂量;•输精间隔:以4-5天为宜;•集蛋:输精后第3天方可收集种蛋。母鹅输精操作三、家禽精液品质评定(一)精液品质评定原则1.动作迅速2.取样准确3.混合均匀4.避免环境影响(异物、温度、光照、机械、用具等)(二)精液品质评定项目及方法分为三大类别:外观评定、显微镜评定、生物化学评定。1.外观评定•颜色:正常为乳白色或乳黄色。•浓稠度:乳状。•污染度:不能严重污染,观察评定。2.采精量和pH值测定•采精量:稀释后用刻度吸管测定。•pH值:用试纸测定。3.精子浓度估测(使用原精液用显微镜观测)•浓:视野被占满,估计40亿/ml以上。•中:视野有明显间距,20-40亿/ml。•稀:视野有大量空间,20亿/ml以下。4.精子活力测定•正常:沿一直线波浪前进运动。•异常:原地回旋、左右摇摆、震动、凝集现象等。•注意事项:迅速,温度40度左右。5.精子密度实测•方法:计算板测定法(红血球记数器)。•计算公式:C=n/10(1+d)其中:C=精子数(亿/ml),n=5个中方格精子数,d=稀释倍数0:44(一)稀释和液态保存的意义1.扩大容量便于计量,提高利用率;2.延长保存时间,便于操作管理;3.可短距离运输,扩大时间空间;4.目前冷冻保存应用尚有困难;5.探讨精液体外保存条件和保存机理。第二节家禽精液的保存一、家禽精液的稀释和液态保存(二)稀释液的基本功能1.提供能量:葡萄糖、果糖。2.维持pH值:无机和有机缓冲剂。3.渗透压平衡:等渗透压,谷氨酸盐等。4.缓冲有害因子:稀释后冲淡影响。5.增强抗菌能力:抗菌素。•常用稀释液:1%NaCl,5.7%葡萄糖,蛋黄-葡萄糖,Lake液,BPSE液。单位:g,mlLake液Ph7.1的Lake液Ph6.8的Lake液BPSE液葡萄糖0.600.60果糖1.000.50谷氨酸钠(H2O)1.9201.5201.3200.867氯化镁(6H2O)0.0680.034醋酸镁(4H2O)0.0800.080醋酸钠(3H2O)0.5870.430柠檬酸钾0.1280.1280.1280.064柠酸二氢钾0.065柠酸氢二钾1.270氢氧化钠(M)(ml)5.89.0BES/TESB3.050B2.440T0.195稀释液成分(1)稀释剂:等渗NaCl、葡萄糖、果糖,扩大精液量。(2)营养剂:果糖、葡萄糖、脱脂奶、蛋黄、乳糖蜂蜜等,提供外源能量。(3)缓冲剂:PH6.8-7.4对精子无害,主要有磷酸二氢钾和磷酸氢二钾。基本成分:(4)电解质:NaCl、KCl、醋酸钠、醋酸钾、醋酸镁、CaCl、NaCO3、Mg(CO3)2等。(5)抗菌剂:强调采集没有污染的精液,不过分依赖。基本成分:(三)液态保存方法2–5℃低温保存。(四)影响液态保存因素1.精液品质品种、个体、年龄、饲养管理、操作等。2.稀释处理稀释液、pH、渗透压、稀释倍数等。3.保存环境温度、降温速度、光照、保存容器等。(一)冷冻保存的意义1.提高优秀公禽利用率;2.长期保存,基因库保存;3.不受时间地点的影响;4.加快育种进程;5.珍稀和濒危动物保存。二、家禽精液的冷冻保存(二)冷冻保存的原理—精子处于超低温状态,代谢活动处于静止状态,但未死亡;—如果提供一定条件,温度回升,解冻后精子又能恢复活力,并具备受精力。•为什么冷冻解冻后还具备活力和受精力?两种学说:玻璃态学说、冰晶学说1.玻璃态学说:(物质存在形态:气态、液态、固态)•玻璃态:非晶体固态。•物理特性:无严格的晶状结构,没有恒定的冰点,性质接近液态。•形成条件:•从水形成玻璃态,温度必须低于–130℃,且不能结冰。•要求冷冻速度5000℃/秒,即在0.026秒内从0℃降到-130℃。2.冰晶学说:•观点:在冷冻过程中不可避免形成冰晶,关键是不能形成大的冰晶,只要维持稳定的微晶状态,就能使精子细胞得到保护。•特点:•缓慢冷冻、添加防冻剂•原理:精液稀释冷冻后处于一种过冷状态,在冰点温度下仍不结冰,水形成许多小冰晶,在-110℃—-130℃可达到稳定,精子代谢处于静止状态,达到冷冻保存目的。(三)冷冻保存的防冻剂凡多羟基化合物均不同程度具有防冻保护作用(如甘油)。CH2OHHOCHCH2OH三羟基与水分子形成轻键,具有很强的亲水性。•防冻原理:水分子受到防冻剂的牵制,阻抑了结晶过程,降低了冰点温度,出现过冷现象,为微晶形成创造了条件,保护精子度过危险温区。•危险温区:•指水发生强烈结晶过程的温度区域。•在危险温区内,由于冰晶形成发生盐浓缩,损伤细胞的质膜。•范围是:2℃—-30℃。由于防冻剂的存在,可减缓结晶过程,降低危险温区的上限温度,缩短危险温区范围。(四)家禽精液冷冻程序•一般步骤:•降温速度:1℃/分钟。•解冻方法:高温快速(40℃水浴);低温缓慢(2-5℃冰水浴)。精液稀释降温加入防冻剂平衡分装冷冻解冻。(五)冷冻精液的输精•输精方法:—深阴道输精(食指引导法)—子宫内输精(需要有硬壳蛋)—腹膜内输精(输入输卵管伞部)•品质评定:—按常规评定方法进行;—活力0.5级以上可进行输精。1、公鸡因素:遗传、日粮、体质、频率。2、采精技术:条件反射、适宜刺激。3、稀释与保存:操作条件、稀释液组成、样品存放时间等。4、母鸡因素:输卵管状况、母鸡体况。5、输精技术:人员配合、深度、量、间隔。第三节影响家禽人工授精的因素1.家禽采精的常规方法及注意事项;2.家禽常用输精方法及技术要点;3.家禽精液稀释保存的意义及原理方法;4.家禽冷冻保存的基本原理和方法;5.影响家禽人工授精的主要因素。本章主要内容(END)