分子生物学教学大纲(八年制)医学分子生物学》教学大纲(临床医学八年制)课程编号:38030011课程名称:医学分子生物学学分:3总学时:56学时理论学时:40实验学时:16先修课程要求:细胞生物学和生物化学适应专业:临床医学八年制参考教材:1.胡维新主编《医学分子生物学》.北京:科学出版社.20072.冯作化主编.《医学分子生物学》.北京:人民卫生出版社.20053.(美)本杰明·卢因编著.《基因VIII》.北京:科学出版社.20044.RobertF.Weaver编著.《MolecularBiology》(第二版).北京:科学出版社.20025.SambrookandRuussell编著.《MolecularCloning》(第三版).西安:世界图书出版公司.20026.胡维新主编.《医学分子生物学》长沙:中南大学出版社.20017.TimothyM.Cox&JohnSinclair编著.《MedicineMolecularBiology》.北京:科学出版社.20008.冯作化主编.《医学分子生物学》.北京:人民卫生出版社.20019.陈丙莺,陈子兴,主编.《分子生物学基础与临床》.南京:东南大学出版社.200010.张迺蘅主编.《医学分子生物学》.北京:北京医科大学出版社,1999一、课程在培养方案中的地位、目的和任务本课程是口腔医学七年制、临床医学八年制必修基础课,分子生物学是一门从分子水平研究生命现象、生命本质及其规律的科学,近年来已在医药卫生及其它领域有着突飞猛进的发展,已成为医学生教学不可缺少的一部分。本课程的教学目的和任务,是使学生掌握分子生物学的基本理论、基本知识与基本技能,同时熟悉分子生物学在医学领域的应用。了解分子生物学的主要新进展和新技术。二、课程的基本要求1.基本理论和基本知识1.基本理论和基本知识(1)了解分子生物学的发展简史和医学的关系。(2)基因、结构基因及基因组的概念;真核基因与原核基因的结构特点;顺式作用元件的类型及特点;病毒、原核生物和真核生物基因组结构特点;人类基因组结构特点。(3)基因表达、基因表达调控、操纵子、多顺反子、反式作用因子、顺式作用元件等基本概念;原核生物基因转录起始的调控机制;真核生物转录水平的调控机制。DNA损伤与修复的概念;DNA修复的主要方式:切除修复、重组修复和跨损伤修复的概念及机制。(4)DNA双脱氧末端终止法、Southernblot杂交、Northernblot杂交、DNA芯片技术和PCR等技术原理及其应用;RT-PCR和Real-timePCR技术原理及应用。(5)限制性核酸内切酶的概念与特点;载体的概念;质粒的特点;基因克隆的基本过程;外源基因在大肠杆菌和哺乳动物细胞中表达的基本要素。(6)蛋白质组、蛋白质组学的概念;蛋白质组学的基本研究方法:双向电泳、质谱技术。(7)基因突变的概念;基因突变的类型及特点;基因突变的遗传学效应;常用的基因功能分析方法:转基因技术、基因敲除技术、反义技术、RNA干扰技术。(8)基因诊断的概念及其特点;基因诊断的常用技术。(9)基因治疗的概念、基本策略及常用载体;治疗基因的受控表达原理与方法。2、基本技能(1)掌握人类基因组DNA提取的原理与方法。(2)掌握琼脂糖凝胶电泳的原理和方法。(3)掌握碱裂解法小量提取质粒DNA的原理和电泳分析方法。(4)掌握重组质粒DNA的酶切鉴定及电泳分析方法。(5)掌握PCR反应的操作步骤及PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测方法。三、课程的基本内容以及重点难点第一章绪论目的要求了解:分子生物学的定义、研究对象和研究内容;分子生物学发展简史;生物遗传物质的发现;现代分子生物学的建立和深入发展;分子生物学与相关学科的关系;分子生物学在医学和生物学中的应用。讲课时数:2学时教学内容:第一节分子生物学的研究对象1.分子生物学的定义2.分子生物学的研究内容第二节分子生物学发展简史1.生物遗传物质的发现2.现代分子生物学的建立3.现代分子生物学的深入发展第三节分子生物学与相关学科的关系1.分子生物学与生物化学2.分子生物学与细胞生物学3.分子生物学与遗传学4.分子生物学与生物技术第四节分子生物学与医学未来1.分子生物学在医学和生物学中的应用2.分子生物学与基础医学3.分子生物学和病理学教学方法(建议):讲授法教学手段:多媒体教学自学内容:第二章基因与基因组目的要求掌握:基因、结构基因及基因组的概念;真核基因与原核基因的结构特点;顺式作用元件的类型及特点;病毒、原核生物和真核生物基因组结构特点;人类基因组结构特点。熟悉:基因组学的概念;人类基因组作图;质粒、转座因子、基因家族的特征。了解:乙肝病毒、反转录病毒基因组结构特点;人类基因组计划;基因组学的研究内容。重点:基因的结构,顺式作用元件的类型及特点;病毒、原核生物和真核生物基因组结构特点;人类基因组特点。难点:基因的结构;人类基因组的结构特点。讲课时数:4学时教学内容:第一节基因1.基因概念的发展2.基因的化学本质3.基因的概念4.基因的结构第二节基因组1.病毒基因组2.原核基因组3.真核基因组4.人类基因组5.基因组学教学方法(建议):讲授法为主教学手段:多媒体教学第五章基因表达的调控目的要求掌握:基因表达、基因表达调控、操纵子、多顺反子、反式作用因子、顺式作用元件等基本概念;原核生物基因转录起始的调控机制;真核生物转录水平的调控机制。熟悉:原核基因表达和真核基因表达的特点;原核生物基因转录终止的调控;真核生物基因组DNA水平调控的不同方式;转录后调控的不同环节及意义;翻译水平和翻译后水平调控的基本环节。了解:原核生物翻译水平的调控机制;反式作用因子的作用方式;基因表达的调控网络与协同控制。重点:乳糖操纵子的转录调控机制;真核基因转录水平及转录后水平的调控机制。难点:原核基因操纵子的转录终止的调控机制。讲课时数:4学时教学内容:第一节原核生物基因表达的调控1.原核生物基因表达的特点2.原核生物基因表达调控的机制转录起始的调控;转录终止的调控;翻译水平的调控第二节真核生物基因表达的调控1.真核生物基因表达的特点2.真核生物基因表达调控的机制基因组DNA水平的调控;转录水平的调控;转录后水平的调控;翻译水平的调控;翻译后水平调控第三节基因表达的调控网络与协同控制教学方法(建议):讲授法教学手段:多媒体教学第六章DNA损伤与修复目的要求掌握:DNA损伤与修复的概念;切除修复、重组修复和跨损伤修复的概念及机制。熟悉:真核生物诱导修复的主要机制。了解:DNA损伤的因素;DNA损伤和修复的生物学意义。重点:切除修复、重组修复和跨损伤修复的机制。难点:真核生物诱导修复的主要机制与特点。讲课时数:2学时教学内容:第一节DNA损伤的原因及后果1.DNA分子的自发性损伤DNA复制产生误差;DNA的自发性化学变化;2.物理因素引起的DNA损伤紫外线照射引起的DNA损伤;电离辐射引起的DNA损伤;3.化学因素引起的DNA损伤烷化剂对DNA的损伤;碱基类似物、修饰剂对DNA的损伤;DNA损伤的后果4.DNA损伤的检测和DNA损伤相关的蛋白质第二节DNA修复1.错配修复2.直接修复3.碱基切除修复4.核苷酸切除修复5.重组修复6.跨损伤修复7.线粒体损伤和修复8.基因的损伤与修复异常所致的疾病教学方法(建议):讲授法教学手段:多媒体教学第七章基因结构与表达分析的基本策略目的要求:掌握:DNA双脱氧末端终止法、Southernblot杂交、Northernblot杂交、DNA芯片技术和PCR等技术原理及其应用;RT-PCR和Real-timePCR技术原理及应用。熟悉:Westernblot原理及其应用。了解:RNA酶保护试验原理及应用;原位杂交技术;流式细胞术的应用;免疫组化方法的应用;其它PCR衍生技术。重点:Southernblot杂交和PCR等技术原理及应用;Northernblot杂交、DNA芯片技术、RT-PCR和Real-timePCR技术原理及应用。难点:DNA双脱氧末端终止法测序、RNA酶保护试验原理及应用及Real-timePCR原理。讲课时数:6学时教学方法(建议):讲授法教学手段:多媒体教学教学内容:第一节DNA序列分析1.双脱氧末端终止法2.化学降解法3.DNA序列分析的自动化第二节核酸分子杂交技术1.核酸分子杂交的原理2.Southern印迹杂交3.Northern印迹杂交4.斑点杂交和狭缝印迹杂交5.原位杂交6.液相杂交第三节聚合酶链式反应1.PCR反应基本原理2.耐热的DNA聚合酶3.PCR引物及设计原则4.PCR反应条件的优化5.常用的PCR改进技术第四节基因芯片和微阵列技术1.芯片制备技术2.样品制备与杂交反应3.DNA芯片技术的主要应用第五节Western免疫印迹技术第六节基因结构与表达分析的其它技术1.cDNA末端快速扩增技术2.PCR产物单链构象多态性检测3.限制性片段长度多态性第八章基因工程与基因体外表达目的要求掌握:限制性核酸内切酶的概念与特点;载体的概念;质粒的特点;基因克隆的基本过程;外源基因在大肠杆菌和哺乳动物细胞中表达的基本要素。熟悉:其他常用工具酶的特点;定点诱变技术原理;真核细胞转染的方法及基本原理。了解:昆虫表达系统、酵母表达系统特点;电子克隆概念。重点:基因克隆的基本过程。难点:α-互补筛选;转染细胞的筛选;定点诱变技术原理。讲课时数:6学时教学内容:第一节基因克隆工具酶1.限制性核酸内切酶2.其他常用工具酶第二节基因克隆的载体1.常用的克隆载体质粒、λ噬菌体、黏性质粒、M13噬菌体、病毒载体2.表达载体原核表达载体、真核表达载体第三节基因克隆的基本过程1.目的基因获取2.载体的选择和准备3.DNA片段的体外连接4.重组DNA导入宿主细胞5.重组DNA的筛选与鉴定第四节真核细胞的转染1.真核细胞转染的方法与基本原理2.转染细胞的筛选第五节基因的改造1.基因定点诱变技术2.基因定点诱变技术的应用第六节克隆基因的表达1.大肠杆菌表达系统2.哺乳动物细胞表达系统3.其他表达系统第七节电子克隆教学方法(建议):讲授法教学手段:多媒体教学第九章蛋白质组学的研究方法和进展目的要求掌握:蛋白质组、蛋白质组学的概念;蛋白质组学的基本研究方法:双向电泳、质谱技术。熟悉:生物信息学在蛋白质组学研究中的应用;酵母双杂交技术;噬菌体表面显示技术及基于质谱的蛋白质相互作用研究方法;蛋白质芯片技术。了解:蛋白质组学的产生与发展;定量蛋白质组学;疾病蛋白质组学的概念;蛋白质组学在疾病研究中的应用。重点:蛋白质组学的基本研究方法。难点:蛋白质功能模式的研究方法。授课学时:2学时基本内容第一节蛋白质组学的概念及其发展简史1.蛋白质组学的概念2.蛋白质组学的产生和发展第二节蛋白质组学研究方法概述1.蛋白质组表达模式的研究方法2.蛋白质组功能模式的研究方法第三节蛋白质组学在疾病研究中的应用教学方法(建议):讲授法教学手段:多媒体教学第十一章疾病产生的分子基础目的要求掌握:基因突变的概念;基因突变的类型及特点;基因突变的遗传学效应;常用的基因功能分析方法:转基因技术、基因敲除技术、反义技术、RNA干扰技术。熟悉:血红蛋白病的发病分子机制;突变基因的结构分析方法、基因表达异常的主要分析方法的原理。了解:细胞间异常信号、细胞内因素、翻译后加工运输障碍及病原生物基因导致的疾病。重点:基因突变的类型、特点及遗传学效应;常用的基因功能分析方法。难点:疾病分子机制的研究策略。讲课时数:4学时教学内容:第一节基因结构改变引起疾病1.基因突变的类型2.基因突变的遗传效应4.结构基因变异引起疾病5.调控序列变异引起疾病第二节细胞间异常信号导致基因表达异常1.细胞间信号异常与疾病第三节细胞内因素导致基因表达异常引起的疾病1.细胞内信号异常2.异常DNA甲基化第四节翻译后加工运输障碍引起疾病1.翻译后加工2.酪氨酸酶翻译后加工异常与白化病第五节蛋白质降解异常引起疾病1.蛋白质降解异常2.泛素-蛋白酶体途径第六节病原生物基因引起疾病1.病原生物基因引起疾病的机理及特点第七节