猪传染性胸膜肺炎的诊断与防治

1猪传染性胸膜肺炎的诊断与防控王华听1，（1.上海恒丰强动物药业有限公司，上海松江201600；）【摘要】猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的一种猪呼吸道传染病。因本病血清型较多，各血清型之间缺乏很好的交叉免疫保护力[3]，故其诊断与防治都较为困难，近几年给养猪业造成了严重的经济损失。为此，本文重点在于阐述猪传染性胸膜肺炎的诊断和综合防治，进而为该病的防控提供参考和帮助。【关键词】猪传染性胸膜肺炎；诊断；综合防治猪传染性胸膜肺炎（Porcinecontagiouspleuropneumonia，PCP）又称猪胸膜肺炎，是由猪胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacilluspleuropneumoniae，APP）引起猪呼吸系统的一种严重的接触性传染病。本病在临床上以急性出血性纤维性胸膜肺炎和慢性纤维性坏死性胸膜肺炎为特征[1]。APP目前鉴定的有15种血清型，在我国流行的优势血清型主要是血清型1型、2型、3型和7型。猪传染性胸膜肺炎，因病菌血清型众多，各血清型之间很少有交叉免疫保护作用，故疫苗的应用也受到了一定的限制。抗生素使用存在着诊断不确切和细菌的耐药性问题，进而防治成本增大。因此，快速的诊断技术、疫苗和药物的合理应用对于预防和控制该病具有十分重要的意义。1.流行病学特点1.1易感性：各种年龄的猪均易感，通常以6周～6月龄的猪较为多发，病重病例多发生于育肥晚期，死亡率约20%～100%不等，这可能与饲养管理和气候条件有关。1.2传染源与传播途径：病猪和带菌猪是本病的主要传染源，猪与猪之间的密切接触和排泄污染物是本病传播的主要途径。病菌主要存在于患猪的支气管、肺脏和鼻汁中，从鼻腔排出后形成飞沫，经空气传播，拥挤和通风不良可加速传播[1]。1.3本病具有明显的季节性，多在4～5月和9～11月发生。饲养环境突然改变、密集饲养、通风不良、气候突变以及长途运输等应激因素可引起本病的发生，因此又称为“运输病”。此外，临床上多与猪地方性肺炎、猪副嗜血杆菌病等混合感染，进而可加重病情。2临床诊断：本病潜伏期1-2天，临床上可见最急性型、急性型、亚急性或慢性型。2.1最急性型：病猪突然发病，未见任何临床症状就突然死亡，或者可以看到体温升高达42℃以上，有轻微的腹泻和呕吐症状，死前口鼻流出带泡沫血样分泌物。2.2急性型：精神不振，食欲减退，体温高达41.5℃以上，腹泻；喘气、咳嗽、呼吸困难常呈犬坐犬卧姿势，张口伸舌，从口鼻流出带泡沫的血样分泌物；个别猪的口、鼻、耳、四肢等皮肤呈暗紫色；心跳加快，一般于48小时左右因心力衰竭而死亡。2.3亚急性和慢性型：病猪体温略高或正常，但呼吸道症状明显，不断咳嗽、喘气，尤其是受到外界刺激或驱赶后会表现明显的腹式呼吸；食欲减退，增重减慢，饲料转化率降低。2.4病理变化死亡的猪只多表现为双侧性纤维素性胸膜肺炎，以肺的心叶、尖叶和部分隔叶见多见。病灶区呈暗紫色，质度较硬，切面发脆，常与胸膜粘连，肺间质内积有许多血色胶样液体；2急性病例可见整个肺脏呈现充血、出血、肿大，肺间质增宽，气管、支气管内充满泡沫样血色渗出物；亚急性病例整个肺脏的色泽与正常肺脏相似，但有时肿大或呈斑驳状；慢性病例主要表现肺脏的纤维素性坏死病变，一般不肿大，多见肺脏的囊肿或与胸腔粘连。3鉴别诊断：本病主要与猪支原体性肺炎、肺炎性巴氏杆菌病、猪副嗜血杆菌病以及病毒性呼吸道疾病相区别：3.1支原体性肺炎一般体温不升高，食欲基本正常，多表现气喘与咳嗽，剖见主要表现为肺部两侧对称性肉样变或胰变，很少见死亡。3.2多杀性巴氏杆菌病肺部病变多见前下部，胸膜肺炎的肺部病变多见后上部且有局灶性的纤维素性胸膜炎。3.3猪副嗜血杆菌病的病变为多系统性，除了胸腔组织脏器的病变外，腹腔、脑膜以及关节都有不同程度的病变。3.4病毒性呼吸道疾病，如蓝耳病、伪狂犬等均有母猪流产、神经症状等临床表现，具体的诊断需要借鉴各自的流行病学以及血清学检测。4.实验室诊断4.1病原学诊断技术病原分离鉴定是细菌病原微生物诊断最经典方法。从病猪的鼻腔、气管/支气管、扁桃体、肺部组织及分泌物中采取新鲜病料，按照常规革兰氏染色法染色后用光学显微镜观察，胸膜肺炎放线杆菌为革兰氏阴性菌。利用加有抗生素的选择性培养基进行初代分离培养，特别是混合感染时。初次分离可用10%绵羊血液琼脂平板（添加烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD），与表皮葡萄球菌交叉划线，在10%CO2温箱中过夜培养后，可以看到β-溶血的小菌落在划线周边生长。然后挑选可疑菌落纯培养后作生化鉴定，主要包括CAMP实验、脲酶活性及甘露糖发酵等。胸膜肺炎放线杆菌CAMP试验、脲酶试验及甘露糖发酵试验等为阳性。4.2ApxIV-PCR病原诊断目前已经鉴定APP的外毒素有ApxI、ApxII、ApxIII和ApxIV四种，其中前三种具有溶血和/或细胞毒性，目前尚未发现ApxIV具有明显的毒力。每种血清型的菌株只分泌四种毒素中的2-3中[2,3]。所有15种血清型的APP菌株均能在感染动物体内分泌ApxIV，但在体外培养条件下不分泌，而且ApxIV是其他种的放线杆菌所不具有的Apx毒素，因此基于ApxIV的诊断方法可用于猪传染性胸膜肺炎的特异性诊断。陈焕春、周锐等用ApxIV-PCR诊断技术检测了139份临床病料（91份肺脏、16份扁桃体和32份鼻拭子），并与细菌分离的结果相比较，符合率为99%[2]。4.3血清学诊断技术现在用于APP实验室诊断的血清学技术比较多，比如补体结合试验（CFT）、凝集试验（AT）、间接血凝试验（IHA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、乳胶凝集实验（LAT）、免疫扩散试验（IT）、环状沉淀试验（RPT）以及间接荧光体试验（IFA）等，其中最实用的是间接血凝试验（IHA）和酶联免疫吸附试验（ELISA），现在简单介绍如下：4.3.1间接血凝试验（IHA）Nielson在1985年报道IHA能将APP血清型4和7分开，其他的许多检测方法都不能将这两种血清型分开。国内逮忠新等[4]报道，经戊二醛鞣酸化处理的绵羊红细胞用胸膜肺炎放线杆菌抗原致敏，以IHA检测猪传染性胸膜肺炎病猪血清抗体，对人工感染14天的猪血清阳性3检出率达80%。与猪瘟、猪肺疫、猪喘气病、猪萎缩性鼻炎阳性血清无交叉反应。本检测方法适用于猪传染性胸膜肺炎流行病学的调查和定性。IHA具有敏感、特异以及可早期诊断的特点，且操作简单，适用于生产中推广应用。4.3.2酶联免疫吸附试验（ELISA）ELISA敏感性好，简便快速，可方便用于临床诊断、实验室检测和血清学调查。用于检测APP的ELISA方法主要有两种：一种是型特异性ELISA，仅能对某一种血清型的APP作出检测；另一种是种特异性ELISA，其检测结果与CFT试验相关性很高，敏感性比CFT高，对于实验室检测和养猪场APP监控非常有用。临床上常用ApxIV-ELISA、ApxII-ELISA等抗体诊断技术。用ApxIV-ELISA和猪传染性胸膜肺炎间接血凝（IHA）试剂盒（兰州兽医研究所研制）平行检测临床送检的184份猪血清，两者检出的阳性样品分别为121份和94份，阴性分别为63份和90份，可见ApxIV-ELISA比IHA更敏感[2]。5.综合防治5.1加强饲养管理和生物安全管制加强饲养管理，减少各种应激，保持猪群足够均衡的营养水平。注意通风换气，降低饲养密度，保证适宜的温湿度，定期消毒和驱虫，有条件的猪场最好采用“自繁自养”、“全进全出”的饲养方式，对于断奶仔猪应做好建立防治猪副嗜血杆菌病和猪传染性胸膜肺炎的药物保健措施。5.2疫苗免疫5.2.1灭活疫苗选用在全国各地流行的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的主要优势血清型1、2、3和7型的菌株，按照常规的方法制备成多价型灭活苗。陈焕春等研制的APP血清1、2和7型三价灭活苗通过在临床上免疫接种妊娠90天母猪、35-40天仔猪和育肥猪，整个观察实验中未出现不良反应，且妊娠母猪产仔正常，表明疫苗安全可靠。5.2.2基因工程弱毒疫苗基因工程弱毒苗是一种将Apx毒素的基因编码中C基因缺失的弱毒活疫苗。陈焕春、贝为成等以APP血清1型（本菌株是可同时分泌ApxI、ApxII和ApxIV毒力因子且毒力最强的菌株）为亲本菌株，同时缺失了ApxI和ApxII两个重要的毒力因子，获得了双基因缺失突变菌株，并进一步研制成疫苗。动物试验证实，该突变菌株不仅毒力大大降低，而且免疫动物（猪）对同源血清型攻击获得了完全保护，而对其他多种血清型攻击保护率也达到了80%以上，该菌株是一种很好的疫苗菌株，并且本疫苗已经获得了安全证书，正在进一步申报临床试验[3]。基因工程缺失弱毒疫苗若能够很快应用于养猪实际中，猪传染性胸膜肺炎在我国的严重流行和防治就会得到进一步的控制。5.2.3疫苗免疫程序：怀孕母猪：产前20-30天免疫APP多价灭活苗种公猪：每半年免疫一次免疫APP多价灭活苗仔猪：4-8周龄免疫APP多价灭活苗，2周后加强免疫一次后备猪：隔离期免疫一次。3周后再加强免疫一次。5.3药物防治5.3.1阶段性药物保健根据对近几年国内外用药情况和实验室药敏试验结果的分析，猪胸膜肺炎放线杆菌主要对头孢噻呋、头孢喹诺、替米考星、氟苯尼考、阿莫西林、恩诺沙星等敏感。4大多数分离的胸膜肺炎放线杆菌都可以产生一种或多种抗生素耐药性，并且本病在临床上主要危害仔猪和育肥猪，所以各养殖场应该结合猪生产各阶段的饲养管理要求，科学合理地制定一个既能避免病菌对药物产生耐药性，又能减少发病和减低用药成本的药物保健方案，笔者这里推荐“阶段性药物保健方案”。所谓阶段性药物保健，是指在妊娠母猪妊娠后期、母猪分娩前后、仔猪断奶前后、生长猪12-18周龄、外购仔猪隔离期内等阶段交替使用敏感药物进行预防保健，以减少疾病的发生[5]。推荐方案如下：（1）拌料：每1吨饲料，添加清开灵颗粒1袋+恒福星10袋，混合拌料，连用7天，以提高机体免疫力和抵抗力，控制疾病的继发感染。（2）饮水：每1吨水中，添加猪用维多利1瓶+维生素C（300ppm），混合饮水，连用7-10天。5.3.2药物治疗猪传染性胸膜肺炎可单发或混合感染，临床上多与猪副嗜血杆菌病、支原体性肺炎、猪瘟、圆环病毒感染等混合发生，所以治疗时要综合考虑分析，坚守以下治疗原则：1、积极对症治疗，控制病原微生物的继发感染，减少并发症。（1）清开灵（主要成分：黄芪多糖、金银花、黄芩苷、去氧胆酸）+恒丰强阿莫西林（主要成分：阿莫西林钠、棒酸），混合肌注，一天一次，以退热促食、抗菌消炎、抗病毒、减轻病症。（2）混感红弓链（主要成分：磺胺间甲氧嘧啶钠、新砷凡纳明、强力霉素）+氟苯尼考注射液（单方制剂），按20mg/kg体重，混合肌注，以有效控制继发感染，巩固疗效。2、重构动物机体非特异性主动免疫功能，提高猪体自身的免疫力和抵抗力，减少应激。（1）拌料：每1吨饲料添加清开灵颗粒1袋+恒福星10袋+丰强甘爽宁10袋，混合拌料，连用7天（2）饮水：每1吨水中，添加猪用维多利1瓶+维生素C（300ppm），混饮，连用7-10天。3、强化饲养管理，把好饲料质量关，科学合理地消毒（1）消毒：使用至少两种不同的消毒药物和不同的消毒方式而交替对环境、圈舍、设备、机体以及空气等进行消毒，每周3-4次，以避免微生物发生耐药性或抗药性。此外，药物浓度不可以过强，以免损伤腔道黏膜，加重病情。（2）饲养管理：注意病猪的营养需求，注意饲料发霉，降低饲养密度，增加通风，多加喂青绿多汁饲料，多增加一些抗热应激药物。【参考文献】:[1]宣长和等主编.猪病学（第二版）[M].北京：中国农业科学技术出版社，2003.4:110-122[2]陈焕春，贝为成，何启盖等.猪传染性胸膜肺炎诊断技术和疫苗的研究[C].湖北武汉：第八届全国规模化猪场主要疫病控制与净化专题研讨会论文集.2006:97-100[3]陈焕春，周锐等.猪传染性胸膜肺炎的诊断与防治技术研究[J].湖北养猪，2007,4:5-8[4]唐文山、李昕.猪传染性胸膜肺炎研究进展[J].兽药信息,2008,5：21-23[5]王华听，程明镜，段凤灵.规模化猪场“高热病”