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打开电脑及仪器电源，待仪器电源项显示power绿色状态。首先，双击电脑桌面上的图标打开程序，打开程序单击OK，待软件连接仪器并测试校准状态后（若有出现连接失败可尝试重启电脑，检查USB线接口），出现如下界面，单击DesignWizard选项，红色箭头指示位置有个下拉菜单，下拉菜单中有一个AdvancedSetup（高级设置）选项，如箭头所示：点击这个选项，可以进入下面这个界面，如上图所示，红色箭头从上到下指示的分别是①实验名称、②仪器型号和③反应程序类型。（带*号的必需填）而这个图是上面图的延续（自己电脑显示不完全），红色箭头从上到下指示的分别是①PlateSetup选项、②探针类型和③程序应用速度类型，一般使用的探针就是TaqMan探针，速度类型选择默认就可以了（如果是7500fast的话则有快速模式可以选择）。下一步我们可以看到左上角的红色箭头指示的一个PlateSetup选项，点击这个选项，就可以进入下一个设置界面。①②③①②③红色箭头①和②指的是设定反应探针和反应样品名称，箭头③处可以填写反应探针名称（如HBV,HCV,或以公司名称DAAN、KHB。。。）箭头⑤是选择报告荧光，一般使用的发光基团是FAM，箭头⑥是选择粹灭荧光，达安现在使用的是TAMRA荧光，科华现在使用的是BHQ，在这个仪器中无此选择项，那么就选择none。箭头⑧处可以填写样品名称。点击箭头④和箭头⑨处可以添加反应探针体系名称和样品名称。箭头⑦和箭头⑩是选择对应探针体系和对应样品的曲线颜色，可选择也可以不选。（另：探针跟样品设定后可保存，方便以后实验调用，具体是点击箭头①②下面的SavedTaeget，下次调用则点击AddSaved。。。就可调出。）为了方便讲解，我假定有1个反应探针DAAN和1个样本HBV1，如上图所示。设定完成之后，我们点击红色箭头所指的选项，进入下个界面。①②①③①④⑦①⑤④①⑦⑨①①⑥⑤①⑧⑥①⑨⑧①⑩①在上图，我们可以看到一个类似反应板的界面，黑色箭头①指示的有玫瑰红色下划线那一排在选定反应孔后会显示出样本孔总数，标准品总数和阴性对照总数。从黑色箭头②可以看出暂时还有48个反应孔空余。蓝色箭头①和②分别是放大这个孔板界面的按钮，蓝色箭头③是显示大小还原默认设置按钮。开始设置时；首先我们如红色箭头①所示选定A1孔，红色箭头②指示的是反应探针名称，红色箭头③指示的样品类型，选定反应体系后可以在U——未知样本，S——标准样本，N——阴性样本中选择一个。红色箭头⑤是个下拉菜单可以选择反应探针，在红色箭头④指示的框里单击鼠标，显示打钩就说明选定了反应体系。红色箭头⑥指示的是样品名称，红色箭头⑧是个下拉菜单可以选择样品名称。在红色箭头⑦指示的框里单击鼠标，显示打钩就说明选定了样品名称。红色箭头⑨指示的参比荧光，仪器默认是ROX，但是产品一般没有添加ROX荧光，所以必须选择None。红色箭头⑩指示的定量标准品的设置，可根据标准曲线的值从4567升序或是从7654降序的排列，单击可弹出以下界面，具体如下。上图中，红色箭头①表示标准品的数量，②表示标准品是否走重复孔，③表示起始的浓度，④表示10×的话则为升序，按照4567的浓度；1:10的话则为降序，按照7654的浓度。例如做了4个标准品，每个标准品做1个（即没有做复孔），起始浓度为10000，选择10×，选择箭头⑤的自己选择孔位，点击左下角的Apply，则在第10排按照4567次方的顺序排列。。此外也可以选择鼠标双击类似反应孔板的那个界面，会出现下面这个界面:如上图所示，选定反应孔双击后会出现这样一个界面，红色箭头①指示的Task—样品反应类型，红色箭头②是指示的是Target—反应探针，红色箭头③指示的是Sample—样品名称。这三个都是下拉菜单，可以选择前面设置好的反应体系和样品名称。红色箭头④是个文本框，可以备注样本的详细信息。按照样本放置的实际情况设置好之后，可以点击红色箭头⑤指示的RunMethod选项进入下个界面①②①③①④①⑤④①②①①③①④①⑤①上图的箭头①是设定反应体系体积的，箭头②是添加反应程序阶段的，箭头③是添加反应程序步骤的，箭头⑤和⑥是制订收集荧光信号的标志，例如箭头⑥所示高亮显示时表示在此步骤收集荧光信号。（切记，收集荧光只能1个地方，若是出现2个收集荧光信号的，则软件上会有出现蓝色的错误提示）设定好循环条件，就可以进行模板保存，以便下次实验时调用程序，点击位于软件中间最右方的键（注：这个键是由于本人电脑不是宽屏的（14寸acer。。。），如果是AB配的E6500电脑则可以在软件上全部显示，不会出现键或是那些滑动条，但是。。字体会小点，，），选择保存运行的模板，命名。下次实验使用的时候就不用再在设条件，直接点击openrunmethod，调出你所需要做的实验的扩增条件。还有上图左方的reactionsetup（反应体系设置）和materialslist（耗材清单）不需要我们去设置。点击箭头⑦所指的run进入运行界面。③①①③①④③①②③①⑤③①⑥③①⑦①③①直接点击上图中的绿色START按钮，根据提示保存实验文件后开始实验，实验开始后在绿色START按钮右方可出现实验的预计剩余时间。箭头②表示的是实时的曲线图谱，③表示的是实时的温度曲线图谱，④表示的是实验的条件。实验结束后按箭头⑤所指的分析，出现以下界面。做完实验后，曲线会出现在上图，以对数图谱的形式出现，若想换为线性图谱，可点击箭头①所指示的去选择log或linear，其次，再点击箭头⑧的分析按钮（有实验数据的话会出现的是analysis），样本的结果跟CT会在右边的96孔面板中出现，上面的显示不完全，曲线的基线baseline跟阈值threshold设置是在上图数字⑦下面的那个地方（不是箭头⑦所指的地方），进行设置。箭头③表示的是实验标准曲线的参数。箭头④⑤表示的是每个孔的原始光谱图。箭头⑥表示的是一些附加的报警信息，例如重复孔偏差了，荧光偏差了，质控失控了。箭头⑦表示的是上面4中图谱的集合，可自己选择组合查看。①⑦①③①④⑦①③①③⑦①③①②㈡②⑦①③①⑤④⑦①③①①⑤④⑦①③①②⑤④⑦①③①⑦⑤④⑦①③①⑥⑦⑤④⑦①③①⑤④⑦①③①④⑤④⑦①③①③⑤④⑦①③①⑧①⑤④⑦①③①