搜索
MS培养基配方及所用培养基种类:成分每升培养基取用量（mL）20*储备液1（大量元素）1升储备液用量（g）50NH4NO333KNO338CaCl2.2H2O8.8MgSO4.7H2O7.4KH2PO43.4200*储备液2（微量元素）5KI0.166H3BO31.24MnSO4·4H2O4.46ZnSO4·7H2O1.72Na2MoO4·2H2O0.05CuSO4·5H2O0.005CoCl2·6H2O0.005200*储备液3（铁盐）5FeSO4·7H2O5.56Na2-EDTA·2H2O7.46200*储备液4（有机成分）5肌醇20烟酸0.1盐酸吡哆醇(维生素B6)0.1盐酸硫胺素(维生素B1)0.02甘氨酸0.4上述几种母液都要单独配成1L的贮备液。其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1L。母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1L，保存在棕色玻璃瓶中。各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。称取琼脂8g、蒸糖30g，放入1000mL的搪瓷量杯中，再加入蒸馏水750mL，用电炉加热，边加热边用玻璃棒搅拌，直到液体呈半透明状。然后再将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中，搅拌均匀。用浓度为1mol/L的NaOH溶液调PH值至5.8（培养基的pH必须严格控制在5.8），最后加蒸馏水定容至1000mL。(各种激素均过滤除菌后加入灭过菌的培养基中，以防高温高压下激素分解。)小麦培养基配方培养基类型MS2，4-D(mg/L)甘露醇(mg/L)ABA(mg/L)NAA(mg/L)ZT(mg/L)IAA(mg/L)筛选剂(mg/L)愈伤组织诱导培养基MSIMS1.0-0.5----高渗培养基MSOMS1.00.4-----诱导培养基MSSIMS1.0-----选择分化培养基MSSRMS----21生根培养基MSRMS---0.5--贮存液（1000x）工作液2，4-D1.0mg/mL1.0mg/L甘露醇0.4mg/mL0.4mg/LABA0.5mg/mL0.5mg/LNAA0.5mg/mL0.5mg/LZT2.0mg/mL2.0mg/LIAA1.0mg/mL1.0mg/L琼脂8g蔗糖30g水解酪蛋白0.20g谷氨酸胺0.25g1.1.0mg/mL2,4—D贮存液：用万分之一天平称取10mg（0.01g）的2,4—D，先用1M的NaOH溶解后，室温下加水定容至10ml，过滤除菌，分装，4℃冰箱中保存。2.0.4mg/mL甘露醇：用万分之一天平称取4mg（0.004g）甘露醇，用少量的1MNaOH溶解后转入10mL容量瓶中，过滤除菌，分装，4℃冰箱中保存。3.0.5mg/mLNAA：用万分之一天平称取5mg（0.005g）NAA，用少量的1MNaOH溶解后转入10mL容量瓶中，过滤除菌，分装，4℃冰箱中保存。4.2.0mg/mLZT：用万分之一天平称取20mg（0.02g）ZT，用少量的1MNaOH溶解后转入10mL容量瓶中，过滤除菌，分装，4℃冰箱中保存。使用时将1ul的1000x贮存液加入1mL的MS液体培养基中。5.10mmol/L的AS（乙酰丁香酮）母液（100x）配制：称19.6mg（0.0196g）的AS，先溶于少量甲醇中，然后慢慢加蒸馏水定容至10mL，过滤除菌，分装成200ul/管（每组1管），使用时将200uL的AS母液加入20mL的MS液体培养基中。6.1MNaOH配置：称取4.0gNaOH溶于100mL蒸馏水中。7.1MHCl配置：量取比重为1.2的浓HCl8.4mL，加蒸馏水定容至100mL。