细菌数量的测定

细菌数量的测定细菌数量的测定实验目的：1．学习微生物数量测定中常用的基本原理2．掌握几种测定细菌数量的方法3．学会使用血细胞计数板进行计数。细菌数量的测定测定方法1显微镜直接计数（计数板计数、载玻片计数）2平板菌落计数3比浊法材料用具菌种：酵母菌仪器：显微镜、血细胞计数板、计数器、无菌吸管、滤纸、盖玻片计数室计数室（中间大方格）的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其体积为______mm3，合_________mL。1mm0.11×10-4血细胞计数板（希里格式25×16、，麦式16×25）载玻片盖玻片计数室正面图B侧面图计数室计数室分为25中格（双线边）每一中格又分为16小格计数室是由___________个小格组成25×16=400细菌数量的测定操作步骤1菌液稀释2加样将计数板水平放置试验台上，盖上盖玻片于计数室上方，用吸管将菌液吹吸均匀，然后吸取少量菌液，从计数板一侧中间平台与盖玻片接触的边缘处加样，让菌液自行渗入并充满计数室，多余的菌液用滤纸吸去加样一气呵成，不可有气泡产生，不可使盖玻片悬浮细菌数量的测定3定位计数室现在低倍镜下找到计数板大方格的位置，转换高倍镜后，适当调暗光线至计数室线条清晰为止4计数A1A2A5A3A4选取如图5个中方格，进行计数。当遇上细胞位于分界线上时，按如下规则计数：记上不记下，记左不计右记上不记下，记左不计右计数室细胞数量太多，则菌液需要稀释再计数，每个中方格细胞数量不超过50个为宜。细菌数量的测定5计算菌液浓度1ml培养液中酵母菌数量（个/ml）=平均每个中格酵母细胞数×25×10480小格内酵母细胞个数／80×400×104×稀释倍数×稀释倍数