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德国德国德国德国Zeiss激光扫描共聚焦显微镜激光扫描共聚焦显微镜激光扫描共聚焦显微镜激光扫描共聚焦显微镜快速操作手册快速操作手册快速操作手册快速操作手册制作制作制作制作：：：：Zeiss光学仪器光学仪器光学仪器光学仪器（（（（上海上海上海上海））））国际贸易有限公司国际贸易有限公司国际贸易有限公司国际贸易有限公司孙孙孙孙凯凯凯凯2009年年年年6月月月月目录目录目录目录：：：：1系统的组成系统的组成系统的组成系统的组成系统组成及光路示意图系统组成及光路示意图系统组成及光路示意图系统组成及光路示意图实物照片实物照片实物照片实物照片说明说明说明说明2系统的使用系统的使用系统的使用系统的使用2.1开机顺序开机顺序开机顺序开机顺序2.2软件的软件的软件的软件的快速快速快速快速使用使用使用使用说明说明说明说明2.3显微镜显微镜显微镜显微镜的的的的触摸屏控制触摸屏控制触摸屏控制触摸屏控制2.4关机顺序关机顺序关机顺序关机顺序3系统的维护系统的维护系统的维护系统的维护1系统的组成系统的组成系统的组成系统的组成激光扫描共聚焦显微镜系统主要由激光扫描共聚焦显微镜系统主要由激光扫描共聚焦显微镜系统主要由激光扫描共聚焦显微镜系统主要由：：：：电动荧光显微镜电动荧光显微镜电动荧光显微镜电动荧光显微镜、、、、扫描检测单元扫描检测单元扫描检测单元扫描检测单元、、、、激光器激光器激光器激光器、、、、电脑工作站及各相关附件组成电脑工作站及各相关附件组成电脑工作站及各相关附件组成电脑工作站及各相关附件组成。。。。系统系统系统系统组成及光路组成及光路组成及光路组成及光路示意图示意图示意图示意图：：：：电脑工作站电脑工作站电脑工作站电脑工作站激光器激光器激光器激光器扫描检测单元扫描检测单元扫描检测单元扫描检测单元电动荧光显微镜电动荧光显微镜电动荧光显微镜电动荧光显微镜实物照片说明实物照片说明实物照片说明实物照片说明：：：：电动荧光显微镜电动荧光显微镜电动荧光显微镜电动荧光显微镜扫描检测单元扫描检测单元扫描检测单元扫描检测单元CO2培养系统控制器培养系统控制器培养系统控制器培养系统控制器激光器激光器激光器激光器电脑工作站电脑工作站电脑工作站电脑工作站2系统的使用系统的使用系统的使用系统的使用2.1开机顺序开机顺序开机顺序开机顺序（（（（1））））打开稳压电源打开稳压电源打开稳压电源打开稳压电源（（（（绿色按钮绿色按钮绿色按钮绿色按钮））））等待2分钟（电压稳定）后，再开其它开关（（（（2））））主开关主开关主开关主开关[MAINSWITCH]““““ON””””电脑系统电脑系统电脑系统电脑系统[SYSTEMS/PC]““““ON””””扫描硬件系统扫描硬件系统扫描硬件系统扫描硬件系统[COMPONENTS]““““ON””””（（（（3））））打开打开打开打开[电动显微镜开关电动显微镜开关电动显微镜开关电动显微镜开关]打开打开打开打开[荧光灯开关荧光灯开关荧光灯开关荧光灯开关]（注：具有5档光强调节旋钮）（（（（4））））Ar离子激光器离子激光器离子激光器离子激光器主开关主开关主开关主开关““““ON””””顺时针旋转钥匙顺时针旋转钥匙顺时针旋转钥匙顺时针旋转钥匙至至至至““““————””””预热预热预热预热等待约等待约等待约等待约15分钟分钟分钟分钟，，，，将激光器将激光器将激光器将激光器[扳钮扳钮扳钮扳钮]由由由由““““Standby””””扳至扳至扳至扳至““““Laserrun””””状态状态状态状态，，，，即可正常使用即可正常使用即可正常使用即可正常使用（（（（5））））打开打开打开打开[电脑开关电脑开关电脑开关电脑开关]，，，，进入操作系统进入操作系统进入操作系统进入操作系统注注注注：：：：键盘上也具有键盘上也具有键盘上也具有键盘上也具有[电脑开关电脑开关电脑开关电脑开关]2.2软件的快速使用说明软件的快速使用说明软件的快速使用说明软件的快速使用说明（1）电脑开机进入操作系统界面后，双击桌面共聚焦软件ZEN图标（2）进入ZEN界面，弹出对话框：““““StartSystem””””————————初始化整个系统，用于激光扫描取图、分析等。““““ImageProcessing””””————————不启动共聚焦扫描硬件，用于已存图像数据的处理、分析。（3）软件界面：1功能界面切换功能界面切换功能界面切换功能界面切换：：：：扫描取图扫描取图扫描取图扫描取图（（（（Acquisition）、）、）、）、图像处理图像处理图像处理图像处理（（（（Processing）、）、）、）、维护维护维护维护（（（（Maintain））））（（（（注注注注：：：：Maintain仅供仅供仅供仅供Zeiss专业工程师使用专业工程师使用专业工程师使用专业工程师使用））））2动作按钮动作按钮动作按钮动作按钮；；；；3工具组工具组工具组工具组（（（（多维扫描控制多维扫描控制多维扫描控制多维扫描控制））））；；；；4工具详细界面工具详细界面工具详细界面工具详细界面；；；；5状态栏状态栏状态栏状态栏；；；；6视窗切换按钮视窗切换按钮视窗切换按钮视窗切换按钮；；；；7图像切换按钮图像切换按钮图像切换按钮图像切换按钮；；；；8图像浏览图像浏览图像浏览图像浏览/预扫描窗口预扫描窗口预扫描窗口预扫描窗口；；；；9文档浏览文档浏览文档浏览文档浏览/处理区域处理区域处理区域处理区域；；；；10视窗中图像处理模块视窗中图像处理模块视窗中图像处理模块视窗中图像处理模块动作按动作按动作按动作按钮钮钮钮：：：：Single——扫描单张图片、并在图像预览窗口显示。Start————————开始扫描单张图片或一个实验流程（1组图片，如XYZ、XYT等）。Stop————————暂停/结束扫描。New————————建立一个新图像扫描窗口/文档。激光激光激光激光连接状况检查连接状况检查连接状况检查连接状况检查眼睛观察眼睛观察眼睛观察眼睛观察/相机相机相机相机/共聚焦共聚焦共聚焦共聚焦LSM光路切换光路切换光路切换光路切换（（（（ZEN软件界面右上角软件界面右上角软件界面右上角软件界面右上角）：）：）：）：Ocular——通过观察筒用眼睛观察。（激光安全保护装置自动阻断激光、保护眼睛。）Camera————————光路切换至相机。LSM————————共聚焦扫描成像光路。显微镜设置显微镜设置显微镜设置显微镜设置：：：：““““Ocular””””————————““““LightPath””””————————点击物镜图标点击物镜图标点击物镜图标点击物镜图标，，，，选择物镜选择物镜选择物镜选择物镜————————样品聚焦样品聚焦样品聚焦样品聚焦。。。。透射光控制透射光控制透射光控制透射光控制（（（（TransmittedLightControl））））反射光光闸控制反射光光闸控制反射光光闸控制反射光光闸控制（（（（ReflectedLightShutter））））荧光激发块选择荧光激发块选择荧光激发块选择荧光激发块选择（（（（Reflector））））共聚焦共聚焦共聚焦共聚焦LSM扫描设置扫描设置扫描设置扫描设置点击点击点击点击““““LSM””””（（（（ZEN软件界面右上角软件界面右上角软件界面右上角软件界面右上角）））），，，，系统切换至共聚焦扫描光路系统切换至共聚焦扫描光路系统切换至共聚焦扫描光路系统切换至共聚焦扫描光路：：：：光路设置光路设置光路设置光路设置：：：：SmartSetup————————自动预设光路自动预设光路自动预设光路自动预设光路选取“荧光探针”、“颜色”、扫描方法，应用“Apply”。（注：Fastest为最快速扫描，多条激光谱线同时扫描。Bestsignal为最佳信号扫描，多条激光谱线顺序扫描。Bestcompromise为兼顾速度与信号的折中式扫描。）扫描图像参数设置扫描图像参数设置扫描图像参数设置扫描图像参数设置：：：：每个通道的精细调节每个通道的精细调节每个通道的精细调节每个通道的精细调节：：：：包括包括包括包括：：：：（（（（1））））Pinhole的调节的调节的调节的调节（（（（一般设为一般设为一般设为一般设为1AU。。。。该值越大该值越大该值越大该值越大，，，，则信号越强则信号越强则信号越强则信号越强，，，，但共聚焦图像效果会降低但共聚焦图像效果会降低但共聚焦图像效果会降低但共聚焦图像效果会降低。。。。原则上原则上原则上原则上，，，，在保证图像质量的前提下在保证图像质量的前提下在保证图像质量的前提下在保证图像质量的前提下，，，，该值越接近于该值越接近于该值越接近于该值越接近于1AU越好越好越好越好）；）；）；）；（（（（2））））MasterGain的调节的调节的调节的调节（（（（增大则增大则增大则增大则信号和噪音都增强信号和噪音都增强信号和噪音都增强信号和噪音都增强，，，，减小则信号和噪音均减小减小则信号和噪音均减小减小则信号和噪音均减小减小则信号和噪音均减小。。。。原则上原则上原则上原则上，，，，在保证图在保证图在保证图在保证图像质量的前提下像质量的前提下像质量的前提下像质量的前提下，，，，Gain值越小越好值越小越好值越小越好值越小越好）；）；）；）；（（（（3））））DigitalOffset的调节的调节的调节的调节（（（（可扣除背景噪音可扣除背景噪音可扣除背景噪音可扣除背景噪音，，，，但标本信号但标本信号但标本信号但标本信号也也也也有一定程度的扣除有一定程度的扣除有一定程度的扣除有一定程度的扣除。。。。原则上原则上原则上原则上，，，，在保证图在保证图在保证图在保证图像质量的前提下像质量的前提下像质量的前提下像质量的前提下，，，，DigitalOffset值越接近于值越接近于值越接近于值越接近于0越好越好越好越好）；）；）；）；（（（（4））））DigitalGain的调节的调节的调节的调节（（（（增大则信号和噪音都增强增大则信号和噪音都增强增大则信号和噪音都增强增大则信号和噪音都增强，，，，减小则信号和噪音均减小减小则信号和噪音均减小减小则信号和噪音均减小减小则信号和噪音均减小。。。。原则上原则上原则上原则上，，，，在保证图在保证图在保证图在保证图像质量的前提下像质量的前提下像质量的前提下像质量的前提下，，，，Gain值越接近于值越接近于值越接近于值越接近于1.0~1.2越好越好越好越好））））；；；；（（（（5））））另外另外另外另外，，，，对于每个通道对于每个通道对于每个通道对于每个通道，，，，需要灵活调节激光的强度需要灵活调节激光的强度需要灵活调节激光的强度需要灵活调节激光的强度（（（（激光强度越高激光强度越高激光强度越高激光强度越高，，，，则信号越强则信号越强则信号越强则信号越强，，，，但噪音也相应增但噪音也相应增但噪音也相应增但噪音也相应增强强强强，，，，同时标本更容易被漂白或淬灭同时标本更容易被漂白或淬灭同时标本更容易被漂白或淬灭同时标本更容易被漂白或淬灭。。。。原则上原则上原则上原则上，，，，在保证图像质量的前提下在保证图像质量的前提下在保证图像质量的前提下在保证图像质量的前提下，，，，激光强度越低越好激光强度越低越好激光强度越低越好激光强度越低越好。）。）。）。）选择选择选择选择可连续扫描可连续扫描可连续扫描可连续扫描、、、、一边预览图像效果一边预览图像效果一边预览图像效果一边预览图像效果、、、、一边一边一边一边精细调节精细调节精细调节精细调节各个通道的扫描参数各个通道的扫描参数各个通道的扫描参数各个通道的扫描参数。。。。如果预览图像的效果可以如果预览图像的效果可以如果预览图像的效果可以如果预览图像的效果可以，，，，则先则先则先则先““““Stop””””，，，，再点击再点击再点击再点击““““Single””””或或或或““““Start””””即可完成图像的扫描即可完成图像的扫描即可完成图像的扫描即可完成图像的扫描。。。。图像的保存图像的保存图像的保存图像的保存：：：：三种方法三种方法三种方法三种方法：：：：（